烏麗雅蘇

（內(nèi)蒙古阿拉善盟食品藥品化妝品檢驗檢測中心，內(nèi)蒙古 巴彥浩特 750306）

吉日木松湯的薄層色譜鑒別

烏麗雅蘇

（內(nèi)蒙古阿拉善盟食品藥品化妝品檢驗檢測中心，內(nèi)蒙古 巴彥浩特 750306）

目的建立吉日木松湯薄層色譜鑒別方法。方法以脯氨酸對照品及鎖陽、甘草次酸及甘草作為對照，采用TLC鑒別方法。結(jié)果該方法提取完全，斑點清晰，分離理想。經(jīng)空白試驗證明：其他味藥對結(jié)果無干擾。結(jié)論吉日木松湯中鎖陽和甘草的薄層鑒別實驗操作簡便，無陰性干擾，重現(xiàn)性好，斑點清晰，專一性強，結(jié)果滿意，可以作為蒙藥吉日木松湯的薄層鑒別方法。

吉日木松湯；薄層色譜法；鎖陽；甘草

吉日木松湯為用于健胃，止反酸，嘔吐，尤其用于妊娠嘔吐的復(fù)方制劑。該方為湯劑劑型，處分由粳米，甘草，鎖陽，冰糖四味藥組成。處方中除了粳米（制）、冰糖外，其余二味藥材均在《中國藥典》2005年版一部有收載。

為提高民族藥的內(nèi)在質(zhì)量，建立了吉日木松湯中鎖陽和甘草的薄層鑒別的方法。該法操作簡便，無陰性干擾，重現(xiàn)性好，斑點清晰，專一性強，結(jié)果滿意，為該制劑的質(zhì)量提供了準(zhǔn)確的測定方法。

1 儀器與試劑

1.1 儀器：DG20-002臺式干燥箱，SLD-I型薄層顯色噴霧泵。

1.2 試劑：硅膠H（青島海洋華工廠產(chǎn)品）其他試劑均為分析純薄層板（10 cm×20 cm，自制，含0.5% cmc-Na）。

1.3 脯氨酸對照品（批號111659-200301）購自中國藥品生物制品檢定所。

1.4 甘草次酸對照品（批號110723-200310）購自中國藥品生物制品檢定所。

1.5 吉日木松湯生產(chǎn)廠家為阿拉善盟額濟納旗中蒙醫(yī)院（批號：20051125、20051129、20060318）。

2 方法與結(jié)果

2.1 A.鎖陽薄層鑒別[1]：溶液的制備。

2.1.1 對照品溶液的制備以及TLC實驗。

2.1.2 對照品溶液的制備：取脯氨酸對照品適量，加水制成每1 mL含2 μL的溶液，搖勻，即得。

2.1.3 對照藥材溶液的制備：取鎖陽對照藥材1 g，加水10 mL，浸漬30 min，濾過，取濾液即得。

2.1.4 供試品溶液的制備，取本品粉末5 g，加水10 mL，浸漬30 min，濾過，即得。

2.1.5 TLC實驗：取對照品溶液，對照藥材溶液，供試品溶液：分別吸取上述溶液各5 μL，點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠H薄層板上，以正丙醇－冰醋酸－乙酸－水（4∶1∶1∶2）為展開劑，展開，取出，晾干，噴以吲哚醌試液，晾干，在100 ℃加熱至斑點顯色清晰。結(jié)果表明，供試品色譜中，在于對照色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點。Rf值為0.52（圖1）。

圖1 1.供試品；2.脯氨酸對照品；3.鎖陽對照藥材

圖2 1.空白；2.脯氨酸對照品；3.鎖陽對照藥材

圖3 1.陽性供試品；2.脯氨酸對照品；3.鎖陽對照藥材

圖3 1.陽性供試品；2.脯氨酸對照品；3.鎖陽對照藥材

圖5 1.供試品；2.甘草次酸對照品；3.甘草對照藥材

圖6 1.空白；2.甘草次酸對照品；3.甘草對照藥材

圖8 1～3.供試品；4.甘草次酸對照品；5.甘草對照藥材

圖8 1～3.供試品；4.甘草次酸對照品；5.甘草對照藥材

2.1.6 空白試驗與自配對照品實驗。

2.1.7 陰性對照品實驗按處方自配缺鎖陽的吉日木松湯，制備成空白溶液，然后按上述方法點樣、展開、顯色。結(jié)果在與脯氨酸對照品及鎖陽對照藥材相應(yīng)的位置上沒有出現(xiàn)相應(yīng)的斑點。Rf值0.47（圖2）。

2.1.8 陽性對照品按照額濟納旗中蒙醫(yī)院所提供的處方，制備成吉日木松湯樣品，并按上述方法進行提取、點樣、展開，顯色。結(jié)果自配樣品在與對照品溶液相應(yīng)的位置上有相應(yīng)的斑點（圖3）。

說明只要生產(chǎn)中投料的鎖陽是合格的，生產(chǎn)工藝正確，其產(chǎn)品用本文的TLC方法就可以檢出相應(yīng)的鎖陽斑點。

2.1.9 樣品檢驗取額濟納旗中蒙醫(yī)院3批樣品，按上述TLC法檢驗，結(jié)果樣品在與對照品溶液相應(yīng)的位置上有相應(yīng)的斑點。Rf值0.46（圖4）。

2.2 B.甘草薄層鑒別[2]：對照品溶液的制備以及TLC實驗。

2.2.1 對照品溶液：取甘草次酸對照品，加甲醇制成每1 mL含2 mg的溶液，即得。

2.2.2 對照藥材溶液的制備：取甘草對照藥材1 g，同法制成對照藥材溶液。

2.2.3 供試品溶液的制備，取本品5 g，加鹽酸1 mL，氯仿15 mL，加熱回流提取1 h，放冷，濾過濾液蒸干，殘渣加乙醇2 mL使溶解，作為供試品溶液。

2.2.4 TLC實驗：取對照品溶液，對照藥材溶液，供試品溶液，吸取供試品溶液10 μL，對照品溶液2 μL，對照藥材2 μL分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以石油醚－苯－乙酸乙酯－冰醋酸（5∶10∶4∶0.6）為展開劑，展開，取出晾干，噴以10%磷鉬酸乙醇溶液，熱風(fēng)吹至斑點顯色清晰。供試品色譜中，于對照品色譜相應(yīng)的位置上顯相同顏色的斑點。Rf值為0.42（圖5）。

2.2.5 空白試驗與自配對照品實驗。

2.2.6 陰性對照品實驗按處方自配缺甘草的吉日木松湯，制備成空白溶液，然后按上述方法點樣、展開、顯色。結(jié)果在與對照品及鎖陽對照藥材相應(yīng)的位置上沒有出現(xiàn)相應(yīng)的斑點。Rf值為0.51（圖6）。

2.2.7 陽性對照品按照額濟納旗中蒙醫(yī)院所提供的處方，制備成吉日木松湯樣品，并按上述方法進行提取、點樣、展開，顯色。結(jié)果自配樣品在與對照品溶液相應(yīng)的位置上有相應(yīng)的斑點。Rf值為0.45（圖7）。說明只要生產(chǎn)中投料的甘草是合格的，生產(chǎn)工藝正確，其產(chǎn)品用本文的TLC方法就可以檢出相應(yīng)的甘草斑點。

2.2.8 樣品檢驗取額濟納旗中蒙醫(yī)院3批樣品，按上述TLC法檢驗，結(jié)果樣品在與對照品溶液相應(yīng)的位置上有相應(yīng)的斑點。Rf值為0.39（圖8）。

3 討 論

3.1 取樣量：供試品的取樣量為5 g，相當(dāng)于原藥材1 g。

3.2 從3批樣品的TLC結(jié)果可以看出3批樣品的質(zhì)量較好，均與對照品和對照藥材有相應(yīng)的斑點。

3.3 提取條件與展開系統(tǒng)的選擇：脯氨酸是組成蛋白質(zhì)的常見氨基酸之一，脯氨酸以天然存在形式，膠原的主要成分之一。為無色針狀結(jié)晶，含一個結(jié)晶水。熔點為190 ℃（無結(jié)晶水，205 ℃分解）。具有潮解性。能溶于水和醇，難溶于丙酮和氯仿，不溶于乙醚。根據(jù)其化學(xué)性質(zhì)，以藥典為標(biāo)準(zhǔn)，進行了試驗：取本品，加水10 mL，浸漬30 min。濾液作為供試品溶液。試驗結(jié)果確證：該方法提取完全，斑點清晰，分離理想，Rf值適中。經(jīng)空白試驗證明，其他味藥對結(jié)果無干擾[3]。

甘草根及根莖含甘草甜素，為甘草酸的鉀，鈣鹽。甘草次酸為白色結(jié)晶性粉末，無味，微溶于水，溶于乙醇，氯仿。根據(jù)其化學(xué)性質(zhì)，以《衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)》為標(biāo)準(zhǔn)，進行了試驗：取本品加鹽酸1 mL，氯仿15 mL，加熱回流提取1 h，放冷，濾過濾液蒸干，殘渣加乙醇2 mL使溶解，作為供試品溶液。

試驗結(jié)果確證：該方法提取完全，斑點清晰，分離理想。經(jīng)空白試驗證明：其他味藥對結(jié)果無干擾。

4 結(jié) 論

該實驗操作簡便，無陰性干擾，重現(xiàn)性好，斑點清晰，專一性強，結(jié)果滿意，可以作為蒙藥吉日木松湯的薄層鑒別方法。

[1]國家藥典委員會.中國藥典2005年版(一部)[M]..北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2005:103.

[2]國家藥典委員會.中華人民共和國衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)[S].蒙藥分冊.赤峰:內(nèi)蒙古科學(xué)技術(shù)出版社,1998.

[3]北京中醫(yī)藥大學(xué).中藥鑒定學(xué)(供中藥類專業(yè)用)[M].北京:科學(xué)出版社,2002:290.

R282.710.3

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1671-8194（2015）05-0058-02