孫逸雨，張 騰，楊 霄，佟繼銘，張樹峰△

（1.河北聯(lián)合大學(xué)中醫(yī)學(xué)院，河北唐山 063000；2.承德醫(yī)學(xué)院）

甘草甘遂不同配伍比例對大鼠腎功能的影響

孫逸雨1，張 騰2，楊 霄2，佟繼銘2，張樹峰2△

（1.河北聯(lián)合大學(xué)中醫(yī)學(xué)院，河北唐山 063000；2.承德醫(yī)學(xué)院）

目的：觀察長期灌胃甘草甘遂不同配伍比例水煎劑對大鼠腎功能的影響。方法：50只SD大鼠隨機(jī)分為正常對照組，甘遂組，甘遂配伍甘草1：0.25組、1：0.5組和1：1組，每組10只大鼠，各組大鼠均連續(xù)灌胃給藥28天。檢測大鼠血肌酐（Cr）和尿素氮（BUN）的含量，HE染色觀察腎臟形態(tài)結(jié)構(gòu)的變化。結(jié)果：各用藥組大鼠血Cr和BUN的含量明顯高于正常對照組大鼠，以甘遂組最為顯著（P＜0.01，P＜0.05）；甘遂甘草配伍組，隨甘草比例的增加，大鼠血Cr和BUN的含量逐漸降低（P＜0.01，P＜0.05）。各用藥組大鼠腎臟形態(tài)結(jié)構(gòu)均發(fā)生不同程度的病理變化，以甘遂組最為嚴(yán)重；甘遂甘草配伍組，隨甘草比例的增加，腎臟的病理變化逐漸減輕。結(jié)論：長期使用甘遂對大鼠腎臟具有明顯的毒性作用，甘草與甘遂配伍具有減輕甘遂對腎臟毒性作用的功效，且與甘草的比例有關(guān)。

甘遂；甘草；腎臟；肌酐；尿素氮

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)藥品和儀器 甘草、炙甘遂（河北安國振宇藥業(yè)，批號130101、130201），均經(jīng)承德醫(yī)學(xué)院中藥研究所佟繼銘教授鑒定，分別為豆科植物甘草Glycyrrhiza uralensis的干燥根莖和醋制后大戟科植物甘遂Euphorbia kansui T.N.Liou ex S.B.Ho的干燥塊根。ExcelsiorTMES組織自動脫水機(jī)，美國Thermo Scientific公司；RM2125型輪轉(zhuǎn)石蠟切片機(jī)，德國Leica公司；TK218恒溫?cái)偲酒瑱C(jī)，湖北泰維醫(yī)療科技有限責(zé)任公司；日立7180全自動生化分析儀，日本株式會社日立高新技術(shù)。

1.2 甘草配伍甘遂水煎劑的制備 按配伍的比例取甘遂、甘草藥材（甘遂：甘草分別為1：0、1：0.25、1：0.5、1：1），8倍量水浸泡60min后煎煮2次，每次30min，合并水煎液，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮至所需濃度。①1：0配伍組：甘遂0.4g/ml；②1：0.25配伍組：甘遂0.4g/ml+甘草0.1g/ ml；③1：0.5配伍組：甘遂0.4g/ml+甘草0.2g/ml；④1：1配伍組：甘遂0.4g/ml+甘草0.4g/ml。

1.3 實(shí)驗(yàn)動物及分組 SD大鼠50只，雌雄各半，體重180-200g，購自北京華阜康生物科技股份有限公司，合格證號SCXK（京）2009-0004。大鼠隨機(jī)分為甘遂組、甘遂配伍甘草1：0.25組、甘遂配伍甘草1：0.5組、甘遂配伍甘草1：1組、正常對照組，每組10只，連續(xù)灌胃給藥28d。

1.4 取材及指標(biāo)檢測

1.4.1 血液指標(biāo)：各組大鼠末次給藥后第2d，4%水合氯醛腹腔注射麻醉，經(jīng)腹主動脈取血約4ml，4000r/min離心12min后取血清，采用日立7180全自動生化分析儀檢測血肌酐（Cr）和尿素氮（BUN）的含量。

1.4.2 觀察腎臟形態(tài)結(jié)構(gòu)：大鼠取血后處死，取雙側(cè)腎臟，10%多聚甲醛固定24h后常規(guī)石蠟包埋，切片（片厚4μm），行常規(guī)HE染色。

1.5 統(tǒng)計(jì)分析 應(yīng)用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，行方差分析，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 各組大鼠血Cr和BUN的含量 與正常對照組比較，各用藥組大鼠血Cr和BUN的含量均明顯升高（P＜0.01，P＜0.05）。與甘遂組比較，甘遂甘草配伍組大鼠血Cr和BUN的含量均明顯降低（P＜0.01，P＜0.05）；并且，隨甘草比例的增加，大鼠血Cr和BUN的含量逐漸降低（P ＜0.01，P＜0.05）。見附表：

附表 各組大鼠血Cr和BUN的含量（±s，n=10）

附表 各組大鼠血Cr和BUN的含量（±s，n=10）

與正常對照組比較：aP＜0.05，bP＜0.01；與甘遂組相比：cP ＜0.05，dP＜0.01；與甘遂甘草1：0.25組相比：eP＜0.05，fP＜0.01；與甘遂甘草1：0.5組相比：gP＜0.05

組別 Cr（μmol/L） BUN（mmol/L）正常對照組 36.19±4.96 7.36±1.01甘遂組 66.79±7.30a18.51±1.94a甘遂甘草1：0.25組 58.85±8.51bc16.48±1.93bc甘草甘遂1：0.5組 50.75±8.19bde12.62±2.37bdf甘遂甘草1：1組 43.05±6.79bdfg10.52±1.77bdfg

2.2 各組大鼠腎臟形態(tài)結(jié)構(gòu)的變化

2.2.1 正常對照組：大鼠腎臟形態(tài)結(jié)構(gòu)正常，皮質(zhì)、髓質(zhì)分界清楚，腎小球未見萎縮、纖維化和肥大，腎小管管腔內(nèi)未見細(xì)胞管型及蛋白管型。

2.2.2 各給藥組：大鼠腎臟形態(tài)結(jié)構(gòu)發(fā)生不同程度的病理變化，以甘遂組最為嚴(yán)重，甘遂甘草配伍組，隨甘草比例的增加，腎臟的病理變化逐漸減輕。①甘遂組：腎小球毛細(xì)血管擴(kuò)張淤血，近曲小管上皮細(xì)胞輕中度水腫，部分腎小管炎性細(xì)胞浸潤、壞死，血管壁增厚硬化，部分腎小管內(nèi)有蛋白管型。②甘遂甘草1：0.25組：腎小球毛細(xì)血管擴(kuò)張淤血，近曲小管上皮細(xì)胞輕中度水腫，少數(shù)腎小管炎性細(xì)胞浸潤、壞死，部分腎小管內(nèi)有蛋白管型形成。③甘遂甘草1：0.5組：部分腎小球毛細(xì)血管擴(kuò)張淤血，近曲小管上皮細(xì)胞輕中度水腫，偶見腎小管炎性細(xì)胞浸潤、壞死，局灶性腎小管壞死，少數(shù)腎小管內(nèi)有蛋白管型形成。④甘遂甘草1：1組：部分腎小球毛細(xì)血管輕度擴(kuò)張淤血，近曲小管上皮細(xì)胞輕度水腫，偶見腎小管壞死，偶見腎小管內(nèi)有蛋白管型形成。

3 討論

血Cr和BUN是臨床常用評價(jià)腎功能的重要指標(biāo)。Cr是肌肉在人體內(nèi)代謝的產(chǎn)物，包括外源性和內(nèi)源性兩類，在外源性肌酐攝入量穩(wěn)定的情況下，血Cr含量主要由腎小球的濾過能力決定，如果血Cr的含量超出正常值，多表明腎小球?yàn)V過功能已經(jīng)受損。BUN是人體內(nèi)蛋白質(zhì)代謝的主要終末產(chǎn)物，主要通過腎小球的濾過隨尿排出體外，當(dāng)腎小球?yàn)V過功能受損時(shí)，會導(dǎo)致血BUN含量的升高。同時(shí)檢測血Cr和BUN含量更具有臨床意義，如二者同時(shí)升高，表明腎臟功能已嚴(yán)重受損［7］。本研究結(jié)果顯示，各用藥組大鼠血Cr和BUN的含量均明顯高于正常對照組，提示單純使用甘遂和甘遂甘草配伍對腎功能均有不同程度的損傷，其中以甘遂組最為顯著；甘遂甘草各配伍組，隨甘草比例的增加血Cr和BUN的含量逐漸降低。腎臟形態(tài)結(jié)構(gòu)觀察的結(jié)果亦證實(shí)了這一點(diǎn)，單用甘遂組大鼠腎臟的病理變化最為嚴(yán)重，甘遂甘草配伍組隨甘草比例的增加，腎臟的病理變化逐漸減輕。因此表明，長期使用甘遂對大鼠腎臟具有明顯的毒性作用，甘草與甘遂配伍具有減輕甘遂對腎臟毒性作用的功效，且與甘草的比例有關(guān)。

本研究結(jié)果雖有駁于中藥“十八反”反藥配伍使用增毒的理論，為了揭示其中的作用機(jī)制，還應(yīng)從反藥配伍的物質(zhì)基礎(chǔ)出發(fā)，結(jié)合其它影響因素（如特定的實(shí)驗(yàn)條件、機(jī)體藥物代謝過程等）進(jìn)行深入研究。

［1］唐于平，吳起成，丁安偉，等.對中藥“十八反”“、十九畏”的現(xiàn)代認(rèn)識［J］.中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2009，15（6）：79-81.

［2］周宗劍，蔣明.從臨床角度探討甘遂甘草同用的安全性問題［J］.云南中醫(yī)中藥雜志，2008，29（1）：24-25.

［3］黃文權(quán)，程相嶺，肖鴻，等.甘草甘遂伍用對大鼠心肝腎功能及形態(tài)的影響［J］.第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào)，2012，23（12）：1439-1441.

［4］鄧毅，寧艷梅.甘草甘遂配伍對小鼠血清中GPT、GOT、LDH影響的實(shí)驗(yàn)研究［J］.中醫(yī)研究，2007，20（3）：15-16.

［5］李燕，孫杰，孫立立，等.中藥甘遂的研究進(jìn)展［J］.食品與藥物，2010，12（9）：363-365.

［6］宗倩倩.大棗配伍大戟類藥材甘遂的毒性研究［D］.南京：南京中醫(yī)藥大學(xué)，2009.

［7］朱旭明，郁昊達(dá)，張健，等.血肌酐、尿素氮及白細(xì)胞計(jì)數(shù)在原發(fā)性高血壓中的意義［J］.國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2011，32（15）：1749-1750.

EFFECTS OF EUPHORBIA KANSUI LICORICE IN DIFFERENT COMPATIBILITY PROPORTION ON RATS’ RENAL FUNCTION

SUN Yi-yu， ZHANG Teng， YANG Xiao， et al

(College of Chinese Traditional Medicine, Hebei United University, Hebei Tangshan 063000, China)

Objective：To observe the effects of long-term gastric perfusion with water decoction of euphorbia kansui licorice in different compatibility proportion on rats' renal function.Methods：50 SD rats were randomly divided into 5 groups with 10 rats in each group： normal control group， euphorbia kansui group， euphorbia kansui licorice 1：0.25， 1：0.5 and 1：1 groups. The rats were all lavaged with corresponding drugs for 28 days. The creatinine （Cr） and urea nitrogen （BUN） content in blood of rats were respectively detected. HE stain was used to observe the pathological changes of kidney.Results： The Cr and BUN content in blood of rats in each drug group were all obviously higher than that of rats in normal control group， especially the euphorbia kansui group （P＜0.01， P＜0.05）. For compatibility groups， the Cr and BUN content in blood gradually decreased with increasing of the proportion of licorice （P＜0.01， P＜0.05）. The morphology of kidney of rats in each drug group appeared pathological changes in different degree， especially the euphorbia kansui group. For compatibility groups， the pathological changes of kidney gradually reduced with increasing of the proportion of licorice. Conclusions： It has obvious toxic effects on kidney after long-term using of euphorbia kansui. Compatibility of licorice and euphorbia kansui can reduce the toxic effects of euphorbia kansui on kidney； moreover， this efficiency is associated with the proportion of licorice.

Euphorbia kansui； Licorice； Kidney； Creatinine； Urea nitrogen

R965

A

1004-6879（2015）01-0008-03

根，性寒、味苦、有毒，歸腎、肺、大腸經(jīng)，具有峻下逐水之功，多用于治療各類水飲內(nèi)停疾患［5］?，F(xiàn)代研究表明，甘遂具有明顯的抗腫瘤、抗病毒等作用，毒性作用包括肝腎損害、皮膚和胃腸道刺激等［6］。本研究以甘遂對腎臟的毒性作用為出發(fā)點(diǎn)，探討甘草和甘遂不同配伍比例對腎臟的影響，以期為臨床合理用藥提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

2014-08-09）

甘遂反甘草屬中藥“十八反”重要內(nèi)容之一，但自古至今不乏兩藥同用之方［1-2］。兩藥配伍后是否增毒為歷代學(xué)者研究的焦點(diǎn)［3-4］。甘遂屬大戟科植物甘遂的干燥快