周建全，張忠光，董 雪，蘇燕妮*

(1.遼寧省煙草公司阜新市公司，遼寧阜新123000;2.沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué)植物保護(hù)學(xué)院，遼寧沈陽(yáng)110866)

煙草靶斑病由立枯絲核菌(Rhizoctonia solani AG-3)引起，該病菌主要為害煙草葉片，形成褪綠病斑，直至壞死部分穿孔［1-2］。近年來(lái)，煙草靶斑病在遼寧省丹東市、鐵嶺市有加重發(fā)生的趨勢(shì)，造成較大的經(jīng)濟(jì)損失，已經(jīng)成為影響煙草產(chǎn)量和質(zhì)量的重要病害之一。目前，尚未發(fā)現(xiàn)較好的抗病品種，藥劑防治依然是控制煙草靶斑病的主要手段［3］。筆者研究了10%井岡霉素水劑、20%噻氟酰胺(滿(mǎn)穗)SC、70%甲基硫菌靈WP等12種不同的藥劑對(duì)煙草靶斑病的室內(nèi)抑菌效果，并于2011和2012年研究了不同的藥劑防治煙草靶斑病的田間藥效，以期篩選出合適的防治煙草靶斑病的高效藥劑。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 供試藥劑。10%井岡霉素水劑、20%噻氟酰胺(滿(mǎn)穗)SC、70%甲基硫菌靈WP、40%菌核凈WP、50%退菌特、32.5%嘧菌酯·苯醚甲環(huán)唑WP、80%多菌靈、5%井岡霉素粉劑、20%肟菌酯·戊唑醇、50%代森錳鋅等不同藥劑。

1.1.2 供試菌種。沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué)煙草研究所分離、保存的煙草靶斑病菌菌株LN-9。

1.2 方法

1.2.1 室內(nèi)藥劑篩選試驗(yàn)。參照伏穎等［4］的抑菌圈法和生長(zhǎng)速率法。

1.2.1.1 抑菌圈法。用無(wú)菌水將藥劑分別稀釋成所需濃度，取1.0 ml菌絲懸浮液加入到9.0 ml融化好的PDA培養(yǎng)基中，搖勻，倒入培養(yǎng)皿中，待培養(yǎng)基凝固后，將無(wú)菌牛津杯放入含有菌絲的培養(yǎng)皿中央，分別向牛津杯中加入0.2 ml不同的藥劑，以加入0.2 ml無(wú)菌水做對(duì)照，每個(gè)處理3次重復(fù)，最后將培養(yǎng)皿置于25℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)2 d，采用十字交叉法測(cè)量抑菌圈直徑，根據(jù)抑菌圈的大小確定適合防治煙草靶斑病的藥劑。

1.2.1.2 生長(zhǎng)速率法。將供試藥劑用無(wú)菌水分別稀釋至所需濃度10倍的藥液，取1.0 ml藥液加入9.0 ml融化好的PDA培養(yǎng)基中，搖勻后直接倒入無(wú)菌培養(yǎng)皿中，以加入等體積無(wú)菌水的培養(yǎng)基做對(duì)照。用7 mm的打孔器切取菌餅，菌絲面朝下放置于PDA平板中央，每個(gè)培養(yǎng)皿中放1塊，每個(gè)處理3次重復(fù)，將培養(yǎng)皿放置于25℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)2 d，用十字交叉法測(cè)量菌絲直徑，計(jì)算不同處理對(duì)菌絲生長(zhǎng)的抑制率，分析不同藥劑對(duì)菌絲生長(zhǎng)的影響。

菌絲生長(zhǎng)抑制率=［(對(duì)照組菌落直徑-7)-(處理組菌落直徑-7)］/(對(duì)照菌落直徑-7)×100%

1.2.2 田間藥效試驗(yàn)。根據(jù)室內(nèi)藥劑試驗(yàn)的篩選結(jié)果選擇其中9個(gè)綜合防效較好的藥劑進(jìn)行田間藥效試驗(yàn)。試驗(yàn)地點(diǎn)安排在遼寧省丹東市鳳城煙地，以當(dāng)?shù)刂髟詿煵萜贩NCH001為試驗(yàn)材料，每小區(qū)60株煙草，株距為50 cm，壟寬為1.2 m，面積約100 m2。每種藥劑按推薦濃度使用，3次重復(fù)，以清水為對(duì)照。用背負(fù)式噴霧器均勻噴霧。施藥時(shí)間分別為2011年8月和2012年8月，每種藥劑設(shè)置1個(gè)小區(qū)，噴藥前先調(diào)查每個(gè)小區(qū)的發(fā)病情況，每個(gè)小區(qū)3壟，每壟60株煙草，采取5點(diǎn)取樣法，每點(diǎn)調(diào)查3株，每株調(diào)查8片煙葉，記錄病級(jí)。煙草靶斑病病情分級(jí)標(biāo)準(zhǔn):0級(jí)——無(wú)病;1級(jí)——病斑面積占葉片面積的1%以下;3級(jí)——病斑面積占葉片面積的1% ～10%;5級(jí)——病斑面積占葉片面積的11% ～30%;7級(jí)——病斑面積占葉片面積的31% ～50%;9級(jí)——病斑面積占葉片面積的51%以上。

病情指數(shù)=Σ(各級(jí)病葉數(shù)×各級(jí)代表值)/(調(diào)查總?cè)~數(shù)×最高一級(jí)代表值)×100

相對(duì)防效=(對(duì)照病指增長(zhǎng)率-處理病指增長(zhǎng)率)/對(duì)照病指增長(zhǎng)率×100%

2 結(jié)果與分析

2.1 室內(nèi)藥劑篩選 菌絲生長(zhǎng)速率測(cè)定結(jié)果表明(表1):各個(gè)藥劑對(duì)菌絲的抑制作用并不相同，以40%菌核凈和50%退菌特的效果最好，其抑制率分別為100%和99.23%;其次為20%噻氟酰胺(滿(mǎn)穗)SC和10%井岡霉素水劑，其抑制率分別為97.69%和96.15%;然后是70%甲基硫菌靈、32.5%嘧菌酯·苯醚甲環(huán)唑WP、80%多菌靈、5%井岡霉素粉劑和20%肟菌酯·戊唑醇，其抑制率均在50%以上，50%多菌靈、70%代森錳鋅、50%腐霉利的抑菌效果最差，抑制率均在30%以下。

表1 生長(zhǎng)速率法測(cè)定不同藥劑對(duì)煙草靶斑病菌生長(zhǎng)的抑制作用

表2 抑菌圈法測(cè)定不同藥劑對(duì)煙草靶斑病菌生長(zhǎng)抑制作用

抑菌圈法測(cè)定結(jié)果表明(表2):供試藥劑中，對(duì)煙草靶斑病菌抑制效果最好的為20%噻氟酰胺(滿(mǎn)穗)SC，抑菌圈直徑為56.3 mm;其次為40%菌核凈和10%井岡霉素，其抑菌圈直徑均在50 mm以上;50%退菌特、70%甲基硫菌靈、32.5%嘧菌酯·苯醚甲環(huán)唑WP的抑菌圈直徑在30 mm以上;80%多菌靈、5%井岡霉素粉劑和20%肟菌酯·戊唑醇的抑菌圈直徑在26.0～29.6 mm;50%多菌靈、70%代森錳鋅、50%腐霉利的抑菌圈直徑均為0。

結(jié)合生長(zhǎng)速率測(cè)定法和抑菌圈法的試驗(yàn)結(jié)果得知:20%噻氟酰胺(滿(mǎn)穗)SC、40%菌核凈、10%井岡霉素水劑、50%退菌特、70%甲基硫菌靈、32.5%嘧菌酯·苯醚甲環(huán)唑WP、80%多菌靈、5%井岡霉素粉劑、20%肟菌酯·戊唑醇9種藥劑對(duì)煙草靶斑病菌的抑制作用較好，可用于后續(xù)的田間藥效試驗(yàn)。

2.2 不同藥劑對(duì)煙草靶斑病的田間藥效 由表3可知，2011年噴藥后7 d調(diào)查發(fā)現(xiàn)，10%井岡霉素水劑的防治效果最佳，達(dá)到72.30%，其次是20%噻氟酰胺(滿(mǎn)穗)SC，相對(duì)防效達(dá)到69.91%，相對(duì)防效最差的是5%井岡霉素粉劑和20%肟菌酯·戊唑醇，分別為45.52%和40.63%，其余藥劑的相對(duì)防效都在50%以上。2012年噴施相同藥劑7 d后調(diào)查發(fā)現(xiàn)，相對(duì)防效較好的依然是10%井岡霉素水劑和20%噻氟酰胺(滿(mǎn)穗)SC，分別為65.07%和71.82%，其次是70%甲基硫菌靈WP、40%菌核凈WP、50%退菌特，三者相對(duì)防效也都達(dá)到50%以上，32.5%嘧菌酯·苯醚甲環(huán)唑WP、80%多菌靈、5%井岡霉素粉劑、20%肟菌酯·戊唑醇的相對(duì)防效在40.99% ～47.99%。m

表3 不同藥劑對(duì)煙草靶斑病的田間防治效果

3 結(jié)論與討論

室內(nèi)藥劑篩選試驗(yàn)通過(guò)生長(zhǎng)速率測(cè)定法和抑菌圈法測(cè)定各個(gè)藥劑對(duì)煙草靶斑病菌的抑制作用。結(jié)果表明，10%井岡霉素水劑、20%噻氟酰胺(滿(mǎn)穗)SC對(duì)菌絲生長(zhǎng)的抑制效果較明顯。丹東地區(qū)2年的試驗(yàn)結(jié)果表明，10%井岡霉素水劑和20%噻氟酰胺(滿(mǎn)穗)SC對(duì)煙草靶斑病的相對(duì)防效均最好，可以作為防治煙草靶斑病的推薦藥劑;70%甲基硫菌靈WP、40%菌核凈WP和50%退菌特的相對(duì)防效也都在50%以上，可以考慮用于防治煙草靶斑病。伏穎等［4］通過(guò)研究不同藥劑對(duì)煙草靶斑病菌的抑菌作用發(fā)現(xiàn)菌核凈在抑制菌絲生長(zhǎng)方面表現(xiàn)尤其突出，與該試驗(yàn)結(jié)果相吻合。由于氣候環(huán)境的影響，相同的藥劑在不同年份的防效也表現(xiàn)不同，因此，在實(shí)際生產(chǎn)施藥過(guò)程中要充分考慮環(huán)境的影響，施藥選在早晨、傍晚或者陰天進(jìn)行，使藥劑防效得到保證［5］，同時(shí)還要注意各種藥劑的輪換使用，防止長(zhǎng)期使用1種藥劑而產(chǎn)生的抗藥性，降低防治效果［6］。

［1］吳元華，王左斌，劉志恒，等.我國(guó)煙草新病害:煙草靶斑?。跩］.中國(guó)煙草學(xué)報(bào)，2006，12(6):22-23.

［2］吳元華，趙艷琴，趙秀香，等.煙草靶斑病病原鑒定及生物學(xué)特性研究［J］.沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2012，43(5):521-527.

［3］劉斯泓，紀(jì)明山.防治煙草靶斑病的復(fù)配藥劑配方篩選及田間藥效試驗(yàn)［J］.江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)，2014，42(6):140-143.

［4］伏穎，吳元華，穆凌霄，等.煙草靶斑病室內(nèi)藥劑篩選［J］.江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)，2011，39(3):153-155.

［5］王左斌，吳元華，趙秀香，等.“嘧肽菌凈”對(duì)煙草靶斑病的抑菌作用及田間藥效試驗(yàn)［J］.煙草科技，2007(9):61-65.

［6］葉建如，顧剛，張瀛.幾種藥劑防治煙草青枯病的藥效評(píng)價(jià)［J］.中國(guó)煙草科學(xué)，2013，34(1):72-77.