馮魁+艾佳俊

氯霉素是一種高效廣譜的抗生素，可用于各種動(dòng)物傳染性疾病的防治，但它的副作用很大。1999年9月13日中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)部發(fā)布了《動(dòng)物性食品中獸藥最高殘留限量》的通知，規(guī)定了氯霉素在所有食品動(dòng)物的可食用組織中不得檢出。2002年3月15日，被我國(guó)農(nóng)業(yè)部關(guān)于發(fā)布《食品動(dòng)物禁用的獸藥及其化合物清單》列為禁止使用的抗生素。

研究使用智能化食品安全一體機(jī)對(duì)樣品進(jìn)行前處理后，使用高效液相色譜儀進(jìn)行檢測(cè)。實(shí)驗(yàn)方法簡(jiǎn)單易行，目標(biāo)物質(zhì)回收率高。

試劑和材料

氯霉素標(biāo)準(zhǔn)品來自中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)研究院。準(zhǔn)確稱量氯霉素標(biāo)品10mg，用甲醇定容于100mL容量瓶中，配制成100 μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)貯備液。

氯霉素前處理試劑盒，包含提取劑、固相萃取柱、洗脫劑。

其余試劑均為色譜純。

儀器和設(shè)備

高效液相色譜儀DIONEX U3000：配有DAD檢測(cè)器。

智能化食品安全一體機(jī)。

液相色譜條件

（1）色譜柱：C18柱，4.6 mm×150mm（d.i.），粒度5μm。流動(dòng)相：乙腈+1%乙酸水溶液=20+80（V/V）。流速：1.0mL/min柱溫：35℃。進(jìn)樣量 ：20μL。檢測(cè)波長(zhǎng)：282nm。

測(cè)定步驟

稱取樣品1.00g，加入到智能化食品安全一體機(jī)的樣品杯中，裝入固相萃取柱，按表1設(shè)定儀器工作參數(shù)。

處理完成后，取下固相萃取柱，加入1mL洗脫劑洗脫，過4.5μm膜后按色譜條件檢測(cè)。

結(jié)果與討論

色譜測(cè)定

在上述色譜條件下，氯霉素的保留時(shí)間約為11.137min。圖1、圖2為樣品加標(biāo)前后色譜圖對(duì)照。

繪制標(biāo)準(zhǔn)工作曲線

移取氯霉素的標(biāo)準(zhǔn)溶液，用流動(dòng)相稀釋成50μg/L、100μg/L、200μg/L、500μg/L標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，用高效液相色譜儀測(cè)定，和空白樣液色譜對(duì)照得出標(biāo)準(zhǔn)工作曲線。線性系數(shù)0.989，y=1073.9x+5829.1。

樣品檢測(cè)結(jié)果計(jì)算

用色譜數(shù)據(jù)處理機(jī)或按式（1）計(jì)算供試樣品中氯霉素殘留量。

ω=ci；

ω-食品中氯霉素殘留量，μg/kg；

ci-標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出試樣溶液中氯霉素標(biāo)準(zhǔn)工作溶液的濃度，μg/L。

統(tǒng)計(jì)10個(gè)以上樣品檢測(cè)數(shù)據(jù)，得出方法回收率為97.67%左右。