亚洲免费av电影一区二区三区,日韩爱爱视频,51精品视频一区二区三区,91视频爱爱,日韩欧美在线播放视频,中文字幕少妇AV,亚洲电影中文字幕,久久久久亚洲av成人网址,久久综合视频网站,国产在线不卡免费播放

        ?

        華南虎獅弓蛔蟲三種線粒體基因的遺傳進(jìn)化分析

        2015-11-23 02:53:13宋美冉李康信石先利譚立娉林麗琴路鵬云李國(guó)清
        關(guān)鍵詞:犬科登錄號(hào)華南虎

        宋美冉,李康信,石先利,胡 偉,譚立娉,羅 琴,林麗琴,路鵬云,陳 武,李國(guó)清

        (1. 華南農(nóng)業(yè)大學(xué)獸醫(yī)學(xué)院,廣州510642;2. 廣州動(dòng)物園獸醫(yī)院,廣州 510075)

        ·研究論文·

        華南虎獅弓蛔蟲三種線粒體基因的遺傳進(jìn)化分析

        宋美冉1,2,李康信1,石先利1,胡 偉1,譚立娉1,羅 琴1,林麗琴1,路鵬云1,陳 武2,李國(guó)清1

        (1. 華南農(nóng)業(yè)大學(xué)獸醫(yī)學(xué)院,廣州510642;2. 廣州動(dòng)物園獸醫(yī)院,廣州 510075)

        為研究華南虎獅弓蛔蟲(Toxascaris leonina)線粒體基因的分子特性,對(duì)來源于4只華南虎的獅弓蛔蟲的pcox1、pnad1和pnad4三種線粒體基因進(jìn)行了擴(kuò)增、克隆和測(cè)序,采用DNAStar和MEGA5.05軟件對(duì)所獲序列,以及GenBank中公布的獅弓蛔蟲等相關(guān)序列進(jìn)行了同源性比對(duì)和遺傳進(jìn)化分析。結(jié)果顯示,4只華南虎的獅弓蛔蟲擴(kuò)增的pcox1、pnad1、pnad4基因序列長(zhǎng)度分別為393、366、399 bp,3段基因序列種內(nèi)變異明顯低于種間變異。系統(tǒng)進(jìn)化樹中,獅弓蛔蟲可分為貓科和犬科動(dòng)物兩大分支,其中4只華南虎的獅弓蛔蟲與已報(bào)道的孟加拉虎、東北虎、華南虎、非洲獅、猞猁的獅弓蛔蟲聚為一支;另外狼和犬的獅弓蛔蟲聚為一支;以pnad1、pnad4建立的系統(tǒng)發(fā)育樹中,虎源獅弓蛔蟲又單獨(dú)聚為一支,表明獅弓蛔蟲在不同虎類之間并沒有嚴(yán)格的宿主特異性。該研究為獅弓蛔蟲的分子鑒定和分子遺傳學(xué)研究提供了科學(xué)依據(jù)。

        獅弓蛔蟲;華南虎;線粒體基因;遺傳進(jìn)化

        獅弓蛔蟲(Toxascaris leonina)是珍稀野生哺乳動(dòng)物尤其是貓科、犬科動(dòng)物(如獅、虎、豹、狐等)的一種常見寄生蟲,屬于線形動(dòng)物門(Nematoda)、尾感器綱(Phasmidia)、蛔目(Ascaridida)、蛔科(Ascaridae)、弓蛔屬(Toxascaris)。獅弓蛔蟲感染可以影響虎的營(yíng)養(yǎng)代謝,造成生長(zhǎng)發(fā)育遲緩,甚至死亡[1]。其幼蟲還可感染人,特別是獸醫(yī)、工作人員及游客[2],屬于人獸共患寄生蟲。線粒體DNA(mitochondria DNA,mtDNA)是真核細(xì)胞的核外環(huán)狀遺傳物質(zhì),其特點(diǎn)是結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單,母系遺傳,極少發(fā)生重組,進(jìn)化速度快[3]。mtDNA在種間、種內(nèi)都具有廣泛的多態(tài)性,可作為研究種群遺傳多樣性的良好分子標(biāo)記[4]。由于線粒體基因具有較高的突變率,在同一基因組內(nèi)各基因之間突變率不同,使得這些基因在寄生性蠕蟲分子分類學(xué)和群體遺傳學(xué)研究中成為有用的遺傳標(biāo)記,特別是對(duì)那些隱藏種,線粒體基因比rDNA基因顯得更為有效[5,6]。近年來國(guó)內(nèi)外學(xué)者對(duì)犬貓及部分野生動(dòng)物獅弓蛔蟲的細(xì)胞色素c氧化酶亞基I(cox1)、煙酰胺脫氫酶亞基I(nad1)、煙酰胺脫氫酶亞基Ⅳ(nad4)基因進(jìn)行了擴(kuò)增與遺傳進(jìn)化分析[7,8]。本研究通過擴(kuò)增廣州某動(dòng)物園華南虎獅弓蛔蟲的部分線粒體基因(pcox1、pnad1、pnad4),結(jié)合GenBank上公布的其他地區(qū)不同動(dòng)物的獅弓蛔蟲線粒體基因,分析獅弓蛔蟲線粒體基因的遺傳進(jìn)化關(guān)系,為進(jìn)一步開展獅弓蛔蟲的分子鑒定和分子遺傳學(xué)研究提供理論依據(jù)。

        1 材料與方法

        1.1 蟲體樣品和主要試劑 蛔蟲樣品(T1、T2、T3、T4)分別采自廣州市某動(dòng)物園的4只華南虎的糞便,蟲體洗滌后,置于75%酒精中-20℃保存。DNA提取試劑盒WizardTMDNA Clean Up System購(gòu)自Promega公司;ExTaq酶、DL-2000 DNA Marker、pMD18-T 載體、top10感受態(tài)細(xì)胞、IPTG和X-gal購(gòu)自TaKaRa公司;蛋白酶K、DNA膠回收試劑盒購(gòu)自O(shè)MEGA公司。

        1.2 蟲體DNA的提取 4條蟲體各剪取一小段,用滅菌雙蒸水沖洗3次,剪碎,加入275 μL 10%SDS DNA裂解液,混勻后放入恒溫箱中,55℃消化過夜。將消化好的蟲體懸液按WizardTMDNA Clean Up System試劑盒使用說明提取蟲體DNA。

        1.3 ITS序列的PCR擴(kuò)增 參照王培園等[9]設(shè)計(jì)的引物擴(kuò)增ITS序列,上游引物為5'-GTAGGTG AACCTGCGGAAGGATCATT-3',下游引物為5'-TTAGTTTCTTTTCCTCCG CT-3',預(yù)計(jì)擴(kuò)增長(zhǎng)度為1000 bp,上述引物由英維捷基(上海)貿(mào)易有限公司合成。擴(kuò)增體系:10×PCR Buffer(Mg2+free)2.5 μL、MgCl2(25 mmol/L)3.0 μL、dNTPs(2.5 mmol/L)2.0 μL、上下游引物(25 μmol/mL)各1.0 μL、模板DNA 1 μL、EX Taq酶(5U/μL)0.25 μL,ddH2O加至25 μL。PCR反應(yīng)條件:94℃預(yù)變性5 min;94℃變性30 s,50℃退火30 s,72 ℃延伸1 min,共35個(gè)循環(huán);最后72℃延伸5 min。PCR產(chǎn)物經(jīng)瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)。

        1.4 pcox1、pnad1、pnad4基因的PCR擴(kuò)增 參照Gasser等[10]設(shè)計(jì)的引物JB3(5'-TTTTTTGGGCAT CCTGAGGTTTAT-3') 和JB4.5(5'-TAAAGAAAG AACATAATGAAAATG-3')擴(kuò)增pcox1基因,預(yù)期擴(kuò)增片段大小約450 bp。參照李明偉等[11]設(shè)計(jì)的引物擴(kuò)增pnad1和pnad4基因,pnad1上游引物為 5'-TTCTTATGAGATTGCTTTT-3',下游引物為 5'-TATCATAACGAAAACGAGG-3',預(yù)期擴(kuò)增片段大小約370 bp;pnad4上游引物為 5'-TTATTATTTAATTTTTTAT-3',下游引物為 5'-ATATGA GTAACAGAAGAATAAGC-3',預(yù)期擴(kuò)增片段大小約400 bp。上述引物均由英濰捷基(上海)貿(mào)易有限公司合成。以提取的蟲體DNA為模板,利用相應(yīng)引物擴(kuò)增pcox1、p n a d1、p n a d4基因片段,擴(kuò)增體系均為:10×PCR Buffer(Mg2+free)2.5 μL、MgCl2(25 mmol/L)4.0 μL(pcox1、pnad4)/3.0 μL(pnad1)、dNTPs(2.5 mmol/L)2.0 μL、上下游引物(25 μmol/ mL)各1.0 μL、模板DNA 1 μL、ExTaq酶(5U/μL)0.25 μL,ddH2O加至25 μL。PCR反應(yīng)條件:94℃預(yù)變性5 min;94℃變性30 s,50℃(cox1、nad1)/44℃(nad4)退火30 s,72℃(cox1、nad1)/68℃(nad4)延伸30 s,共35個(gè)循環(huán);最后72℃延伸5 min。PCR產(chǎn)物經(jīng)瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)。

        1.5 PCR產(chǎn)物的純化、克隆與測(cè)序 利用膠回收試劑盒對(duì)PCR產(chǎn)物進(jìn)行純化,并與pMD18-T載體連接,轉(zhuǎn)入Top10感受態(tài)細(xì)胞,再涂布到含氨芐青霉素、X-gal和IPTG的LB平板上,無菌挑選白色單菌落,進(jìn)行菌液PCR鑒定,篩選陽性克隆。將陽性克隆的菌液送到北京華大生物技術(shù)有限公司測(cè)序。

        1.6 序列比對(duì)與遺傳進(jìn)化分析 在GenBank中下載有關(guān)線蟲的pcox1、pnad1及pnad4基因序列,采用DNAStar中MegAlign軟件比較華南虎獅弓蛔蟲與其他線蟲pcox1、pnad1及pnad4基因序列的同源性;采用MEGA5.05軟件分析不同序列間的堿基組成與變異位點(diǎn),并用該軟件以最大似然法(maximum likelihood,ML)繪制種系發(fā)育樹。

        2 結(jié)果

        2.1 獅弓蛔蟲的分子鑒定 4個(gè)樣品的ITS序列長(zhǎng)度:T1為907 bp,T2為902 bp,T3為908 bp,T4為904 bp,與預(yù)期長(zhǎng)度相符。將4個(gè)樣品的序列與GenBank公布的相關(guān)蛔蟲ITS序列進(jìn)行比對(duì),結(jié)果顯示該4個(gè)序列與獅弓蛔蟲(JF837175.1)的相似性最高,達(dá)99.6%以上,證實(shí)4個(gè)樣品均為獅弓蛔蟲。

        2.2 pcox1、pnad1、pnad4基因的擴(kuò)增結(jié)果 4只華南虎獅弓蛔蟲擴(kuò)增的pcox1、pnad1、pnad4基因片段分別為450、370、400 bp,與預(yù)期大小相符,且無非特異性條帶(圖1)。

        2.3 pcox1基因序列分析 4個(gè)樣本pcox1片段長(zhǎng)度均為441 bp,剔除引物后,得到393 bp的序列,其中A、T、C、G堿基含量分別為18.3%~18.6%、47.8%~48.3%、9.2%~9.7%、23.9%~24.2%。序列比對(duì)結(jié)果顯示(圖2),4個(gè)樣品之間pcox1相似率為98.7%~99.7%,與已報(bào)道的貓科動(dòng)物東北虎、非洲獅、孟加拉虎、華南虎、猞猁的獅弓蛔蟲(登錄號(hào)分別為:JF780947.1、JF780948.1、JF780949.1、JF780950.1、JF780951.1)相似率為97.2%~100%,與犬科動(dòng)物狼、犬獅弓蛔蟲(登錄號(hào):JF780946.1、KC293930.1、KC293933.1、AJ920063.1、AJ920064.1)的相似率為92.6%~94.1%,與蛔科其他線蟲(登錄號(hào):KC543477.1、EU628682.1、AB591803.1、KC172104.1、AB591800.1)相似率為90.3%~92.6%,與蛔目其他線蟲(登錄號(hào):AJ616898.1、JF780943.1、AJ920062.1)的相似率為89.1%~90.6%。

        圖1 獅弓蛔蟲pcox1(A)、pnad1(B)、pnad4(C)基因片段的PCR擴(kuò)增結(jié)果Fig.1 PCR amplifi cation result of pcox1 (A), pnad1 (B)and pnad4 (C) gene of Toxascaris leonina

        2.4 pnad1基因序列分析 4個(gè)樣本pnad1片段長(zhǎng)度均為368 bp(包含上下游引物),A、T、C、G堿基含量分別為15.0%~15.3%、53.3%~53.6%、8.2%~8.5%、23.0%~23.2%。序列比對(duì)結(jié)果顯示,4個(gè)樣本pnad1之間的相似率為98.9%~99.7%,與已報(bào)道的貓科動(dòng)物東北虎、孟加拉虎、華南虎、非洲獅、猞猁獅弓蛔蟲(登錄號(hào)分別為:JF833961.1、JF833963.1、JF833964.1、JF833962.1、JF833965.1)相似率為97.0%~100%,與犬科動(dòng)物狼、犬獅弓蛔蟲(登錄號(hào):KC293954.1、AJ937267.1、KC293967.1、JF833960.1)的相似率為91.0%~92.6%,與浣熊拜林蛔蟲(Baylisascaris procyonis,JF951366.1)的相似率為90.7%,與犬弓首蛔蟲(Toxocara canis,KC293923.1)和貓弓首蛔蟲(T. cati,JF833957.1)相似率為84.2%~86.6%,與諾曼副絲蟲(Parafilaroides normani,KJ801815.1)和疑似栓尾線蟲(Passalurus ambiguous,KF472130.1)的相似率分別為70.8%和72.7%(圖3)。

        圖2 華南虎獅弓蛔蟲與部分其他蛔蟲pcox1序列的同源性比對(duì)Fig.2 The homological comparison of pcox1 gene between T. leonina from the South China Tiger and partial other roundworms

        2.5 pnad4基因序列分析 4個(gè)樣本pnad4片段長(zhǎng)度均為402 bp(含上下游引物),其中A、T、C、G堿基含量分別為17.0%~17.3%、49.4%~49.9%、12.0%~12.5%、20.8%~21.1%。序列比對(duì)結(jié)果顯示(圖4),4個(gè)樣本pnad4之間的相似率為99.0%~100%,與已報(bào)道的貓科動(dòng)物東北虎、孟加拉虎、華南虎、非洲獅、猞猁的獅弓蛔蟲(登錄號(hào)分別為:JF833972.1、JF833974.1、JF833975.1、JF833973.1、JF833976.1)相似率為96.2%~100%,與來自狼、犬的獅弓蛔蟲(登錄號(hào):JF833971.1,AJ937630.1)相似率為89.2%~90.5%,與弓首科犬弓首蛔蟲(AJ937618.1)、貓弓首蛔蟲(AJ937624.1)的相似率為82.7%~84.0%,與蛔目其他線蟲(登錄號(hào):F J 4 2 6 2 3 6.1、A Y 9 0 9 4 6 5.1、K J 7 2 4 4 8 4.1)相似率為77.1%~79.8%。

        2.6 系統(tǒng)進(jìn)化分析 基于pcox1、pnad1、pnad4基因序列以ML法建立的系統(tǒng)進(jìn)化樹基本一致(圖5),獅弓蛔蟲可分為兩大分支,其中4條華南虎獅弓蛔蟲(T1、T2、T3、T4)與已報(bào)道的孟加拉虎、東北虎、華南虎、非洲獅、猞猁的獅弓蛔蟲聚為一支(▲標(biāo)記),形成一個(gè)寄生于貓科動(dòng)物的分支;另外狼和犬的獅弓蛔蟲聚為一支(◆標(biāo)記),形成一個(gè)寄生于犬科動(dòng)物的分支;而以pnad1、pnad4建立的系統(tǒng)發(fā)育樹中,虎源獅弓蛔蟲則單獨(dú)聚為一支(★標(biāo)記)。

        圖3 華南虎獅弓蛔蟲與部分其他蛔蟲pnad1序列的同源性比對(duì)Fig.3 The homological comparison of pnad1 genes between T. leonine from the South China tiger and partial other roundworms

        圖4 華南虎獅弓蛔蟲與部分其他蛔蟲pnad4序列的同源性比對(duì)Fig.4 The homological comparison of pnad4 genes between T. leonina from the South China Tiger and partial other roundworms

        3 討論

        圖5 獅弓蛔蟲pcox1 (A)、pnad1(B)、pnad4 (C)基因以ML法建立的系統(tǒng)進(jìn)化樹Fig.5 Phylogenetic tree based on pcox1 (A), pnad1 (B), pnad4 (C) gene of T. leonina by maximum likelihood (ML) method

        mtDNA在種間、種內(nèi)均具有廣泛的多態(tài)性。Feagin等[12]研究表明cox1基因序列中度保守且堿基替換率較高,可作為優(yōu)良的分子標(biāo)記。陳志港等[7]研究證實(shí)nad1是NADH氧化還原酶的第一個(gè)亞基,可從種的水平來推斷某個(gè)屬的系統(tǒng)發(fā)育關(guān)系。而Brown等[13]和Liu等[14]的研究表明nad4變異適中,含有準(zhǔn)確的系統(tǒng)發(fā)育信息,是系統(tǒng)進(jìn)化和種群遺傳研究中理想的分子標(biāo)記。本研究選取上述3段線粒體基因?qū)V州市某動(dòng)物園華南虎獅弓蛔蟲的遺傳變異情況進(jìn)行了研究,結(jié)果發(fā)現(xiàn)3段基因在堿基組成上均存在偏倚,其中A+T含量均明顯高于G+C含量,這與李明偉等[11]關(guān)于線粒體遺傳密碼組成偏好A、T的報(bào)道一致。4只華南虎獅弓蛔蟲(T1、T2、T3、T4)3段線粒體基因的變異率均在0%~1.3%,與已報(bào)道的獅弓蛔蟲線粒體基因相比,其種內(nèi)差異明顯小于與其他蛔蟲的種間差異。貓科、犬科動(dòng)物獅弓蛔蟲3段基因的變異率大小依次為nad4>nad1>cox1,這與Li等[8]的研究結(jié)果一致,支持了nad4基因變異最大,nad1基因次之,cox1基因變異最小的觀點(diǎn)。研究還發(fā)現(xiàn),4個(gè)樣品3段基因與文獻(xiàn)報(bào)道的貓科動(dòng)物獅弓蛔蟲的變異率明顯小于它們與文獻(xiàn)報(bào)道的犬科動(dòng)物獅弓蛔蟲的變異率。進(jìn)化樹分析表明,貓科動(dòng)物與犬科動(dòng)物的獅弓蛔蟲分屬于兩個(gè)不同的進(jìn)化分支。從pnad1、pnad4角度考察,4個(gè)樣品與虎源獅弓蛔蟲的變異率均小于與貓科其他動(dòng)物獅弓蛔蟲的變異率,而pcox1并沒有表現(xiàn)此特征?;趐nad1、pnad4基因構(gòu)建的系統(tǒng)發(fā)育進(jìn)化樹中,虎源獅弓蛔蟲與獅子、猞猁的獅弓蛔蟲明顯分開,這在一定程度上反映線粒體基因nad4和nad1進(jìn)化較快,比cox1基因更適合用于寄生蟲系統(tǒng)發(fā)生的研究,這與Blouin[15]對(duì)20種線蟲的cox1和nad4基因序列的分析以及Gasser等[10]對(duì)9種帶科絳蟲的cox1、nad1基因序列分析結(jié)果一致。

        此外,本研究比較了廣州市某動(dòng)物園華南虎獅弓蛔蟲與文獻(xiàn)報(bào)道的其他虎源獅弓蛔蟲(均來自四川省某動(dòng)物園)3段線粒體基因的遺傳差異,發(fā)現(xiàn)廣州動(dòng)物園華南虎獅弓蛔蟲間的3段基因變異率與四川動(dòng)物園華南虎和其他虎獅弓蛔蟲相應(yīng)基因變異率沒有明顯的區(qū)別,可能是獅弓蛔蟲在不同虎類之間并沒有嚴(yán)格的宿主特異性。本研究結(jié)果為獅弓蛔蟲的分子鑒定和分子遺傳學(xué)研究提供了科學(xué)依據(jù),對(duì)野生動(dòng)物保護(hù)具有一定的指導(dǎo)意義。

        [1] Okulewicz A, Lonc E, Borgsteede F H M. Ascarid nematodes in domestic and wild terrestrial mammals[J]. Pol J Vet Sci, 2002, 5(4)∶ 277-281.

        [2] Petithory J C, Beddok A, Quedoc M. Ascaridiasis zoonoses∶ visceral larva migrans syndromes[J]. Bull A cad Natl Med, 1994, 178(4)∶ 635-645.

        [3] Blouin M S. Mitochondrial DNA diversity in nematodes[J]. J Helminthol, 1998, 72(4)∶ 285-289.

        [4] Tarrant C A, Blouin M S, Yowell C A, et al. Suitability of mitochondrial DNA for assaying interindividual genetic variation in small helminths[J]. J Parasitol, 1992, 78(2)∶374-378.

        [5] Morgan J A T, Blair D. Relative merits of nuclear ribosomal internal transcribed spacers and mitochondrial CO1 and ND1 genes for distinguishing among Echinostoma species (Trematoda)[J]. Parasitol, 1998, 116(3)∶ 289-297.

        [6] Vural G, Baca A U, Gauci C G, et al. Variability in the Echinococcus granulosus Cytochrome C oxidase 1 mitochondrial gene sequence from livestock in Turkey and a re-appraisal of the G1-3 genotype cluster[J]. Vet Parasitol, 2008, 154(3-4)∶ 347-350.

        [7] 陳志港. 犬科及貓科野生動(dòng)物寄生蛔蟲核糖體基因ITS區(qū)和線粒體cox1、cox2、nad1、nad4基因序列分析及種系發(fā)生研究[D]. 雅安∶ 四川農(nóng)業(yè)大學(xué), 2011.

        [8] Li M W, Lin R Q, Song H Q, et al. Electrophoretic analysis of sequence variability in three mitochondrial DNA regions for ascaridoid parasites of human and animal health significance[J]. Electrophoresis, 2008,29(13)∶ 2912-2917.

        [9] 王培園,陳武,賀現(xiàn)輝,等. 華南虎蛔蟲ITS及5.8S rDNA序列擴(kuò)增及分析[J]. 畜牧與獸醫(yī). 2010, (9)∶ 74-76.[10] Gasser R B, Zhu X, McManus D P. NADH dehydrogenase subunit 1 and cytochrome c oxidase subunit I sequences compared for members of the genus Taenia (Cestoda)[J]. Int J Parasitol, 1999, 29(12)∶ 1965-1970.

        [11] 李明偉. 弓首蛔蟲分子鑒定和線粒體基因組的研究[D].廣州∶ 華南農(nóng)業(yè)大學(xué), 2006.

        [12] Feagin J E. Mitochondrial genome diversity in parasites[J]. Int J Parasitol, 2000, 30(4)∶ 371-390.

        [13] Brown W M, George M Jr, Wilson A C. Rapid evolution of animal mitochondrial DNA[J]. Pro Natl Acad Sci USA,1979, 76(4)∶ 1967-1971.

        [14] Liu J, Berry R E, Blouin M S. Molecular differentiationand phylogeny of entomopathogenic nematodes(Rhabditida∶ Heterorhabditidae) based on ND4 gene sequences of mitochondrial DNA[J]. J Parasitol, 1999,85(4)∶ 709-715.

        [15] Blouin M S. Molecular prospecting for cryptic species of nematodes∶ mitochondrial DNA versus internal transcribed spacer[J]. Int J Parasitol, 2002, 32(5)∶ 527-531.

        PHYLOGENETIC ANALYSIS OF THREE MITOCHONDRIAL GENES OF TOXASCARIS LEONINA FROM SOUTH CHINA TIGER

        SONG Mei-ran1,2, LI Kang-xin1, SHI Xian-li1, HU Wei1, TAN Li-ping1, LUO Qin1, LIN Li-qin1,LU Peng-yun1, CHEN Wu2, LI Guo-qing1
        (1. College of Veterinary Medicine, South China Agricultural University, Guangzhou 510642, China; 2. Veterinary Hospital of Guangzhou Zoo, Guangzhou 510075, China)

        In order to study the molecular characteristics of mitochondrial gene of Toxascaris leonina from South China tigers, three mitochondrial genes, pcox1, pnad1 and pnad4 were amplifi ed, cloned and sequenced. The sequence similarities and genetic evolutional relationship among T. leonina strains were analyzed by the DNAStar and MEGA version 5.05 software. The results showed that the sequence lengths of pcox1, pnad1 and pnad4 genes of four samples were 393 bp, 366 bp and 399 bp, respectively, and their intra-specifi c diff erences were signifi cantly lower than inter-specifi c diff erences. The phylogenetic trees based on the three genes demonstrated that the T. leonina were divided into two groups, one comprising isolates from feline, the other comprising those from canine. In phylogenetic trees based on pnad1 and pnad4, all the T. leonina isolates from tigers located in same small clade. These results indicated that there might be no host specifi city between T. leonina from diff erent tigers. The present study highlighted the research of molecular identifi cation and genetic characterization of T. leonina.

        Toxascaris leonina; South China tiger; mitochondrial genes; phylogenetic analysis

        S852.65

        A

        1674-6422(2015)06-0068-08

        2015-07-16

        國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(31272551)

        宋美冉,女,碩士,主要從事獸醫(yī)寄生蟲研究

        李國(guó)清,E-mail:ggLi@scau.edu.cn;陳武,E-mail:guangzhouchenwu@sina.com

        猜你喜歡
        犬科登錄號(hào)華南虎
        中國(guó)獨(dú)有的虎亞種
        都市人(2024年2期)2024-05-07 13:35:01
        你好,我的動(dòng)物朋友
        基于DNA條形碼進(jìn)行金花茶組種間鑒別
        種子(2021年2期)2021-03-31 09:23:32
        萬年“小狼狗”
        含氟新農(nóng)藥的研究進(jìn)展
        浙江化工(2019年5期)2019-06-04 08:33:34
        小反芻獸疫病毒F基因的序列分析
        為什么沒有大型犬科動(dòng)物?
        中外文摘(2018年16期)2018-11-21 02:54:51
        杭州野生動(dòng)物世界守護(hù)“中國(guó)虎”的未來
        犬具有嘔吐癥狀疾病的診斷
        電子版館藏?cái)?shù)據(jù)回溯中的交叉、重疊、阻滯問題處理
        欧美熟妇另类久久久久久多毛 | 天天天天躁天天爱天天碰2018| 精品乱码卡1卡2卡3免费开放| 国产精品女同久久免费观看| 有码视频一区二区三区| 国产熟妇疯狂4p交在线播放| 久久精品国产亚洲一区二区| 欧美性爱一区二区三区无a| 国产三级av在线精品| 欧美大胆性生话| 日本巨大的奶头在线观看| 国产做床爱无遮挡免费视频| 加勒比久久综合久久伊人爱| 亚洲色中文字幕无码av| 又爽又黄禁片视频1000免费| 国产美女三级视频网站| 亚洲一区二区三区国产| 和黑人邻居中文字幕在线| 精品中文字幕久久久人妻| 国产精品毛片大尺度激情| 妃光莉中文字幕一区二区| 乌克兰粉嫩xxx极品hd| 日韩最新在线不卡av| 国产一区二区资源在线观看| 久久亚洲av成人无码电影a片| 巨熟乳波霸若妻在线播放| 视频网站在线观看不卡| 久久久精品人妻一区二区三区妖精| 色橹橹欧美在线观看视频高清 | av网站入口在线免费观看| 国产乱码精品一区二区三区久久 | 成 人 网 站 在线 看 免费| 激情五月开心五月av| 蜜桃日本免费观看mv| 国产精品二区在线观看| 天堂av中文在线官网| 久久久精品中文字幕麻豆发布| 午夜丰满少妇性开放视频| 国产午夜精品久久久久| 极品粉嫩小仙女高潮喷水操av| 精品国产人成亚洲区|