張愛民，張桂芬

雅培i2000全自動電化學發(fā)光免疫分析儀剩余試劑檢測結(jié)果分析

張愛民，張桂芬

目的：探討雅培i2000全自動電化學發(fā)光免疫分析儀剩余試劑檢測的可行性。方法：利用剩余試劑分別檢測特定血清甲胎蛋白（alpha fetoprotein，AFP）、癌胚抗原（carcinoembryonic antigen，CEA）、糖類抗原199（carbohydrate antigen 199，CA-199）的濃度，進行精密度、準確度分析，并與原裝試劑分別檢測這3個項目的低、中、高3個濃度的同一組血清標本做均值比較及相關(guān)性分析。結(jié)果：剩余試劑檢測AFP、CEA、CA-199的精密度變異系數(shù)（coefficient of variation，CV）均小于5%，符合相關(guān)標準，準確度結(jié)果較好；2種試劑檢測血清樣本結(jié)果呈良好的線性關(guān)系（r＞0.95），差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。結(jié)論：雅培i2000全自動電化學發(fā)光免疫分析儀的剩余試劑可以進行AFP、CEA、CA-199檢測，能夠保證檢驗質(zhì)量，降低檢測成本。

全自動電化學發(fā)光免疫分析儀；剩余試劑；甲胎蛋白；癌胚抗原；糖類抗原199

0　引言

電化學免疫分析是電化學發(fā)光和免疫測定相結(jié)合的新一代標記免疫測定技術(shù)，現(xiàn)已廣泛應用于各種激素、腫瘤標志物、藥物及其他微量活性物質(zhì)的測定[1-2]。雅培i2000全自動電化學發(fā)光免疫分析儀是目前檢驗科在免疫定量檢測這一領(lǐng)域使用最為廣泛的儀器之一，具有靈敏度高、結(jié)果準確、精密度及線性評價良好、交叉污染小等優(yōu)點，可滿足臨床的要求[3]。其配套試劑為進口原裝試劑，試劑盒獨立包裝，測定人份固定，掃描條碼自動獲取試劑信息，檢測成本較高。在實際的工作中我們發(fā)現(xiàn)，每500人份試劑檢測完畢后，還有一定量的剩余試劑，但儀器不會再進行檢測，造成了試劑的浪費。經(jīng)過測試，發(fā)現(xiàn)剩余試劑還能檢測40份左右的標本。為了能夠在保證檢驗質(zhì)量和儀器性能的基礎(chǔ)上，充分利用好這部分剩余試劑，降低檢測成本，我們將剩余試劑的檢測量定在了25人份，并以甲胎蛋白（alpha fetoprotein，AFP）、癌胚抗原（carcinotembryonic antigen，CEA）、糖類抗原（carbohydrate antigen199，CA-199）為例，對剩余試劑的精密度、準確性和相關(guān)性進行了檢測和分析。

1　材料和方法

1.1材料

1.1.1儀器

美國雅培i2000全自動電化學發(fā)光免疫分析儀。

1.1.2試劑

原裝試劑為雅培i2000 AFP配套試劑（批號30155LF00）、CEA配套試劑（批號32123L00）、CA-199配套試劑（批號29133M500）；剩余試劑為以上原裝試劑完成規(guī)定檢測人份，經(jīng)儀器掃描后為“0TEST”的同批號同項目的試劑，分別準備3盒，加蓋后放入2～6℃冰箱內(nèi)保存?zhèn)溆?；質(zhì)控品為美國伯樂公司提供的TM1（批號54541）、TM2（批號54562）質(zhì)控品。

2　結(jié)果

2.1精密度檢測結(jié)果

精密度檢測結(jié)果顯示，所測結(jié)果CV均小于5%，在允許范圍之內(nèi)，結(jié)果見表1。

表1　精密度檢測CV結(jié)果%

2.2準確度檢測結(jié)果

用剩余試劑檢測AFP、CEA、CA-199的TM1和TM2各10次，質(zhì)控結(jié)果均在允許范圍內(nèi)，結(jié)果見表2。

表2　準確性檢測結(jié)果（±s）

表2　準確性檢測結(jié)果（±s）

2.93±0.43 3.07±0.31 CEA/（ng·ml-1）10.33±0.83 10.40±1.00 AFP/（ng·ml-1）TM1組別剩余試劑原裝試劑148.23±13.41 159.00±16.00 CA-199/（U·ml-1）TM2 AFP/（ng·ml-1）CEA/（ng·ml-1）CA-199/（U·ml-1）75.92±5.74 26.14±3.79 545.29±33.01 71.80±7.80 26.50±2.65 552.00±55.00

2.3標本檢測結(jié)果

在智能化潮流的席卷下，不管是傳統(tǒng)的設(shè)備制造企業(yè)、系統(tǒng)集成商，還是近年來新興的智能物流解決方案提供者，都面臨著機遇和挑戰(zhàn)。作為智能化物流設(shè)備領(lǐng)域一支不可忽視的力量，我們來聽一聽上海音鋒機器人股份有限公司副總經(jīng)理吳偉剛先生對行業(yè)有何看法

2種試劑檢測患者血清樣品的結(jié)果呈良好的線性關(guān)系（r＞0.95），差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），結(jié)果見表3。

表3　標本原裝試劑與剩余試劑檢測血清AFP、CEA、CA-199結(jié)果比較（±s）

表3　標本原裝試劑與剩余試劑檢測血清AFP、CEA、CA-199結(jié)果比較（±s）

組別低濃度血清　中濃度血清　高濃度血清AFP/（ng·ml-1）CEA/（ng·ml-1）CA-199/（U·ml-1）AFP/（ng·ml-1）CEA/（ng·ml-1）CA-199/（U·ml-1）AFP/（ng·ml-1）CEA/（ng·ml-1）CA-199/（U·ml-1）剩余試劑　7.58±0.29　3.61±0.13　15.86±0.61　86.25±2.83　63.46±2.08　166.42±6.48 329.71±14.86 478.92±20.64 846.76±34.93原裝試劑　7.69±0.26　3.66±0.12　16.05±0.58　87.38±2.77　64.18±2.16　170.37±6.29 335.64±13.45 483.11±19.84 858.31±33.25 r值?。?.95　＞0.95?。?.95?。?.95?。?.95?。?.95?。?.95　＞0.95?。?.95 P值　＞0.05　＞0.05?。?.05?。?.05?。?.05?。?.05?。?.05　＞0.05?。?.05

3　討論

雅培i2000全自動電化學發(fā)光免疫分析儀采用化學發(fā)光微粒子免疫分析，將化學發(fā)光或生物發(fā)光體系與免疫反應相結(jié)合，用于檢測樣品中的抗原、抗體和分析物。以吖啶酯為發(fā)光的標記物，固相載體為極細小的順磁性顆粒，將包被了單克隆抗體的磁性微粒和待測標本加入到反應管中，標本中的抗原與微粒上的抗體結(jié)合，再加上吖啶酯標記的單克隆抗體，經(jīng)過溫育，形成固相包被抗體-抗原-吖啶酯標記復合物。經(jīng)過洗滌、分離，將未結(jié)合的多余抗原和標記抗體洗去，加入氧化劑發(fā)光，這部分光的積分與被測抗原的量成正比，可從標準曲線上計算出待測物的含量。其測定原理與酶免疫中的雙抗體夾心法和競爭結(jié)合法相似[4]。國內(nèi)有文獻對其綜合性能進行了分析，并均給予了較高的評價[5-7]。

AFP、CEA、CA-199是臨床應用較為廣泛的腫瘤標志物，在腫瘤的篩查、診斷和療效觀察中有著重要的臨床意義[8-9]。AFP是原發(fā)性肝癌的高特異性和高靈敏度的腫瘤標志物，在其他惡性腫瘤如睪丸癌、畸胎癌、胃癌、胰腺癌等也可以升高。CEA是一個廣譜性腫瘤標志物，它能反映出多種腫瘤的存在。CA-199是糖抗原的一種，其增高多提示有胰腺炎、肝硬化、糖尿病、消化道腫瘤的可能。本實驗從精密度、準確度、標本檢測結(jié)果3個方面對剩余的AFP、CEA、CA-199配套試劑的檢測性能進行了分析，所有檢測均在室內(nèi)質(zhì)控在控的情況下進行。實驗結(jié)果顯示，用剩余試劑檢測低濃度血清中的AFP、CEA、CA-199時，精密度CV分別為3.21%、3.06%、4.33%，檢測高濃度血清中的相同指標分別為3.61%、3.42%、3.68%，均小于5%，符合臨床工作要求[10]；準確度和重復性結(jié)果較好，2種試劑檢測患者血清樣品的結(jié)果呈良好的線性關(guān)系（r＞0.95），差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。實驗結(jié)果說明500人份/盒同批號的剩余試劑檢測25人份以內(nèi)的標本能夠達到性能穩(wěn)定、質(zhì)量可靠要求。

根據(jù)配套校準品說明書，同批號試劑可定標一次，穩(wěn)定期為30 d，所以剩余試劑可不需再定標。剩余試劑操作方法：在主屏幕下選擇Reagents，再選擇Reagent history，選中測試量顯示“0 TEST”的相應項目信息，點Delete鍵刪除。將剩余試劑盒重新裝載掃描后，儀器試劑庫存恢復到“500 TEST”時即可進行剩余試劑的使用。使用剩余試劑的注意事項有：（1）刪除試劑盒前應先掃描一盒同批號的相應新試劑盒，掃描后取出，以保存試劑的相應信息，避免再次定標。（2）剩余試劑當天不能使用時應及時取出，加蓋放入2～6℃冰箱，在1周內(nèi)使用完畢。（3）剩余試劑的檢測量一定要小于25人份，否則會影響檢測結(jié)果和儀器的性能。（4）為保證結(jié)果的準確性，每次使用應帶著室內(nèi)質(zhì)控嚴密監(jiān)控。

綜上所述，雅培i2000全自動電化學發(fā)光免疫分析儀剩余AFP、CEA、CA-199配套試劑可以用于臨床檢測。在實際工作中，操作方法簡單、檢驗結(jié)果準確，能夠降低檢驗成本，減少資源的浪費。

[1]呂世靜.臨床免疫學檢驗[M].2版.北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010：122.

[2]Hermsen D，Broecker-Preuss M，Casati M，et al.Technical evaluation of the first fully automated assay for the detection of TSH receptor autoantibodies[J].Clinical Chimica Acta，2009，401：84-89.

[3]張保平，董莉，馮新平，等.雅培ARCHITECT i2000化學發(fā)光儀測定6種腫瘤標記物項目的方法學性能評價[J].國際檢驗醫(yī)學雜志，2011，32（4）：488-490.

[4]吳健民.臨床化學自動化免疫分析[M].北京：科學出版社，2000：166.

[5] 郭楠，高亞哲，楊琦.雅培i2000全自動化學發(fā)光免疫分析儀性能評價方法研究[J].中國醫(yī)藥科學雜志，2013，3（7）：75-76.

[6]王恒，梁鑫，蒙飛.雅培ARCHITECT i2000化學發(fā)光儀測定腫瘤標記物的線性評價[J].檢驗醫(yī)學與臨床，2012，9（19）：2 503-2 504.

[7] 鄭潤桃，張保平，董莉.雅培I2000型化學發(fā)光儀測定癌胚抗原的方法學性能評價[J].內(nèi)蒙古醫(yī)學雜志，2011，43（4）：416-418.

[8]朱勇.血清TSGF、CEA、AFP、CA724、CA199聯(lián)合檢測在胃癌診斷中的價值[J].山東醫(yī)藥，2011，51（14）：45-46.

[9]呂民林.血清AFP、CEA、CA125、CA199在原發(fā)性肝癌診斷中的應用價值[J].中國實用醫(yī)藥，2014（1）：29-30.

[10]朱波，沈偉，黃家勤，等.ARCHITECT I2000SR化學發(fā)光儀甲胎蛋白殘留試劑再利用性能評估[J].國際檢驗醫(yī)學雜志，2013，34（24）：3 397-3 399.

（收稿：2014-10-30修回：2015-02-15）

Analysis on detection results by remaining reagent of Abbott i2000 automatic electrochemical luminescence analyzer

ZHANG Ai-min,ZHANG Gui-fen
（Department of Clinical Laboratory,the Affiliated Hospital of Logistics University of PAP,Tianjin 300162,China）

Objective To explore the feasibility of detection by using remaining reagent of Abbott i2000 automatic electrochemical luminescence analyzer.Methods The remaining and original reagents of the analyzer were both used to detect the concentrations of AFP,CEA and CA-199 in low-,medium-and high-concentration serums,the precisions and accuracies were analyzed,and the mean comparison and correlation analysis were carried out.Results The remaining reagent had the precisions for AFP,CEA and CA-199 all less than 5%which accorded with the national standard,and also behaved well in the accuracy.There was a high correlation between the detecting results by the remaining and original reagents,with r＞0.95 and P＞0.05.Conclusion The remaining reagent of Abbott i2000 automatic electrochemical luminescence analyzer can be used to test AFP,CEA and CA-199,with detection quality ensured and cost decreased.[Chinese Medical Equipment Journal，2015，36（10）：100-102]

automatic electrochemical luminescence analyzer;remaining reagent;AFP;CEA;CA-199

[中國圖書資料分類號]R318.6；TH776A

1003-8868（2015）10-0100-03

10.7687/J.ISSN1003-8868.2015.10.100

張愛民（1970—），女，主要從事臨床檢驗方面的研究工作，E-mail：zhang_ai_min@sina.com。

300162天津，武警后勤學院附屬醫(yī)院檢驗科（張愛民，張桂芬）通訊作者：張桂芬，E-mail：563295075@qq.com

1.1.3標本

1.2方法

1.2.1檢測儀器的準備

原裝試劑完成規(guī)定檢測人份后，對儀器做相應設(shè)定：ready狀態(tài)→Reagents→Reagents history→選定“0 TEST”相應項目試劑盒→Delete刪除，重新運行儀器，重新掃描后的“0 TEST”試劑盒恢復為“500 TEST”即可檢測。

1.2.2精密度檢測

分別選取低、高2種濃度的患者混合血清，用原裝和剩余試劑分別重復檢測10次，計算變異系數(shù)（coefficient of variation，CV）。

1.2.3準確度檢測

選取美國伯樂公司生產(chǎn)的TM1和TM2質(zhì)控品，用剩余試劑分別連續(xù)檢測10次，將結(jié)果與廠商提供數(shù)值進行比較及相關(guān)性分析。

1.2.4標本檢測

選用剩余試劑對低、中、高3個濃度的各10份血清樣品進行AFP、CEA、CA-199的測定。

1.3統(tǒng)計學方法