苗光新，劉 沛，毛曉霞，劉翠哲

（河北省中藥研究與開發(fā)重點實驗室，承德醫(yī)學(xué)院中藥研究所，河北承德 067000）

三黃顆粒與素代三黃顆粒對足跖腫脹和棉球肉芽腫模型的抗炎作用*

苗光新，劉 沛，毛曉霞，劉翠哲△

（河北省中藥研究與開發(fā)重點實驗室，承德醫(yī)學(xué)院中藥研究所，河北承德 067000）

目的：比較三黃顆粒與素代三黃顆粒對足跖腫脹和棉球肉芽腫模型的抗炎作用。方法：Wistar大鼠建立足跖腫脹模型，昆明小鼠建立棉球肉芽腫模型，各組大鼠、小鼠分別灌胃給予三黃顆粒和素代三黃顆粒，觀察二者的抗炎作用。結(jié)果：素代三黃顆粒對新鮮蛋清致大鼠足跖腫脹和小鼠棉球肉芽腫形成的抑制作用明顯優(yōu)于三黃顆粒，組間比較差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。結(jié)論：素代三黃顆粒對足跖腫脹和棉球肉芽腫模型的抗炎作用優(yōu)于三黃顆粒。

素代三黃顆粒；三黃顆粒；足跖腫脹模型；棉球肉芽腫模型；黃芩苷；黃芩素

在體腸吸收實驗表明，黃芩素在胃、小腸以及結(jié)腸的吸收均明顯好于黃芩苷，提示黃芩素比黃芩苷更適合制成口服吸收制劑［2-5］。2010年版中華人民共和國藥典中三黃片處方為大黃、含量70%以上黃芩苷浸膏和鹽酸小檗堿。本研究以三黃片為模型藥物，按原處方制備三黃顆粒，用黃芩素代替黃芩苷制備素代三黃顆粒，通過建立不同的炎癥模型，評價三黃顆粒和素代三黃顆粒對不同炎癥模型的抗炎效果。

1 材料與方法

1.1 材料 Wistar大鼠180-220g，合格證號：SCXK（冀）

2008-1-003，批號1005141，河北省實驗動物中心；雄性昆明小鼠，20-22g，合格證號：SCXK京2009-2007，北京華阜康生物科技股份有限公司。大黃，中國藥材集團(tuán)承德藥材有限責(zé)任公司（承德醫(yī)學(xué)院中藥研究所趙春穎副研究員鑒定合格）；0.9%阿司匹林，承德市普寧制藥廠；戊巴比妥鈉，北京普博斯生物科技有限公司；黃芩素、黃芩苷，中國藥品生物制品檢定所（0715-9708、110715-200514）；鹽酸小檗堿、黃芩苷提取物，邯鄲摩羅丹藥業(yè)股份有限公司；黃芩素提取物，承德醫(yī)學(xué)院中藥研究所自制。

1.2 樣品制備

1.2.1 三黃顆粒的制備：取大黃100g、鹽酸小檗堿1.701g、黃芩苷提取物（含黃芩苷79.10%）6.321g。取大黃50g，粉碎成細(xì)粉，過六號篩；剩余大黃粉碎成粗粉過一號篩，加30%乙醇回流提取3次，每次提取1h，濾過，合并濾液，回收乙醇并減壓濃縮至稠膏狀；加入大黃細(xì)粉、鹽酸小檗堿細(xì)粉、黃芩苷提取物細(xì)粉，混勻，制成顆粒過12目篩，干燥，過24目篩，即得。

1.2.2 素代三黃顆粒的制備：取大黃100g、鹽酸小檗堿1.701g、黃芩素提取物（含黃芩素63.50%）4.777g，制備方法同1.2.1。

1.3 三黃顆粒和素代三黃顆粒對不同炎癥模型的作用比較［1，6］

1.3.1 對鮮蛋清致大鼠足跖腫脹反應(yīng)的影響：Wistar大鼠40只，雌雄各半，隨機(jī)分為空白對照組、陽性對照組（阿司匹林0.15g/kg）、三黃顆粒組（1.00g/kg）和素代三黃顆粒組（1.00g/kg），每組10只大鼠。各用藥組大鼠每天灌胃給藥1次，空白對照組大鼠灌胃給予等量蒸餾水，連續(xù)給藥5d后造模。造模前用游標(biāo)卡尺測量大鼠右后足跖厚度，末次給藥后1h于右后足跖部注射10%新鮮蛋清0.1ml，分別于注射蛋清后1、2、3、4、5、6h測量右后足跖厚度，以注射新鮮蛋清后各時間點右后足跖厚度與注射前厚度的差值為腫脹度。

1.3.2 對小鼠棉球肉芽腫形成的影響：雄性小鼠40只，戊巴比妥鈉腹腔注射麻醉，剪掉胸部毛，碘伏常規(guī)消毒，于胸前正中線切開皮膚，在左右腋窩各植入10mg消毒棉球后縫合皮膚。術(shù)后將小鼠隨機(jī)分為4組（分組方法同1.3.1）。術(shù)后第2天各組小鼠灌胃給藥（對照組灌胃給予等量蒸餾水），連續(xù)7d。末次給藥后24h，脫頸處死小鼠，取出棉球，60℃烘干，稱重，以給藥后棉球的重量減原棉球重量作為肉芽腫的重量，并計算炎癥抑制率（%）=［（空白對照組小鼠肉芽腫重量-實驗組小鼠肉芽腫重量）/空白對照組小鼠肉芽腫重量］×100%。

1.4 統(tǒng)計分析 采用SPSS 15.0統(tǒng)計軟件處理數(shù)據(jù)，行方差分析。

2 結(jié)果

2.1 對新鮮蛋清致大鼠足跖腫脹反應(yīng)的影響 與空白對照組比較，在注射新鮮蛋清后1h-6h，三黃顆粒、素代三黃顆粒和陽性對照藥物對新鮮蛋清引起的大鼠足跖腫脹均有抑制作用（P＜0.05）；與三黃顆粒比較，注射新鮮蛋清后2h、3h、4h，素代三黃顆粒對新鮮蛋清引起的大鼠足跖腫脹的抑制作用優(yōu)于三黃顆粒（P＜0.05）。見附圖：

附圖 對新鮮蛋清致大鼠足跖腫脹反應(yīng)的影響

2.2 對小鼠棉球肉芽腫形成的影響 三黃顆粒雖然對小鼠棉球肉芽腫具有抑制作用，但與空白對照組小鼠棉球肉芽腫重量比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）；陽性對照組、素代三黃顆粒組小鼠棉球肉芽腫重量明顯低于空白對照組和三黃顆粒組（P＜0.05）。見附表：

附表 三黃顆粒與素代三黃顆粒對小鼠棉球肉芽腫形成的影響（±s）

附表 三黃顆粒與素代三黃顆粒對小鼠棉球肉芽腫形成的影響（±s）

與空白對照組比較：*P＜0.05；與三黃顆粒組比較：△P＜0.05

組別 劑量（g/kg） 棉球肉芽腫重（mg） 抑制率（%）空白對照組 —— 16.56±2.56 ——陽性對照組 0.15 9.86±2.42*△40.46三黃顆粒組 1.00 15.27±1.27 7.78素代三黃顆粒組 1.00 10.18±1.29*△38.53

3 討論

本研究通過建立大鼠足跖腫脹模型和小鼠棉球肉芽腫模型等兩個非特異性炎癥反應(yīng)模型，模擬炎癥不同時期的病理表現(xiàn)，考察三黃顆粒和素代三黃顆粒對不同時期炎癥模型的抗炎效果。結(jié)果顯示，灌胃給藥三黃顆粒和素代三黃顆粒均可抑制炎癥的急性期病變和炎癥后期結(jié)締組織生成，而素代三黃顆粒的抗炎效果明顯優(yōu)于三黃顆粒。因此提示，黃芩素替代黃芩苷制成復(fù)方制劑抗炎效果更好。在此基礎(chǔ)上，我們將繼續(xù)研究三黃顆粒和素代三黃顆粒對不同類型炎癥模型的影響，并對其可能的作用機(jī)制作進(jìn)一步的探索。

［1］李紅軍.黃芩提取物抗炎活性試驗研究［J］.特產(chǎn)研究，2013，35（2）：15-18.

［2］龔明濤，虞麗芳，陳慶華，等.大鼠灌胃黃芩苷及其苷元黃芩素的藥動學(xué)研究［J］.中草藥，2009，40（3）：392-394.

［3］Taiming L， Xuehua J. Investigation of the absorption mechanisms of baicalin and baicalein in rats［J］. J Pharm Sci， 2006， 95（6）：1326-1333.

［4］許伯慧，嚴(yán)菲.黃芩苷及其苷元黃芩素體內(nèi)過程的研究進(jìn)展［J］.南通大學(xué)學(xué)報，2010，30（3）：220-223.

［5］謝林利，周密，陳勇川，等.黃芩苷、黃芩素抑制銅綠假單胞菌生物膜形成的研究［J］.中國藥房，2010，21（39）：3651-3653.

［6］楊巧芳，孟慶剛.炎癥動物模型探要［J］.中華中醫(yī)藥學(xué)刊，2008，26（3）：516-517.

［7］龔新榮，趙萬紅，董曉霞，等.湖北兩產(chǎn)地黃芩抗炎鎮(zhèn)痛作用的研究［J］.中國實用醫(yī)藥，2013，8（13）：258-259.

ANTI-INFLAMMATORY EFFECTS OF SANHUANG GRANULES AND SUDAI-SANHUANG GRANULES ON FOOT SWELLING MODEL AND COTTON BALL GRANULOMA MODEL

MIAO Guang-xin， LIU Pei， MAO Xiao-xia， et al

(Hebei Key Laboratory of Research and Exploitation of Traditional Chinese Medicine, Institute of Chinese Materia Medica, Chengde Medical College, Hebei Chengde 067000, China)

Objective：To compare the anti-inflammatory effects of Sanhuang Granules and Sudai-sanhuang Granules on foot swelling model and cotton ball granuloma model.Methods：Wistar rats were used to establish foot swelling model and Kunming mice to establish cotton ball granuloma model. The laboratory animals were respectively lavaged with Sanhuang Granules and Sudai-sanhuang Granules to observe their anti-inflammatory effects. Results： The inhibitory effects of Sudaisanhuang Granules on albumin-induced foot swelling in rats and cotton ball granuloma formation in mice were obviously better than Sanhuang Granules （P＜0.05）. Conclusions： The anti-inflammatory effects of Sudai-sanhuang Granules on foot swelling model and cotton ball granuloma model are superior to Sanhuang Granules.

Sudai-sanhuang Granules； Sanhuang Granules； Foot swelling model； Cotton ball granuloma model；Baicalin； Baicalein.炎癥是十分常見且重要的基本病理過程，是機(jī)體對局部損傷所產(chǎn)生的一種以防御為主的組織反應(yīng)，其基本病理變化包括變質(zhì)、滲出和增生。文獻(xiàn)報道，黃芩對不同類型的炎癥有治療作用，黃芩苷和黃芩素對同種炎癥模型的敏感度不同［1］。目前，在處方中含有黃芩的中藥制劑中，均以黃芩苷作為有效成分投料。研究證明，黃芩苷口服后在腸道菌群的作用下被水解成黃芩素而發(fā)揮作用。

R961

A

1004-6879（2015）01-0010-03

2014-04-26）

* 國家自然科學(xué)基金項目（81073146，81341143），河北省高等學(xué)校科學(xué)技術(shù)研究青年基金項目（2011133），河北省高校重點學(xué)科“中藥學(xué)”資助