龐 滂楊曉莉牛建功

（1 西安楊森制藥有限公司，陜西 西安 710043；2 陜西省食品藥品檢驗(yàn)所，陜西 西安 710065）

UPLC法測(cè)定酮康唑制劑中酮康唑的含量

龐 滂1楊曉莉2牛建功1

（1 西安楊森制藥有限公司，陜西 西安 710043；2 陜西省食品藥品檢驗(yàn)所，陜西 西安 710065）

目的建立酮康唑系列不同制劑產(chǎn)品含量測(cè)定的UPLC方法。方法采用Waters ACQUITY UPLC BEH C18色譜柱（2.1×100 mm，1.7 μm），0.34%硫酸四丁基氫銨溶液-乙腈為流動(dòng)相，梯度洗脫，流速為0.3 mL/min，檢測(cè)波長(zhǎng)為230 nm，柱溫40 ℃。結(jié)果酮康唑?qū)φ掌啡芤壕€性范圍為：0.1～150 μg/mL，r=0.9999（n=9）；片劑：回收率為98.33%～99.80%，RSD為0.43%（n=6）；乳膏劑：回收率為99.45%～102.24%，RSD為1.21%（n=6）；2%洗劑：回收率為98.61%～101.24%，RSD為1.08%（n=6）。結(jié)論UPLC法簡(jiǎn)便、靈敏、準(zhǔn)確、重復(fù)性好，可用于酮康唑系列不同制劑產(chǎn)品的質(zhì)量控制。

酮康唑；超高效液相色譜法；含量

酮康唑系列產(chǎn)品主要包括酮康唑片劑、酮康唑乳膏和酮康唑洗劑，均為抗真菌類藥物，其主要成分都為酮康唑[1-3]。采用超高效液相色譜法（UPLC）同時(shí)測(cè)定不同制劑的酮康唑產(chǎn)品中酮康唑的含量，結(jié)果滿意，該法可用于控制制劑的質(zhì)量。

1 儀器與試藥

Waters ACQUITY型UPLC，酮康唑?qū)φ掌罚ㄖ袊?guó)藥品生物制品檢定所，批號(hào)為100294-200602，校正因子：0.999）；硫酸四丁基氫銨（TBAHS，分析純）；乙腈（色譜純）；酮康唑片劑（西安楊森制藥有限公司，批號(hào)為110902514）；酮康唑乳膏（西安楊森制藥有限公司，批號(hào)為111208542）；酮康唑洗劑（西安楊森制藥有限公司，批號(hào)為111116945）。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件。色譜柱：Waters ACQUITY UPLC BEH C18色譜柱（2.1× 100 mm，1.7 μm）；流動(dòng)相：0.34%硫酸四丁基氫銨溶液-乙腈為流動(dòng)相，梯度洗脫（梯度表見(jiàn)表1）；柱溫：40 ℃；流速：0.3 mL/min；檢測(cè)波長(zhǎng)：230 nm；進(jìn)樣量：5 μL。

表1 梯度表

2.2 溶液制備：取酮康唑?qū)φ掌愤m量，精密稱定，加甲醇制成100 μg/mL的溶液作為對(duì)照品溶液。分別取酮康唑片劑、乳膏劑和洗劑適量，按規(guī)格用甲醇制成100 μg/mL的溶液作為酮康唑制劑的供試品溶液。按照處方及工藝制備不含酮康唑的空白樣品適量，照上述方法制備成空白輔料溶液。

2.3 方法學(xué)考察

2.3.1 專屬性試驗(yàn)：陰性對(duì)照品溶液測(cè)定結(jié)果表明，在與酮康唑保留時(shí)間相應(yīng)位置上無(wú)吸收，表明其他成分對(duì)本品的酮康唑含量測(cè)定無(wú)干擾，方法專屬性良好（圖1）。

圖1 超高效液相色譜圖[1. 片劑（Tablet）；2. 乳膏劑（Cream）；3. 2%洗劑（2% Lotion）；4. 酮康唑（Ketoconazole）；A.對(duì)照品（Reference substance）；B. 供試品（sample）；C. 空白輔料（Blank）]

2.3.2 線性關(guān)系考察：用甲醇準(zhǔn)確配制1 mL中含酮康唑1.25 mg的儲(chǔ)備液，然后用甲醇逐步稀釋至150、125、100、50、25、10、5、1、0.1 μg/mL系列溶液，進(jìn)樣量5 μL。按照上述色譜條件測(cè)定峰面積，以峰面積對(duì)溶液質(zhì)量濃度進(jìn)行線性回歸，得回歸方程Y=3×107X+6540.1，r=0.9999（n=9）。結(jié)果表明，酮康唑質(zhì)量濃度在0.1～150 μg/mL與峰面積線性關(guān)系良好。

2.3.3 重復(fù)性試驗(yàn)：分別取片劑、乳膏、洗劑的供試品溶液各6份，依法測(cè)定。測(cè)得RSD分別為：片劑0.20%（n=6）；乳膏劑：0.29%（n=6）；2%洗劑：0.69%（n=6），表明方法重復(fù)性良好。

2.3.4 穩(wěn)定性試驗(yàn)：分別取同一份片劑、乳膏、洗劑的供試品溶液，分別在制備后0、2、4、6、8 h時(shí)進(jìn)樣測(cè)定。測(cè)得RSD分別為：片劑0.43%；乳膏劑：0.17%；2%洗劑：0.66%，表明供試品溶液在8 h內(nèi)基本穩(wěn)定。

2.3.5 中間精密度試驗(yàn)：分別取片劑、乳膏、洗劑供試品溶液各6份，分別由A、B、C 3人分別在不同的時(shí)間用同一臺(tái)設(shè)備，依法測(cè)定。測(cè)得RSD分別為：片劑0.47%；乳膏劑：0.68%；2%洗劑：0.73%，表明中間精密度良好。

2.3.6 回收率試驗(yàn)：分別取片劑、乳膏、洗劑空白樣品各6份，分別精密加入線性儲(chǔ)備液6、4、2 mL，加甲醇稀釋至刻度，依法測(cè)定。測(cè)得回收率分別為：片劑為98.33%～99.80%，RSD為0.43%（n=6）；乳膏劑為99.45%～102.24%，RSD為1.21%（n=6）；洗劑為98.61%～101.24%，RSD為1.08%（n=6）。

2.3.7 含量測(cè)定：取“2.2溶液制備”下對(duì)照品溶液和供試品溶液，按上述色譜條件進(jìn)樣5 μL，按外標(biāo)法計(jì)算其標(biāo)示含量，測(cè)得結(jié)果為：片劑97.8%，RSD為0.2%（n=6）；乳膏劑100.4%，RSD為0.3%（n=6）；和2%洗劑103.4%，RSD為0.7%（n=6）。

3 討 論

3.1 流動(dòng)相的選擇：對(duì)流動(dòng)相的種類和比例進(jìn)行了系列試驗(yàn)，結(jié)果表明選用0.34%硫酸四丁基氫銨溶液和乙腈的梯度比例洗脫最佳。

3.2 檢測(cè)波長(zhǎng)和柱溫的選擇：經(jīng)試驗(yàn)表明，酮康唑在230 nm處峰形最好，且在柱溫40 ℃時(shí)分離度和峰形最佳。

3.3 輔料的影響：專屬性試驗(yàn)結(jié)果表明，空白輔料對(duì)酮康唑制劑的含量測(cè)定無(wú)影響。

實(shí)驗(yàn)表明，采用UPLC方法對(duì)酮康唑不同制劑進(jìn)行含量測(cè)定，快速、簡(jiǎn)便、靈敏、重現(xiàn)性好，利于更好地控制產(chǎn)品質(zhì)量。

[1]國(guó)家藥典委員會(huì).中國(guó)藥典(二部)[M].2010版.北京:中國(guó)科技醫(yī)藥出版社,2010:679.

[2]李華侃.茜素紅荷移分光光度法測(cè)定酮康唑含量[J].理化檢驗(yàn)(化學(xué)分冊(cè)),2013,49(4):479-480.

[3]張艷紅,孫麗建,李強(qiáng),等.高效液相色譜法測(cè)定緩釋微球中酮康唑的含量[J].黑龍江大學(xué)工程學(xué)報(bào),2012,3(3):42-44.

R917

B

1671-8194（2015）03-0058-02