劉 多

乳腺癌是臨床常見的一種惡性腫瘤，屬于血管依賴性疾病，疾病早期即可出現(xiàn)轉(zhuǎn)移現(xiàn)象，其中血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子是親肝素蛋白家族中的一種，在乳腺癌發(fā)生及發(fā)展中具有重要作用。我院為研究血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)在老年乳腺癌組織中的表達(dá)及其與臨床病理分期的關(guān)系，選取48 例老年乳腺癌患者并采集其乳腺癌組織展開分析研究，現(xiàn)報(bào)告總結(jié)如下。

1.材料與方法

1.1 材料 選取我院2013 年6 月～2014 年6 月期間住院手術(shù)的原發(fā)乳腺癌老年患者48 例作為本次研究對(duì)象，其中最大年齡為85 歲，最小年齡為61 歲，平均年齡69.8 ±2.1歲。所有患者術(shù)前均未進(jìn)行過任何放化療治療，均在我院接受乳腺癌根治術(shù)治療，且術(shù)后均未出現(xiàn)癌殘留者，采集患者乳腺癌組織制作蠟塊標(biāo)本。其中Ⅰ期13 例，Ⅱ期19 例，Ⅲ14例，Ⅴ期2 例;均經(jīng)病理學(xué)證實(shí)。

1.2 方法 將48 例患者的石蠟塊做成5μm 厚的切片，每張石蠟片切片5 張，處理好玻片，撈片后將其放置在病理組織漂烘處理儀上固定，固定時(shí)間需大于4 小時(shí)，室溫保存。將脫蠟前的標(biāo)本放置在70℃的恒溫箱內(nèi)20 分鐘，隨后在二甲苯及梯度酒精中脫蠟水化。在3%的雙氧水中浸泡10 分鐘(避光)，阻斷內(nèi)源性過氧化物酶活性，隨后選擇直接蒸煮的方法實(shí)施抗原修復(fù)。向每張切片中滴加50μl 的一抗進(jìn)行一抗孵育，在室溫下放置1 小時(shí)，使用磷酸鹽緩沖液(PBS 液)沖洗3次，每次2 分鐘;擦片后將多聚酶滴加在切片上進(jìn)行二抗孵育，在室溫下放置10 分鐘，使用使用磷酸鹽緩沖液沖洗3 次，每次2 分鐘。隨后將兩滴先配制好的DAB，在顯微鏡輔助下進(jìn)行顯色控制;使用自來水進(jìn)行沖洗，并使用蘇木素進(jìn)行30秒復(fù)染，使用鹽酸酒精分化。切片干燥后選擇中性樹膠進(jìn)行封固。

1.3 觀察指標(biāo)［1］血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子的陽性表達(dá)主要以在胞漿中出現(xiàn)的棕黃色顆粒為標(biāo)準(zhǔn)，在每切片中隨機(jī)選擇5 個(gè)高倍視野，計(jì)算并統(tǒng)計(jì)每個(gè)高倍視野中的陽性細(xì)胞數(shù)，其陽性細(xì)胞所占百分率作為分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)。(-)表示無陽性細(xì)胞;(+)表示陽性細(xì)胞數(shù)量小于20%;(++)表示陽性細(xì)胞數(shù)為20%～50%;(+++)表示陽性細(xì)胞數(shù)大于50%。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 數(shù)據(jù)選用SPSS 19.0 統(tǒng)計(jì)軟件處理，其中計(jì)量資料用表示，用t 檢驗(yàn);計(jì)數(shù)資料用(%)表示，用χ2檢驗(yàn)，P ＜0.05 表示有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2.結(jié)果

2.1 在乳腺癌組織中血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子陽性表達(dá)情況及與腫瘤大小的關(guān)系 在本次研究的48 例老年乳腺癌患者的乳腺癌組織中，血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子陽性表達(dá)患者31 例，其陽性表達(dá)率為64.6%。在乳腺癌組織中腫瘤大小不同，其血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子陽性表達(dá)率無明顯差異(P ＞0.05)，詳見表1。

表1 患者血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子陽性表達(dá)情況與腫瘤大小的關(guān)系［n(%)］

2.2 血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子陽性表達(dá)情況與與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況的關(guān)系 患者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移陽性其血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子陽性25 例，陽性表達(dá)率為80.6%(25/31)，患者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移陰性其血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子陽性6 例，陽性表達(dá)率為19.4%(6/31)，淋巴轉(zhuǎn)移陽性者其血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子陽性表達(dá)率高于陰性者，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P ＜0.05)。

2.3 血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子陽性表達(dá)情況與乳腺癌臨床分期的關(guān)系 乳腺癌Ⅲ期、Ⅴ期患者14 例，其血管內(nèi)皮因子陽性13 例，陽性表達(dá)率為92.9%;0 期、Ⅰ期、Ⅱ期患者36 例，其血管內(nèi)皮因子陽性18 例，陽性表達(dá)率為50.0%;Ⅲ期、Ⅴ期患者陽性表達(dá)率高于0 期、Ⅰ期、Ⅱ期患者(P ＜0.05)，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3.討論

近年來，隨著人們生活節(jié)奏不斷加快，生活方式不斷改變，乳腺癌的發(fā)生率也不斷上升，特別是在我國(guó)經(jīng)濟(jì)發(fā)達(dá)城市，其發(fā)生率上升趨勢(shì)明顯，是目前發(fā)生率上升最快的一種惡性腫瘤，對(duì)女性健康及生命威脅極大［2］。因此現(xiàn)階段和乳腺浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移的相關(guān)因子成為了臨床研究的重點(diǎn)。其中血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子是親肝素蛋白家族中的一員，在腫瘤血管生成中具有重要作用，可有效促進(jìn)人體腫瘤新生血管的形成，并為腫瘤的生長(zhǎng)、發(fā)展提供營(yíng)養(yǎng)［3］;另外血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子具有輸送腫瘤因子的作用，可導(dǎo)致患者腫瘤出現(xiàn)全身擴(kuò)散現(xiàn)象。

眾所周知，腫瘤的遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移是乳腺癌患者死亡的主要因素，其血運(yùn)轉(zhuǎn)移為主要轉(zhuǎn)移方式，所以血管在乳腺癌組織轉(zhuǎn)移中作用重大。在腫瘤生長(zhǎng)過程中，血管生成為其生長(zhǎng)過程重要標(biāo)志，在腫瘤生存、生長(zhǎng)及浸潤(rùn)過程中均發(fā)揮著重要的作用。在腫瘤早期血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子即可表達(dá)，且其表達(dá)可伴隨腫瘤生長(zhǎng)全過程，屬于腫瘤血管生成中主要調(diào)控因子。根據(jù)相關(guān)研究發(fā)現(xiàn)，促血管生長(zhǎng)因子可有效為腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)及轉(zhuǎn)移提供營(yíng)養(yǎng)供給，其血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子在胃癌、卵巢癌、甲狀腺癌及結(jié)腸癌等多種惡性腫瘤中陽性表達(dá)率均較高，其表達(dá)水平與患者的預(yù)后及轉(zhuǎn)移程度有密切關(guān)系［4］。在本次研究中，48 例老年乳腺癌患者的乳腺癌組織血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子陽性表達(dá)率為64.6%，在乳腺癌組織中腫瘤大小不同，其血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子陽性表達(dá)率無明顯差異(P ＞0.05)，無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;患者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移陽性其血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子陽性表達(dá)率為80.6%，明顯高于陰性淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移陰性患者的陽性表達(dá)率(P ＜0.05)，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;乳腺癌Ⅲ期、Ⅴ期患者其血管內(nèi)皮因子陽性表達(dá)率為92.9%，明顯高于0 期、Ⅰ期、Ⅱ期患者的陽性表達(dá)率(P ＜0.05)，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，說明與乳腺癌TNM 分期(乳腺癌臨床分期)密切相關(guān)。所以在臨床上可將乳腺癌患者血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子作為患者有無遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移及惡性腫瘤發(fā)展程度的重要標(biāo)準(zhǔn)［5］，有利于臨床醫(yī)生判斷患者腫瘤惡性程度以及其預(yù)后效果，并為治療方案的制定提供重要指標(biāo)，有利于實(shí)現(xiàn)患者個(gè)體化、針對(duì)性的治療干預(yù)，提高治療效果。

1 都海明.乳腺癌組織中血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子的表達(dá)及其與臨床病理指標(biāo)的關(guān)系［D］.南昌大學(xué)醫(yī)學(xué)院，2010.

2 袁媛，范宏娟，于增榮，等.血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子在乳腺癌中的表達(dá)及與分子分型的關(guān)系［J］.蚌埠醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2014，39(10):1333-1336.

3 薛今琦，張文海.沈陽地區(qū)老年女性乳腺癌患者臨床和生物學(xué)特征分析［J］.中國(guó)老年保健醫(yī)學(xué)，2011，9(6):37-38.

4 李蔚萍，陸琪，程愛群，等.老年女性乳腺癌72 例臨床分析［J］.老年醫(yī)學(xué)與保健，2010，16(3):161-162.

5 Giuseppe Corona，Jerry Polesel，Lucia Fratino，et al.Metabolomics Biomarkers of Frailty in Elderly Breast Cancer Patients［J］.Journal of Cellular Physiology，2014，229(7):898-902.