何珺，謝述瓊，楊佳年，陳偉

（1.貴州省生化工程中心，貴州貴陽550025；2.貴州理工學(xué)院，貴州貴陽550025）

12種十字花科蔬菜種子中蘿卜硫素含量研究

何珺1，謝述瓊2，*，楊佳年1，陳偉1

（1.貴州省生化工程中心，貴州貴陽550025；2.貴州理工學(xué)院，貴州貴陽550025）

采用HPLC測定十二種常見十字花科蔬菜種子中蘿卜硫素含量，該十二種十字花科蔬菜種子中蘿卜硫素含量是蕓薹屬＞蘿卜屬；蕓薹屬中西蘭花種子的蘿卜硫素含量最高，為10.02 mg/g，大頭菜種子中含量最低為17.4 μg/g；蘿卜屬中胡蘿卜種子中的蘿卜硫素含量最高，為144.4 μg/g，白蘿卜種子的含量最低，為8.7 μg/g。

十字花科植物；種子；蘿卜硫素

十字花科植物包括330多個(gè)屬，約3700多種，除南極洲外各大洲均有分布，尤以北溫帶分布最多［1］。我國的十字花科植物品種主要有花椰菜、西蘭花、甘藍(lán)、蘿卜、白菜、大頭菜、芥菜等［2］。近年來關(guān)于十字花科蔬菜具有防癌作用的報(bào)道很多，日本研究人員和美國專家組研究證明十字花科蔬菜里確實(shí)含有抗癌物質(zhì)［3］——蘿卜硫素。

國際上多年的流行病學(xué)調(diào)查發(fā)現(xiàn)，經(jīng)常食用十字花科蕓薹屬蔬菜居民的胃癌、食管癌及肺癌的發(fā)病率較低，硫甙及降解產(chǎn)物確實(shí)具有抗癌特性［4］。研究表明，某些硫代葡萄糖甙的降解產(chǎn)物對肺癌、大腸癌、肝癌和胃癌具有保護(hù)性預(yù)防作用［5］。隨著研究的深入，人們發(fā)現(xiàn)蘿卜硫素不僅可以抑制并殺死癌細(xì)胞，還具有抗菌、提高機(jī)體抗氧化能力和免疫力等藥理作用［6］。因此，蘿卜硫素對于人類的抗癌藥物的研究具有重要的意義。

本文以十二種常見的十字花科蔬菜的種子為原料，包括蕓薹屬：大頭菜、菜心、芥菜、蓮花白、嫩兒菜、牛心甘藍(lán)、結(jié)球甘藍(lán)、西蘭花；蘿卜屬：白蘿卜、青蘿卜、紅蘿卜、胡蘿卜，對這十二種十字花科蔬菜種子中蘿卜硫素含量進(jìn)行測定研究，以對這些常用十字花科蔬菜種子中蘿卜硫素含量進(jìn)行初步了解。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 材料

大頭菜、菜心、芥菜、蓮花白、嫩兒菜、牛心甘藍(lán)、結(jié)球甘藍(lán)、西蘭花、白蘿卜、青蘿卜、紅蘿卜、胡蘿卜種子均于2013年購自于貴陽市花溪區(qū)種子公司。

1.1.2 試藥

蘿卜硫素對照品購自sigma公司（S-4441；純度≥90%）；甲醇（AR；天津科密歐化學(xué)試劑廠）；純化水：貴州省生化工程中心自制。

1.1.3 儀器

高效液相色譜儀：US，Agilent Technology，1100 series；色譜柱：大連依利特分析儀器有限公司，C18（5 μm.，4.6 mm*150 mm）；電子天平：賽多利斯科學(xué)儀器有限公司，BSA124S；電熱恒溫水浴鍋：北京長源實(shí)驗(yàn)設(shè)備廠，HH.SY21-Ni6；超聲波清洗器：上海冠特超聲儀器公司，SG2200HE。

1.2 方法

1.2.1 樣品溶液制備

稱取各種蔬菜種子干燥粉末1 g左右樣品，分別加水2 mL溶解，在35℃條件下酶解8個(gè)小時(shí)，并加8 mL的甲醇超聲半個(gè)小時(shí)，然后微濾，采用HPLC檢測。

1.2.2 測定方法

1.2.2.1 色譜條件

色譜柱：Hypersil C18色譜柱（150 mm×4.6 mm，5 μm）；流速：0.8 mL/min；檢測器：紫外檢測儀；檢測波長：201 nm［7］；柱溫：35℃；進(jìn)樣體積：10 μL；流動相：甲醇-水（20∶80）。

1.2.2.2 對照品溶液制備

準(zhǔn)確稱取蘿卜硫素5 mg于25 mL量瓶中，加入甲醇超聲溶解，并定容至刻度，備用。

1.2.2.3 蘿卜硫素的含量計(jì)算方法

蘿卜硫素含量（mg/g）=［C標(biāo)（mg/mL）×90%×A樣×樣品體積（mL）］/［A標(biāo)×樣品質(zhì)量（g）］

蕓薹屬蘿卜硫素平均含量（mg/g）=（大頭菜+菜心+芥菜+蓮花白+嫩兒菜+牛心甘藍(lán)+結(jié)球甘藍(lán)+西蘭花）種子中蘿卜硫素的含量/8

蘿卜屬蘿卜硫素平均含量（mg/g）=（白蘿卜+紅蘿卜+青蘿卜+胡蘿卜）種子中蘿卜硫素的含量/4

1.3 HPLC圖譜

精確稱取西蘭花種子，大頭菜種子，胡蘿卜種子和白蘿卜種子四種樣品按1.2.1方法進(jìn)行樣液制備，按1.2.2.1上機(jī)測定，其中四種種子中蘿卜硫素的HPLC圖如圖1～圖4。

圖1 西蘭花種子蘿卜硫素圖譜Fig.1 Sulforaphane map of broccoli seeds

圖2 大頭菜種子蘿卜硫素圖譜Fig.2 Sulforaphane map of turnip seed

圖3 胡蘿卜種子蘿卜硫素圖譜Fig.3 Sulforaphane map of carrot seeds

圖4 白蘿卜種子蘿卜硫素圖譜Fig.4 Sulforaphane map of green radish seeds

2 結(jié)果與分析

2.1 蘿卜硫素含量結(jié)果

2.1.1 八種蕓薹屬十字花科蔬菜種子中蘿卜硫素含量

八種蕓薹屬（大頭菜、菜心、芥菜、蓮花白、嫩兒菜、牛心甘藍(lán)、結(jié)球甘藍(lán)、西蘭花）十字花科蔬菜種子粉碎后，樣品按1.2.1方法處理，平行取樣3次，上機(jī)測定其中蘿卜硫素的含量，實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表1。

表1數(shù)據(jù)表明：此八種蕓薹屬十字花科蔬菜種子中都含有蘿卜硫素，其含量由高到低是：西蘭花＞結(jié)球甘藍(lán)＞牛心甘藍(lán)＞嫩兒菜＞蓮花白＞大葉芥菜＞菜心＞大頭菜，其中以西蘭花種子中的含量最高。

2.1.2 四種蘿卜屬十字花科植物種子中蘿卜硫素含量

四種蘿卜屬（白蘿卜、青蘿卜、紅蘿卜、胡蘿卜）十字花科蔬菜種子粉碎后，樣品按1.2.1方法處理，平行取樣3次，上機(jī)測定其中蘿卜硫素的含量，實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表2。

表1 八種蕓薹屬十字花科蔬菜種子中的蘿卜硫素含量結(jié)果Table 1 Sulforaphane content of eight Brassica cruciferous plants in their seeds（μg/g，n=3）

表2 四種蘿卜屬十字花科蔬菜種子中的蘿卜硫素含量結(jié)果Table 2 Sulforaphane Content of four Raphanus cruciferous plants in their seeds（μg/g，n=3）

表2數(shù)據(jù)表明，此四種蘿卜屬十字花科蔬菜種子中含有蘿卜硫素較少，其含量由高到低是：胡蘿卜＞紅蘿卜＞青蘿卜＞白蘿卜，其中以胡蘿卜含量最高。

2.1.3 兩種屬中蘿卜硫素含量對比

將八種蕓薹屬（大頭菜、菜心、芥菜、蓮花白、嫩兒菜、牛心甘藍(lán)、結(jié)球甘藍(lán)、西蘭花）和四種蘿卜屬（白蘿卜、青蘿卜、紅蘿卜、胡蘿卜）種子中的蘿卜硫素的平均含量，按照1.2.2.3的計(jì)算方法，分別計(jì)算出兩個(gè)種屬蔬菜中蘿卜硫素的平均含量，見表3。

表3數(shù)據(jù)表明，在這十二種常見的十字花科蔬菜種子中，蕓薹屬種子的蘿卜硫素含量遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過了蘿卜屬種子中的蘿卜硫素的含量，約為其18倍。

表3 兩種屬十字花科蔬菜種子中蘿卜硫素的平均含量結(jié)果Table 3 Average content of Sulforaphane in two species cruciferous plants in their seeds（μg/g，n=3）

3 結(jié)論

蘿卜硫素具有較強(qiáng)抗癌活性物質(zhì)，大多數(shù)常食用十字花科蔬菜都含有蘿卜硫素［8］，我們采用HPLC法測定了十二種常見十字花科蔬菜種子中蘿卜硫素含量，結(jié)果表明西蘭花種子中蘿卜硫素的含量最高，而白蘿卜種子中的含量最低；綜合此十二種十字花科蔬菜中不同種屬蘿卜硫素含量結(jié)果，發(fā)現(xiàn)蕓薹屬種子中蘿卜硫素含量遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于蘿卜屬種子中蘿卜硫素含量，因此，采用蕓苔屬種子作為提取蘿卜硫素原料較好；其中以西蘭花種子的效果最好。

［1］張鵬云，張耀中.中國植物志［M］.北京：科學(xué)出版社，2004

［2］單彥卿，張建麗，何洪巨.十字花科植物中硫代葡萄糖甙及蘿卜硫素的性質(zhì)研究［J］.食品科技，2007，32（9）：110-112

［3］張宇，吳莉莉，李金偉.3種十字花科蕓苔屬植物化學(xué)成分研究［J］.黑龍江醫(yī)藥科學(xué)，2007，30（2）：21-22

［4］王見冬，袁其朋，錢忠明.蘿卜硫素研究進(jìn)展［J］.食品與發(fā)酵工業(yè)，2003，29（2）：76-80

［5］佟麗麗，鈕昆亮.十字花科植物中的硫代葡萄糖苷及其降解產(chǎn)物［J］.浙江科技學(xué)院學(xué)報(bào)，2004，16（3）：187-189

［6］ Thejassp，Kuttang.Antimetastatic activity of sulforaphane［J］.Life Sciences，2006，78（22）：3043-3050

［7］劉錫建，肖穩(wěn)發(fā)，曹儉，等.SP850樹脂分離蘿卜硫素［J］.食品與發(fā)酵工業(yè)，2011，37（7）：197-200

［8］謝述瓊，何珺，何軍.9種十字花科蔬菜中蘿卜硫素的含量研究［J］.安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)2013，40（3）：460-463

Determining the Sulforaphane Content of Twelve Cruciferous Plants'seeds

HE Jun1，XIE Shu-qiong2，*，YANG Jia-nian1，CHEN Wei1
（1.Research Center of Biochemistry Engineering of Guizhou Province，Guiyang 550025，Guizhou，China；2.Guizhou Institute of Technology，Guiyang 550025，Guizhou，China）

This experiment researched the Sulforaphane Content of twelve cruciferous plants in their seeds with HPLC，Sulforaphane Content in the twelve cruciferous plants is Brassica＞Raphanus.In Brassica broccoli seed's Sulforaphane Content was the higest for 10.02 mg/g，but turnip seed's was the lowest for17.4 μg/g；In Raphanus carrotseed'sSulforaphaneContentwasthehigest，for144.4μg/g，butwhiteradishseed'swasthelowest，for8.7μg/g.

Cruciferous Plants；seeds；Sulforaphane

10.3969/j.issn.1005-6521.2015.04.004

2013-10-21

貴陽市烏當(dāng)區(qū)科學(xué)技術(shù)計(jì)劃項(xiàng)目［2012烏科技合同字第51號］

何珺（1974—），女（漢），副教授，碩士生導(dǎo)師，研究方向：天然產(chǎn)物活性成分分離提取及分析測試。

*通信作者：謝述瓊，女，碩士，研究生。