茹金城　單平囡

抗著絲粒蛋白B抗體在自身免疫性疾病中的表達(dá)及臨床意義

茹金城單平囡

目的 探討抗著絲粒蛋白B（CENP-B）抗體在自身免疫性疾病中的表達(dá)及臨床意義。方法 回顧性分析 2011年3月至2015年3月抗CENP-B抗體陽性189例患者的臨床資料。結(jié)果 抗CENP-B抗體陽性見于系統(tǒng)性硬化癥（SSc）37.04%、系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）16.04%、干燥綜合征（pSS）14.81%、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎（RA）15.34%、局限性硬皮病4.76%、雷諾現(xiàn)象3.7%、重疊綜合征和原發(fā)性膽汁性肝硬化（PBC）各1.59%、自身免疫性肝病2.65%、CREST綜合征和硬化性膽管炎各1.06%。結(jié)論 抗CENP-B陽性多見于系統(tǒng)性硬化癥患者中，亦見于其他多種自身免疫性疾病中，抗CENP-B陽性患者需結(jié)合其它臨床資料進(jìn)一步明確診斷。

抗著絲點(diǎn)抗體 著絲粒蛋白B 抗核抗體 自身免疫性疾病

抗著絲點(diǎn)抗體（ACA）由Moroi等［1］于1980年首次發(fā)現(xiàn)，該抗體是系統(tǒng)性硬皮病中CREST亞型的特異性抗體。ACA主要分為三種不同的蛋白質(zhì)：CENP-A 19kDa、CENP-B 80kDa、CENP-C 140kDa，其中主要抗原為著絲點(diǎn)相關(guān)蛋白B（CENP-B）。近年來發(fā)現(xiàn)系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）、干燥綜合征（SS）、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎（RA）等疾病也存在抗CENP-B抗體。本文分析CENP-B陽性在不同疾病中的分布情況，探討該抗體在其它自身免疫性疾病中的表達(dá)及臨床意義。

1　臨床資料

1.1一般資料 2011年3月至2015年3月本院收治的抗CENP-B抗體陽性患者189例 ，男172例，女17例；年齡24～85歲，平均年齡（43.2±3.2）歲。診斷均符合美國風(fēng)濕病學(xué)會（ACR）1982年分類標(biāo)準(zhǔn)。

1.2抗CENP-B抗體和其他抗體檢測方法和儀器 抗核抗體（ANA）和抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體（ANCA）檢測采用間接免疫熒光法，以滴度≥1：100陽性。抗核抗體譜和抗MPO、PR3和GBM抗體IgG檢測采用歐蒙印跡法，操作嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行（試劑產(chǎn)自德國歐蒙公司）。儀器是EUROStar 11和印跡法自動操作儀EUROBlotMaster。儀器和試劑購自上海承恒醫(yī)療器械有限公司。

1.3統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS17.0統(tǒng)計軟件。計數(shù)資料以（x±s）表示，用t檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2　結(jié)果

2.1抗CENP-B抗體陽性 男性陽性172例（91.01%）、女性17例（8.99%）。

2.2189例抗CENP-B抗體陽性疾病組成及其滴度 見表1。

表 1 189例抗CENP-B抗體陽性疾病組成及其滴度

2.3抗CENP-B抗體與其它抗體的相關(guān)性 見表2。

表2　CENP-B與其它自身抗體的相關(guān)性分布

3　討論

著絲點(diǎn)是真核染色體中姐妹染色單體緊密連在一起的主要位點(diǎn)，在染色體正確分離中發(fā)揮重要作用。著絲點(diǎn)抗原為著絲點(diǎn)結(jié)構(gòu)相關(guān)蛋白［2］?？怪z點(diǎn)抗體是針對著絲點(diǎn)抗原而產(chǎn)生的自身抗體，其可分為幾種不同的蛋白質(zhì)：CENP-A、CENP-B、CENP-C、CENP-D、CENP-E、CENP-F、CENP-G等，其中主要抗原為CENP-A、CENP-B、CENP-C三種，著絲點(diǎn)相關(guān)蛋白B（CENP-B）能與含有各種著絲點(diǎn)抗體的血清起反應(yīng)。CENP-D、CENP-E、CENP-F、CENP-G較少被自身免疫血清識別。ACA與人類白細(xì)胞相關(guān)抗原 DQB等位基因相關(guān)，不同種族有一定的差異。ACA確切的病理作用尚不清楚［3］。一般認(rèn)為ACA的產(chǎn)生是由于著絲點(diǎn)物質(zhì)從死亡細(xì)胞中被釋放出來并暴露于免疫系統(tǒng)所致。另外，ACA可識別顆粒酶 B產(chǎn)生的片段，提示細(xì)胞毒細(xì)胞中顆粒酶B可能在參與ACA的致病機(jī)制［4］。抗著絲點(diǎn)抗體（ACA）的檢測方法除間接免疫熒光法外還有酶聯(lián)吸附法（ELISA）和歐蒙印跡法。

本資料采用間接免疫熒光法檢測ACA，歐蒙印跡法檢測抗著絲粒蛋白B。著絲粒蛋白B是ACA識別的最主要的CENP，抗CENP-B抗體在SSc患者中有較高的敏感性和特異性，尤其對局限型SSc的診斷具有重要的參考價值［5］。本資料結(jié)果顯示CENP-B亦可見于系統(tǒng)性紅斑狼瘡、干燥綜合征、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、原發(fā)性膽汁性肝硬化、自身免疫性肝病等自身免疫性疾病中，這與近來國內(nèi)外報道的文獻(xiàn)相符。189例患者中發(fā)現(xiàn)抗CENP-B抗體除系統(tǒng)性硬化癥外在系統(tǒng)性紅斑狼瘡、干燥綜合征、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎也有較高的陽性率?？笴ENP-B陽性患者可同時出現(xiàn)多種其它抗體，特別是nRNP 、SS-A、 RO-52 、PM-SCL和 AMA-M2同時出現(xiàn)較多。AMA-M2是原發(fā)性膽汁性肝硬化（PBS）的特異性抗體，陽性率增高可部分解釋CENP-B陽性pSS患者的高發(fā)肝臟受累，史旭華［6］等報道的抗著絲點(diǎn)抗體在原發(fā)性膽汁性肝硬化中的意義也證實(shí)這一點(diǎn)。本資料中抗CENP-B抗體與PCNA 、MPO 、PR3、GBM抗體IgG未同時出現(xiàn)，抗CENP-B抗體是否與這四種抗體存在一定的相關(guān)性，需要更多的病例數(shù)進(jìn)一步統(tǒng)計分析。

綜上所述，抗CENP-B與硬皮病相關(guān)，但并非CREST綜合征特異性抗體。對抗CENP-B抗體陽性的患者應(yīng)長期隨診。現(xiàn)已知，抗CENP-B水平與疾病活動性無相關(guān)，其水平在一段時間內(nèi)保持穩(wěn)定?？傊?，像著絲點(diǎn)抗體這種特異性抗體，它的臨床意義以及診斷價值的大小還有待進(jìn)一步研究和探討。

1Moroi Y， Peebles C， Fritzler MJ， et al. Autoantibody to centromere（Kinetochore） in Scleroderma sera.Proc Natl Acad Sci USA， 1980， 77（3）：1627～1631.

2Tan EM.Antiundear antibodies in scleroderma. Intern J Dermatol， 1981，20： 569～573.

3唐福林，占小海，李明佳，等.抗著絲點(diǎn)抗體71例臨床分析.中華風(fēng)濕病學(xué)雜志，1998，2（1）： 17～20.

4Schachna L，Wigley FM，Morris S ，et a1. Recognition of Granzyme B—generated autoantigen fragments in scleroderma patients with ischemic digital loss，Artbritis Rbeum，2002，46：1873～1874.

5Hanke K， Becker MO， Brueckner CS， et al. Anticentromere-a and anticentromere-B antibodies show high concordance and similar associations in patients with systemic.J Rheumatol， 2010， 37（12）：2548～2552.

6史旭華，張奉春，張炬，等. 抗著絲點(diǎn)抗體在原發(fā)性膽汁性肝硬化中的意義. 中華風(fēng)濕病學(xué)雜志，2006，10（8）：485～487.

312030 中國醫(yī)科大學(xué)紹興醫(yī)院檢驗(yàn)科