趙 磊，徐 雙，賈 玫，劉 忱，徐秦竹

TEG5000型血栓彈力圖儀性能驗(yàn)證

趙 磊，徐 雙，賈 玫，劉 忱，徐秦竹

目的：對(duì)TEG5000型血栓彈力圖儀進(jìn)行性能驗(yàn)證。方法：選取健康志愿者20例，男女各半，采血抗凝并充分混勻，立即送檢，在2 h內(nèi)檢測(cè)。參照美國(guó)臨床和實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(huì)（Clinical and Laboratory Standards Institute，CLSI）的EP15-A2、CLSI C28-A2、CLSI EP9-A2文件對(duì)TEG5000型血栓彈力圖儀的精密度、正確度、生物參考區(qū)間、通道間比對(duì)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證。結(jié)果：各項(xiàng)目批內(nèi)精密度在0～4.8%之間，室內(nèi)精密度在0～4.4%之間，結(jié)果均符合說(shuō)明書(shū)給定范圍；參考物質(zhì)靶值均在驗(yàn)證區(qū)間內(nèi)；引用的生物參考區(qū)間符合實(shí)驗(yàn)室服務(wù)的人群；兩通道比對(duì)，各項(xiàng)目r2均大于0.95。結(jié)論：TEG5000型血栓彈力圖儀的主要性能指標(biāo)符合質(zhì)量要求，可用于常規(guī)檢測(cè)工作。

血栓彈力圖儀；性能驗(yàn)證；精密度；正確度；結(jié)果比對(duì)

0 引言

實(shí)驗(yàn)室采用一種新檢測(cè)系統(tǒng)用于檢測(cè)患者樣本前，除了需要符合管理機(jī)構(gòu)的要求和醫(yī)療用途外，還需要對(duì)檢測(cè)系統(tǒng)進(jìn)行性能驗(yàn)證，以證實(shí)其能夠達(dá)到制造商所聲稱的性能參數(shù)。經(jīng)過(guò)這些步驟，才能將新系統(tǒng)應(yīng)用于患者樣本檢測(cè)[1]。血栓彈力圖儀是用物理方法模擬人體的凝血、纖溶過(guò)程，從而監(jiān)測(cè)血凝塊的形成、溶解及血凝塊凝血功能動(dòng)態(tài)變化的儀器。它與其他凝血分析儀相比，在方法學(xué)上有很大的差異，目前國(guó)內(nèi)尚無(wú)關(guān)于此儀器性能驗(yàn)證的報(bào)道。本實(shí)驗(yàn)室參照美國(guó)臨床和實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(huì)（Clinical and Laboratory Standards Institute，CLSI）相關(guān)指南對(duì)TEG5000型血栓彈力圖儀進(jìn)行性能驗(yàn)證，現(xiàn)將驗(yàn)證結(jié)果報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 標(biāo)本來(lái)源

取自2014年2月健康志愿者20例，男女各半。標(biāo)本用3.2%枸櫞酸鈉抗凝（109 mmol/L枸櫞酸鈉，抗凝劑與全血比例為1∶9，美國(guó)Becton Dickinson公司生產(chǎn)），采血后充分混勻，立即送檢，在2 h內(nèi)檢測(cè)。

1.2 儀器與試劑

TEG5000型血栓彈力圖儀（Haemonetics公司）及配套高嶺土試劑（Kaolin，批號(hào)0601-1105）、質(zhì)控品（LEVELⅠ，批號(hào)0429-1101；LEVELⅡ，批號(hào)0502-1102）和0.2 mol/L CaCl2試劑。儀器保持水平，確保試劑在效期內(nèi)。

1.3 方法

1.3.1 每日質(zhì)量控制

每日檢測(cè)LEVEL I和LEVELⅡ2個(gè)水平的質(zhì)控品，每日質(zhì)控在控狀態(tài)下進(jìn)行精密度、正確度、生物參考區(qū)間及比對(duì)實(shí)驗(yàn)的評(píng)價(jià)。整個(gè)評(píng)價(jià)過(guò)程使用同一批號(hào)試劑。

1.3.2 精密度驗(yàn)證

參考CLSIEP15-A2[2]文件，選擇LEVELI和LEVELⅡ2個(gè)濃度水平的質(zhì)控品，每天每個(gè)水平重復(fù)測(cè)定3次，連續(xù)測(cè)定5 d。計(jì)算重復(fù)性（批內(nèi)）標(biāo)準(zhǔn)差（s）、變異系數(shù)（coeffcient of variation，CV）及實(shí)驗(yàn)室內(nèi)s、CV。判斷標(biāo)準(zhǔn)為：重復(fù)性CV要求小于5%，室內(nèi)CV要求小于10%。判斷標(biāo)準(zhǔn)源自生產(chǎn)廠家說(shuō)明書(shū)。

1.3.3 正確度驗(yàn)證

參考CLSI EP15-A2[2]文件，采用參考物質(zhì)驗(yàn)證正確度方案，以美國(guó)病理家學(xué)會(huì)（College of American Pathologists，CAP）發(fā)放的室間質(zhì)控品作為參考物質(zhì)，對(duì)2個(gè)不同水平的室間質(zhì)控品在5 d內(nèi)每水平進(jìn)行2次重復(fù)測(cè)定，計(jì)算驗(yàn)證區(qū)間。若參考物質(zhì)靶值在驗(yàn)證區(qū)間內(nèi)，結(jié)果可接受。

1.3.4 生物參考區(qū)間驗(yàn)證

參考CLSI C28-A2[3]文件，挑選本院健康志愿者20例，男女各半。觀察檢測(cè)結(jié)果落在參考區(qū)間范圍內(nèi)個(gè)數(shù)。判斷標(biāo)準(zhǔn)為符合率≥90%（符合率=（檢測(cè)值在引用參考區(qū)間內(nèi)個(gè)體數(shù)/總的參考個(gè)體數(shù)）×100%）。

1.3.5 比對(duì)實(shí)驗(yàn)

參考CLSI EP9-A2文件[4]要求作比對(duì)實(shí)驗(yàn)，選擇40份涵蓋高、中、低濃度的臨床樣本，每天測(cè)定8份樣本，分別在1通道和2通道上按1～8再8～1的順序進(jìn)行雙份平行測(cè)定，連續(xù)測(cè)定5 d，計(jì)算均值。以參加CAP室間質(zhì)評(píng)的1通道測(cè)定結(jié)果作為參考方法的測(cè)定值（x），以2通道測(cè)定結(jié)果作為比對(duì)方法的測(cè)定值（y），用x與y值計(jì)算決定系數(shù)r2。判斷標(biāo)準(zhǔn)為r2≥0.95。

2 結(jié)果

2.1 精密度驗(yàn)證結(jié)果

選取LEVEL I和LEVELⅡ2個(gè)濃度水平的質(zhì)控品驗(yàn)證精密度，批內(nèi)精密度均＜5%，室內(nèi)精密度均＜10%，結(jié)果見(jiàn)表1，其中，R為凝血反應(yīng)時(shí)間，是指血標(biāo)本開(kāi)始檢測(cè)到纖維蛋白形成所需的時(shí)間；K為凝血形成時(shí)間，即從凝血開(kāi)始至血栓彈力圖振幅達(dá)到20 mm的時(shí)間；α-Angle為凝固角，是從血凝塊形成點(diǎn)至描記圖最大曲線弧度作切線與水平線的夾角，代表血凝塊形成的速率；MA是最大振幅，反映血凝塊絕對(duì)強(qiáng)度。

表1 精密度驗(yàn)證結(jié)果

2.2 正確度驗(yàn)證結(jié)果

選取2014年CAP室間質(zhì)評(píng)TEG-A 2個(gè)水平質(zhì)控品進(jìn)行檢測(cè)，參考物質(zhì)靶值在驗(yàn)證區(qū)間內(nèi)，結(jié)果為可接受，詳見(jiàn)表2。

表2 正確度驗(yàn)證結(jié)果

2.3 生物參考區(qū)間驗(yàn)證

驗(yàn)證結(jié)果顯示，4個(gè)項(xiàng)目中，MA的符合率為95%，其余符合率為100%，符合本實(shí)驗(yàn)室服務(wù)的人群，詳見(jiàn)表3。

表3 參考區(qū)間驗(yàn)證結(jié)果（n=20）

2.4 比對(duì)實(shí)驗(yàn)

以參加CAP室間質(zhì)評(píng)的1通道作為參比儀器，將2通道測(cè)定結(jié)果與其進(jìn)行相關(guān)性分析，r2均大于0.95，比對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)圖1、表4。

3 討論

醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)的質(zhì)量涉及諸多方面。在使用新的檢測(cè)系統(tǒng)進(jìn)行標(biāo)本檢測(cè)前，必須對(duì)檢測(cè)系統(tǒng)的基本性能進(jìn)行評(píng)價(jià)，驗(yàn)證后方可用于常規(guī)工作。本研究參照《醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量和能力認(rèn)可準(zhǔn)則》（ISO 15189：2012）、CAP的認(rèn)證標(biāo)準(zhǔn)、衛(wèi)生部《醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床實(shí)驗(yàn)室管理辦法》的要求及本實(shí)驗(yàn)室的具體情況，對(duì)TEG5000型血栓彈力圖儀進(jìn)行了性能評(píng)價(jià)。

精密度通常以不精密度表示，由于不同醫(yī)學(xué)決定水平的不精密度不同，因此，在驗(yàn)證時(shí)應(yīng)選用不同水平的質(zhì)控品。本研究通過(guò)對(duì)2個(gè)水平質(zhì)控品進(jìn)行檢測(cè)，各項(xiàng)目批內(nèi)精密度在0～4.8%之間，室內(nèi)精密度在0～4.4%之間，CV值均符合生產(chǎn)廠家要求。依據(jù)CLSI EP15-A2文件，本研究使用定值參考物質(zhì)進(jìn)行儀器正確度驗(yàn)證。通過(guò)計(jì)算驗(yàn)證區(qū)間，參考物質(zhì)靶值均在驗(yàn)證區(qū)間內(nèi)，驗(yàn)證合格，可以滿足臨床測(cè)試需求。本實(shí)驗(yàn)室選用北京地區(qū)人群為參考范圍，經(jīng)驗(yàn)證，本實(shí)驗(yàn)室各項(xiàng)目符合率≥90%，表明所選用的參考區(qū)間適用于所服務(wù)的人群，對(duì)本地區(qū)適用。

血栓彈力圖儀包含2個(gè)通道，不同通道均可獨(dú)立完成檢測(cè)，因此必須進(jìn)行通道間的比對(duì)。由于1通道參加了CAP室間質(zhì)評(píng)且結(jié)果良好，故設(shè)為參比通道。通過(guò)相關(guān)性分析，r2均大于0.95，表明2個(gè)通道檢測(cè)結(jié)果一致。

圖1 1通道與2通道比對(duì)實(shí)驗(yàn)散點(diǎn)圖

表4 1通道與2通道比對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果

儀器的性能驗(yàn)證還應(yīng)包括分析測(cè)量范圍的驗(yàn)證[6]、稀釋度驗(yàn)證[7]、攜帶污染率[8]及干擾實(shí)驗(yàn)等[9-10]。由于TEG5000型血栓彈力圖儀報(bào)告值為物理參數(shù)值，如時(shí)間（min）、角度（angle）等，與血液凝固時(shí)間、切應(yīng)力等相關(guān)，因此依據(jù)儀器設(shè)計(jì)原理及廠家說(shuō)明書(shū)，分析測(cè)量范圍為R：0～50 min；K：0～50 min；α-Angle：0～90°；MA：0～90 mm。若大于50 min仍無(wú)反應(yīng)，則所有結(jié)果均報(bào)告不凝集。由于檢測(cè)樣本為全血，故無(wú)需進(jìn)行稀釋度驗(yàn)證、干擾實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證。因此臨床可報(bào)告范圍與分析測(cè)量范圍相同。由于本儀器無(wú)吸樣針等部件，不存在樣本相互污染問(wèn)題，故無(wú)需進(jìn)行攜帶污染率驗(yàn)證。

綜上，TEG5000型血栓彈力圖儀有良好的分析性能，可以正常開(kāi)展臨床檢測(cè)工作。

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（收稿：2015-01-03 修回：2015-04-20）

Performance verification of TEG5000 thrombelastograph hemostasis analyzer

ZHAO Lei,XU Shuang,JIA Mei,LIU Chen,XU Qin-zhu
（Department of Laboratory Medicine,Peking University People's Hospital,Beijing 100044,China）

Objective To verify the analytical performance of TEG5000 thrombelastograph hemostasis analyzer. Methods Totally 20 healthy volunteers,10 males and 10 females,had the blood collected,anticoagulated,blended and submitted in 2 h.The precision,accurateness,biological reference range and etc of the analyzer were validated with references to EP15-A2,CLSI C28-A2 and CLSI EP9-A2 from Clinical and Laboratory Standards Institute(CLSI). R esultsAll testing items had the within-run precision between 0 and 4.8%and the within-laboratory precision between 0 and 4.4%,which were complied with the specification of the analyzer.The assigned values of all testing items were included in the verification intervals.The quotative biological reference range conformed to group of this laboratory services.Comparison of the two channels proved r2values of all testing items were greater than 0.95.Conclusion The main performance indexes of TEG5000 thrombelastograph hemostasis analyzer meet the standards of the quality requirements,which can be used in routine tests.[Chinese Medical Equipment Journal，2015，36（12）：94-96]

thrombelastograph hemostasis analyzer;performance verification;precision;accuracy;result comparison

R 318.6；TH772.2

A

1003-8868（2015）12-0094-03

10.7687/J.ISSN1003-8868.2015.12.094

“首都臨床特色應(yīng)用研究”檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)專項(xiàng)（Z121107005112011）

趙 磊（1981—），男，主治醫(yī)師，主要從事血栓與止血檢驗(yàn)方面的研究工作，E-mail：csnd-zl@163.com。

100044北京，北京大學(xué)人民醫(yī)院檢驗(yàn)科（趙 磊，徐 雙，賈 玫，劉 忱，徐秦竹）

賈 玫，E-mail：jiamei0718@vip.sina.com