紅背桂花的化學成分研究

陳兵祥1，王小玲2

(1.博興縣店子鎮(zhèn)衛(wèi)生院，山東 博興 256500；2.山東大學第二醫(yī)院，山東 濟南 250033)

摘要：目的研究紅背桂花枝和葉的化學成分。方法藥材經(jīng)95%的乙醇提取，提取物經(jīng)石油醚和乙酸乙酯萃取后以硅膠、凝膠和MCI等柱色譜法及重結(jié)晶進行分離純化，采用波譜法進行結(jié)構(gòu)鑒定。結(jié)果從該植物共分離得到9個化合物，其結(jié)構(gòu)鑒定為：baccatin、熊果酸、agallochin J、agallochin K、山奈酚、木犀草素、excolabdone A、β-谷甾醇和胡蘿卜苷。結(jié)論前6種化合物為首次從該植物中分離獲得。

關鍵詞：紅背桂花；大戟科；化學成分

作者簡介：陳兵祥，男，主治醫(yī)師，研究方向：中藥新藥與治療學，E-mail:chenyushan2000@163.com

通訊作者：王小玲，女，主管技師，研究方向：抗腫瘤藥物，Tel:13869141813,E-mail:queenxiaoling@163.com

中圖分類號：R284.1文獻標識碼：A

Studies on chemical constituents ofExcoecariacochinchinensis

CHENBing-xiang1，WANGXiao-ling2

(1.HospitalofDianziTown,BoxingCounty,Boxing256500，China;2.TheSecond

HospitalofShandongUniversity,Jinan250033,China)

Abstract：ObjectiveTo study the chemical constituents of the leaves and small branches of Excoecaria cochinchinensis.MethodsThe plant was extracted with ethanol (95% V/V) and the extract was separated by column chromatography of silica gel,sephadex LH-20,and MCI gel.The structures were elucidated on the basis of extensive spectroscopic methods.ResultsNine compounds were obtained and were established as baccatin,ursolic acid,agallochin J,agallochin K,kaempferol,luteolin,excolabdone A,β-sitosterol and daucosterine.ConclusionCompounds 1～6 were isolated from E.cochinchinensis for the first time.

Key words:Excoecariacochinchinensis;Euphorbiaceae;Chemical constituents

紅背桂花(ExcoecariacochinchinensisLour.)又稱青紫木，為大戟科(Euphorbiaceae)海漆屬植物。該屬植物全世界約有40種，分布在非洲的熱帶地區(qū)、亞洲以及澳大利亞的西北部地區(qū)，在我國有6種和1個變種，主要分布在西南部、南部及臺灣[1]。紅背桂花為常綠灌木，高達1 m，葉互生，背面紫紅或血紅色。民間以其全株入藥，具有通經(jīng)活絡、止痛的功效，用于治療麻疹、腮腺炎、扁桃體炎、心絞痛、腎絞痛、腰肌勞損等癥[2]。前人對該屬植物化學成分的研究表明，其中主要含有單萜、二萜、三萜、鞣質(zhì)和黃酮類化合物，以二萜類化合物最具有代表性[3]。其中一些化合物的抗HIV活性[4]和抗腫瘤活性[5]受到廣大科研工作者的關注。為了更深入地研究該藥用植物的化學成分，為其開發(fā)利用奠定基礎，本文對其化學成分進行了系統(tǒng)研究，從中分離獲得了9個化合物，采用一維和二維NMR、MS以及TLC比較等手段鑒定為baccatin(1)、熊果酸(2)、agallochin J(3)、agallochin K(4)、山柰酚(5)、木樨草素(6)、excolabdone A(7)、β-谷甾醇(8)和胡蘿卜苷(9)。經(jīng)文獻檢索，化合物1～6為首次從該植物分離獲得。

1儀器與材料

1.1儀器X-6顯微熔點測定儀(北京泰克儀器廠，溫度未校正)；Nicolet Nexus 470 紅外分光光度計；Bruker AM-600核磁共振分析儀；API4000三重四級桿質(zhì)譜儀。

1.2材料硅膠(青島海洋化工廠，200～300目)；Sephadex LH-20凝膠(Amersham Biosciences)；MCI樹脂(三菱公司)；硅膠GF254預制硅膠薄層板(煙臺江友硅膠開發(fā)有限公司)。有機溶劑購自天津化學試劑一廠，均為分析純；水為蒸餾水。紅背桂花小枝和葉子2008年8月采自云南省西雙版納，由山東大學藥學院沈濤鑒定，標本保存于山東大學藥學院生藥學教研室。

2提取與分離

紅背桂花樣品(6 kg)自然陰干并粉碎，以95%乙醇冷浸提取4次，每次以20 L溶劑提取5 d。過濾、合并提取液后減壓濃縮得到深黃色的粗浸膏(600 g)。將浸膏混懸于溫水中(1.5 L)，然后依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取(每種溶劑1.5 L×5次)。經(jīng)TLC檢測，將石油醚部分和乙酸乙酯部分合并(共297 g)，用硅膠(200～300目)分離，選用石油醚-丙酮 (20∶1→1∶1)進行洗脫，共得到12個部分。石油醚-丙酮20∶1洗脫部分(10.1 g)經(jīng)進一步重結(jié)晶純化得化合物8 (512.0 mg)。石油醚-丙酮10∶1洗脫部分(6.4 g)經(jīng)過硅膠柱層析(石油醚-乙酸乙酯，100∶4→100∶7)和Sephadex LH-20凝聚柱色譜(無水乙醇)得化合物1(5.9 mg)和2(7.3 mg)。石油醚-丙酮6∶1 洗脫部分(12.3 g)經(jīng)過Sephadex LH-20凝聚柱色譜(無水乙醇)、MCI柱色譜(50%→100%甲醇)和硅膠柱色譜(石油醚-丙酮，25∶1～10∶1)等進行分離以及重結(jié)晶純化，得到化合物3(8.3 mg)、4(7.6 mg)、5(10.1 mg)、6(12.9 mg)和7(3.9 mg)。石油醚-丙酮2∶1洗脫部分(16.3 g)中得化合物9(157.0 mg)。

3結(jié)構(gòu)鑒定

3.1化合物1無色針狀結(jié)晶(石油醚-丙酮)，mp：230～232 ℃，ESI-MS m/z 459 [M+H]+，1H-NMR(600 MHz，CDCl3)δ：2.10(1H，dd，J=12.3，4.7 Hz，H-1a)，0.93(1H，m，H-1b)，3.74(1H，m，H-2)，2.10(1H，dd，J=12.3，4.7 Hz，H-3)，6.70(1H，d，J=8.9 Hz，H-15)， 6.44(1H，d，J=8.9 Hz，H-16)，1.01(3H，s，H-23)，0.83(3H，s，H-24)，0.93(3H，s，H-25)，1.04(3H，s，H-26)，0.98(3H，s，H-27)，0.92(3H，s，H-29)，0.95(3H，s，H-30)。13C-NMR(150 MHz，CDCl3)δ：46.7(C-1)，69.3(C-2)，84.0(C-3)，39.1(C-4)，55.8(C-5)，19.2(C-6)，40.6(C-7)，43.0(C-8)，51.2(C-9)，38.9(C-10)，19.0(C-11)，49.7(C-12)，39.7(C-13)，87.4(C-14)，131.7(C-15)，135.2(C-16)，77.2(C-17)，41.0(C-18)，39.0(C-19)，30.8(C-20)，35.1(C-21)，27.5(C-22)，28.1(C-23)，16.0(C-24)，18.4(C-25)，18.0(C-26)，24.8(C-27)，32.9(C-29)，23.7(C-30)。以上數(shù)據(jù)與文獻[6]報道的三萜類化合物baccatin一致。

3.2化合物2無色針狀結(jié)晶(乙醇)，mp：286～288 ℃，1H-NMR(600 MHz，DMSO-d6)δ：3.00 (1H，m，H-3)，5.13(1H，br s，H-12)，2.10(1H，d，J=11.4 Hz，H-18)，0.67(3H，s，H-23)，0.74(3H，s，H-24)，0.86(3H，s，H-25)，0.89(3H，s，H-26)，1.04(3H，s，H-27)，0.90(3H，d，J=11.7 Hz，H-29)，0.81(3H，d，J=6.0 Hz，H-30)。13C-NMR(150 MHz，DMSO-d6)δ：38.6(C-1)，27.4(C-2)，77.2(C-3)，38.8(C-4)，55.2(C-5)，18.4(C-6)，33.1(C-7)，40.4(C-8)，47.2(C-9)，36.7(C-10)，23.7(C-11)，125.0(C-12)，138.6(C-13)，42.1(C-14)，27.9(C-15)，24.2(C-16)，47.4(C-17)，52.8(C-18)，38.9(C-19)，38.8(C-20)，30.6(C-21)，36.9(C-22)，28.7(C-23)，16.5(C-24)，15.7(C-25)，17.5(C-26)，23.3(C-27)，178.7(C-28)，17.3(C-29)，21.5(C-30)。以上數(shù)據(jù)與文獻[7]報道的三萜類化合物熊果酸(ursolic acid)一致。

3.3化合物3無色針狀結(jié)晶(乙醇)，mp：146～148 ℃，1H-NMR(600 MHz，CDCl3)δ：2.32(1H，m，H-2a)，2.81(1H，m，H-2b)，5.80(1H，d，J=6.2 Hz，H-7)，2.71 (1H，m，H-9)，4.23(1H，td，J=10.8，5.0 Hz，H-11)，3.94(1H，s，H-14)，6.50(1H，dd，J=17.6，10.6 Hz，H-15)，5.15(1H，d，J=10.6 Hz，H-16a)，5.22(1H，d，J=17.6 Hz，H-16b)，1.13(3H，s，H-17)，1.11(3H，s，H-18)，1.11(3H，s，H-19)，1.41(3H，s，H-20)。13C-NMR(150 MHz，CDCl3)δ：40.8(C-1)，35.4(C-2)，215.8(C-3)，47.9(C-4)，52.7(C-5)，24.0(C-6)，126.3(C-7)，140.0(C-8)，54.5(C-9)，36.7(C-10)，67.9(C-11)，41.0(C-12)，41.9(C-13)，80.5(C-14)，147.9(C-15)，111.4(C-16)，23.1(C-17)，26.2(C-18)，22.6(C-19)，14.8(C-20)。以上數(shù)據(jù)與文獻[8]報道的二萜類化合物agallochin J一致。

3.4化合物4無色針狀結(jié)晶(乙醇)，mp：156～158 ℃，1H-NMR(600 MHz，CDCl3)δ：3.42(1H，t，J=6.4 Hz，H-3)，5.84(1H，br s，H-7)，4.22(1H，td，J=10.2，5.0 Hz，H-11)，3.90(1H，s，H-14)，6.48(1H，dd，J=17.6，10.5 Hz，H-15)，5.12(1H，d，J=10.5 Hz，H-16a)，5.22(1H，d，J=17.6 Hz，H-16b)，1.10(3H，s，H-17)，1.15(3H，s，H-18)，1.15(3H，s，H-19)，1.30(3H，s，H-20)。13C-NMR(150 MHz，CDCl3)δ：40.8(C-1)，29.1(C-2)，78.4(C-3)，39.5(C-4)，50.7(C-5)，23.4(C-6)，126.9(C-7)，139.4(C-8)，55.3(C-9)，36.8(C-10)，67.5(C-11)，40.9(C-12)，41.6(C-13)，80.6(C-14)，147.8(C-15)，111.3(C-16)，22.4(C-17)，28.6(C-18)，16.7(C-19)，15.6(C-20)。以上數(shù)據(jù)與文獻[8]報道的二萜類化合物agallochin K一致。

3.5化合物5黃色粉末，鹽酸-鎂粉反應顯紅色，1H-NMR(600 MHz，DMSO-d6)δ：12.37(1H，br s，5-OH)，8.11(2H，d，J=7.2 Hz，H-2′，H-6′)，6.92(2H，d，J=7.2 Hz，H-3′，H-5′)，6.21(1H，s，H-6)，6.42(1H，s，H-8)。13C-NMR(150 MHz，DMSO-d6)δ：146.7(C-2)，135.6(C-3)，175.8(C-4)，160.6(C-5)，98.1(C-6)，163.9(C-7)，93.4(C-8)，156.1(C-9)，102.9(C-10)，121.6(C-1′)，129.4(C-2′)，115.3(C-3′)，159.1(C-4′)，115.3(C-5′)，129.4(C-6′)。以上數(shù)據(jù)與文獻[9]報道的黃酮類化合物山柰酚(kaempferol)一致。

3.6化合物6黃色粉末，鹽酸-鎂粉反應顯紅色，1H-NMR(600 MHz，DMSO-d6)δ：12.87(1H，br s，5-OH)，10.56(1H，br s，7-OH)，9.24(1H，s，3′-OH)，9.74(1H，s，4′-OH)，7.34(1H，s，H-2′)，6.95(1H，d，J=8.1 Hz，H-5′)，7.38(1H，d，J=8.1 Hz，H-6′)，6.64(1H，s，H-3)，6.15(1H，d，J=2.0 Hz，H-6)，6.44(1H，d，J=2.0 Hz，H-8)。13C-NMR(150 MHz，DMSO-d6)δ：164.0(C-2)，102.5(C-3)，181.4(C-4)，161.3(C-5)，98.7(C-6)，163.7(C-7)，93.7(C-8)，157.2(C-9)，103.3(C-10)，121.3(C-1′)，113.1(C-2′)，145.5(C-3′)，149.4(C-4′)，115.8(C-5′)，119.3(C-6′)。以上數(shù)據(jù)與文獻[9]報道的黃酮類化合物木犀草素(luteolin)一致。

3.7化合物7無色針狀結(jié)晶(乙醇)，mp：248～250 ℃，1H-NMR(600 MHz，CDCl3)δ：6.23(1H，dd，J=4.5，3.0 Hz，H-2)，6.18(1H，d，J=4.5 Hz，H-3)，2.75(1H，d，J=2.8 Hz，H-5)，5.04(1H，d，J=2.5 Hz，H-6)，2.63(1H，d，J=16.5 Hz，H-12a)，3.51(1H，d，J=16.5 Hz，H-12b)，6.31(1H，dd，J=17.3，10.7 Hz，H-14)，4.93(1H，d，J=17.3 Hz，H-15a)，5.37(1H，d，J=17.3 Hz，H-15b)，1.45(3H，s，H-16)，1.88(3H，s，H-17)，0.99(3H，s，H-18)，1.03(3H，s，H-19)，1.67(3H，s，H-20)，2.03(3H，s，OAc-2)，2.16(3H，s，OAc-3)。13C-NMR(150 MHz，CDCl3)δ：27.5(C-1)，70.4(C-2)，75.9(C-3)，43.7(C-4)，43.1(C-5)，73.8(C-6)，37.2(C-7)，81.7(C-8)，83.1(C-9)，34.5(C-10)，207.1(C-11)，50.1(C-12)，76.2(C-13)，147.9(C-14)，110.4(C-15)，31.3(C-16)，24.0(C-17)，33.1(C-18)，23.9(C-19)，20.3(C-20)，21.2(CH3-2)，170.9(CO-2)，20.9(CH3-3)，170.2(CH3CO-3)。以上數(shù)據(jù)與文獻[10]報道的二萜類化合物excolabdone A一致。

3.8化合物8無色針狀結(jié)晶(氯仿-甲醇)，mp:136～138 ℃，Liebermann-Burchard反應陽性，與已知對照品在TLC中交叉點樣，其Rf值一致，與已知品混合后熔點不降，且其IR譜也與已知對照品完全一致，鑒定該化合物為β-谷甾醇(β-sitosterol)。

3.9化合物9白色粉末(氯仿-甲醇)，mp:308～310 ℃，Liebermann-Burchard及Molish反應均為陽性，在TLC中與已知對照品共同交叉點樣，Rf值一致，其IR譜與已知品完全一致，鑒定該化合物為胡蘿卜苷(daucosterine)。

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