鄒云敏 吳秀娟 康曉靜 張德志 于世榮 劉建勇 吳曹英 普雄明

共聚焦激光掃描顯微鏡在外陰硬化萎縮性苔蘚與白癜風(fēng)鑒別中的應(yīng)用

鄒云敏 吳秀娟 康曉靜 張德志 于世榮 劉建勇 吳曹英 普雄明*

目的： 明確皮膚共聚焦激光掃描顯微鏡（CLSM）在外陰部位硬化萎縮性苔蘚與白癜風(fēng)鑒別中的應(yīng)用價值。方法： 選取硬化萎縮性苔蘚患者8例和白癜風(fēng)患者16例的典型皮損做CLSM檢查，然后組織病理學(xué)檢查驗證。結(jié)果： 硬化萎縮性苔蘚患者CLSM圖像顯示：表皮變薄、真表皮界線不清、真皮淺層折光度增加、單一核細(xì)胞浸潤，與組織病理學(xué)特征一致。白癜風(fēng)患者CLSM圖像顯示有白斑區(qū)色素完全缺失，或局部殘留，與組織病理性特征一致。結(jié)論： CLSM有助于硬化萎縮性苔蘚與白癜風(fēng)的鑒別與診斷。

白癜風(fēng)； 硬化萎縮性苔蘚； 共聚焦激光掃描顯微鏡

近年來，在體共聚焦激光掃描顯微鏡（confocal laser scanning microscopy，CLSM）已成為一種非侵人性皮膚病檢查工具。它可以快速獲得實時、動態(tài)的皮膚微解剖圖像，減少不必要的皮膚活檢。國內(nèi)外學(xué)者利用CLSM對正常皮膚以及色素障礙性皮膚病、皮膚腫瘤、皮膚癌前病變1、斑駁病2、急性刺激性接觸性皮炎和急性變應(yīng)性接觸性皮炎3、落葉型天皰瘡4、斑禿5等疾病進(jìn)行觀察。早期的硬化萎縮性苔蘚，尤其發(fā)生在外陰部位者難易區(qū)別于白癜風(fēng)，我們利用CLSM技術(shù)對白癜風(fēng)與硬化萎縮性苔蘚的特征進(jìn)行研究，對二者進(jìn)行鑒別，從而為早期的硬化萎縮性苔蘚與白癜風(fēng)的診斷與鑒別提供有利的幫助。

1　資料與方法

1.1一般資料 研究對象：選取2013年10月至

2014年10月到我院皮膚科的發(fā)生于外陰部位疑診為硬化萎縮性苔蘚（圖1a）和白癜風(fēng)（圖1b）的患者篩選出符合下列標(biāo)準(zhǔn)的：同意進(jìn)行CLSM和皮膚組織病理檢查，并經(jīng)組織病理檢查確診為相應(yīng)疾病診斷標(biāo)準(zhǔn)的患者。入選患者24例，其中白癜風(fēng)組16例，男12例，女4例，年齡6～54歲，平均年齡29.8歲；硬化萎縮性苔蘚組8例，男2例，女6例，年齡7～47歲，平均年齡25.8歲。

1.2方法

1.2.1CLSM檢測 CLSM儀（Viva1500系統(tǒng)，美國Lucid公司）。選擇典型皮損，取適當(dāng)體位，皮損部位涂少量蒸餾水，以B超潤滑劑為介質(zhì)，分別對每例患者進(jìn)行掃描。

1.2.2皮膚組織病理 選取進(jìn)行CLSM檢查的同一部位皮損，常規(guī)組織病理活檢后用HE染色，然后讀片。

2　結(jié)果

圖1　a：硬化萎縮苔蘚臨床圖片 b：白癜風(fēng)的臨床圖片

硬化萎縮性苔蘚組：8例患者組織病理均示（圖2a）：表皮變薄，表皮突減少或消失，真皮上部出現(xiàn)水腫，膠原均質(zhì)化，均質(zhì)化淺表真皮的下方，有不同程度的炎細(xì)胞浸潤。有5例顯示灶狀的基底細(xì)胞空泡化或基底細(xì)胞液化變性。有6例顯示黑素細(xì)胞缺失。CLSM掃描圖像中：有8例均顯示：棘層掃描厚度較周圍正常皮膚變?。ㄒ蚴菣M斷面掃描，圖像無法顯示），真皮淺層折光度增加（對應(yīng)膠原均質(zhì)化，圖2c），單一核細(xì)胞浸潤（對應(yīng)炎癥細(xì)胞浸潤）。有4例顯示：真表皮界線不清（基底細(xì)胞液化變性，圖2b），有6例顯示基底層環(huán)狀結(jié)構(gòu)消失（對應(yīng)黑素細(xì)胞缺失）。

白癜風(fēng)組：16例患者組織病理（圖3a）均顯示：基底層黑素細(xì)胞及黑素顆粒明顯減少乃至消失，免疫組織化學(xué)染色S-100陰性。圖像（圖3b）：16例均顯示有白斑區(qū)色素環(huán)完全缺失，或局部殘留。

圖2　a：硬化萎縮性苔蘚的組織病理：角化過度，表皮變薄，表皮突減少，基底層細(xì)胞液化變性，真皮上部出現(xiàn)水腫，膠原均質(zhì)化，均質(zhì)化淺表真皮的下方，有炎細(xì)胞浸潤（HE，×100） b：CLSM圖像：真表皮界限不清，散在單一核細(xì)胞浸潤 c：CLSM圖像：真皮淺層折光度增加，散在單一核細(xì)胞浸潤

圖3　a：白癜風(fēng)患者組織病理：基底層黑素細(xì)胞及黑素顆粒明顯缺失（HE，×200） b：白癜風(fēng)CLSM圖像：白斑區(qū)色素環(huán)完全缺失，或局部殘留 c：正常皮膚CLSM圖像：基底層色素環(huán)完整

3　討論

硬化萎縮性苔蘚主要發(fā)生在月經(jīng)前兒童或絕經(jīng)期女性，男女發(fā)病之比為1∶10，絕經(jīng)期女性約占所有病例的60%。6，7好發(fā)于外陰，可伴有女陰及肛周皮膚萎縮。男性常見于有包莖或包皮龜頭炎而未行包皮環(huán)切者，在包皮內(nèi)側(cè)、龜頭、尿道口、冠狀溝出現(xiàn)群集的瓷白色或象牙色的多角形丘疹或斑塊，羊皮紙樣外觀，損害可由于刺激而發(fā)生糜爛和皸裂，嚴(yán)重者可引起包皮不能上翻、龜頭粘連、甚至尿道口狹窄、偶有癌變者。硬化萎縮性苔蘚是一種動態(tài)變化的皮膚病，有多種組織學(xué)表現(xiàn)與臨床表現(xiàn)。在臨床工作中，臨床醫(yī)師對其認(rèn)識不足，有些病例缺乏病理診斷技術(shù)或經(jīng)驗等原因，容易將硬化萎縮性苔蘚與白癜風(fēng)相混淆。白癜風(fēng)多后天發(fā)生，可開始于任何年齡，或青年人多見，無明顯性別差異。可發(fā)生于任何部位，少數(shù)患者泛發(fā)全身。典型皮損為乳白色色素脫失斑，大小不等、數(shù)目不定、形態(tài)各異、中央可見散在的色素島。病理改變?yōu)楸砥ぶ泻谒丶?xì)胞及黑素顆粒明顯減少乃至消失。

CLSM是利用新一代反射模式的共聚焦激光顯微鏡原理，在計算機(jī)輔助下，對皮膚病變部位進(jìn)行掃描成像的新型診斷技術(shù)。CLSM具有8① 無創(chuàng)性，患者的依從性較高；②可實時動態(tài)地對皮損進(jìn)行檢測，成像迅速；③數(shù)據(jù)易于存儲和輸出；④可進(jìn)行光學(xué)斷層觀察，被形象地稱“細(xì)胞CT”，可實現(xiàn)立體三維重建；⑤可進(jìn)行定量觀察，提供顯微測量參數(shù)的優(yōu)點。其穿透力強(qiáng)，可獲得200～350μm深度細(xì)胞水平的活體皮膚圖像，可分析未經(jīng)脫水、固定、組織染色的活體樣本，能對皮膚的血管進(jìn)行三維分析，具有“無創(chuàng)、實時”的優(yōu)勢。這也是其在臨床應(yīng)用中的最大優(yōu)點，有別于傳統(tǒng)的皮膚組織病理檢查。目前已經(jīng)被廣泛用于皮膚科腫瘤性疾?。ɑ准?xì)胞癌、日光角化病、黑素細(xì)胞瘤等）、炎癥性疾病（銀屑病、接觸性皮炎等）以及色素性疾?。ò遵帮L(fēng)、無色素性痣、黃褐斑等）。本文對8例硬化萎縮性苔蘚患者的皮損分別進(jìn)行組織病理及共聚焦激光掃描檢查，并將兩種結(jié)果進(jìn)行對比，共聚焦激光掃描結(jié)果顯示：角質(zhì)層中可見較大的較高折光的無核角質(zhì)形成細(xì)胞、棘層的掃描厚度較周圍正常皮膚變薄、真皮淺層折光度增加、單一核細(xì)胞浸潤、真表皮界線不清、基底層環(huán)狀結(jié)構(gòu)消失，這與劉華緒等9研究圖譜中結(jié)果一致。16例的白癜風(fēng)患者共聚焦激光掃描檢查示：白斑區(qū)色素完全缺失，或局部殘留，這與意大利Ardigo等10對白癜風(fēng)的RCM評估一致。因此，利用CLSM技術(shù)可以很容易的將臨床難以區(qū)分的硬化萎縮性苔蘚與白癜風(fēng)區(qū)別。很大程度減輕了發(fā)生于外陰部位硬化萎縮性苔蘚及白癜風(fēng)患者因行皮膚活檢術(shù)帶來的痛苦。

CLSM作為一項新發(fā)展的技術(shù)，它的非侵入性檢查特點在皮膚科領(lǐng)域?qū)⒂袕V闊的應(yīng)用前景，CLSM正被廣泛的認(rèn)識和應(yīng)用，相信隨著這一技術(shù)的不斷完善和發(fā)展，必將促進(jìn)對某些難治性皮膚病病因、發(fā)病機(jī)制的研究，為診斷和治療提供新的有效的方法，推動皮膚科學(xué)的發(fā)展。

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9劉華緒，林燕，于世榮，等.反射式共聚焦顯微鏡皮膚病圖譜.人民衛(wèi)生出版社，2013.86-88.

10Ardigo M，Malizewsky I，Ortonne JP，et al.Preliminary evalution of vitiligo using in vivo reflectance confocalmicroscopy.J Eur Acad Dermatol Venereol，2007，21（10）：1344-1350.

（收稿：2014-12-13 修回：2015-03-14）

The role of confocal laser scanningm icroscopy in the identification of atrophic lichen sclerosis and vitiligo on vulva

ZOU Yun-min，WU Xiu-juan，KANG Xiao-jing，et al.People's Hospital of Xinjiang Uygur Autonomous Region，Urumchi，830001

Objective：To determine the value of confocal laser scanning microscopy in identification between atrophic lichen sclerosis and vitiligo on vulva.M ethods：The lesions from 8 patients with atrophic lichen sclerosis and 16 patientswith vitiligo on vulva were exam ined under confocal laser scanningmicroscopy，and then，the histopathologic examination of the lesionswas performed.Results：The image of atrophic lichen sclerosis lesions under CLSM showed that the thin epidermis，the obscured boundaries between derm is and epidermis，and the high diopter in the superficial layer of dermis and the infiltration ofmononuclear cells.All above was in accordance with the histopathologic features of atrophic lichen sclerosis.The image of vitiligo lesions under CLSM showed melanin was completely or partly absent，which was in accordance with the histopathologic features of vitiligo.Conclusion：CLSM is helpful in the differential diagnosis of atrophic lichen sclerosis and vitiligo.

vitiligo；atrophic lichen sclerosis；confocal laser scanningmicroscopy

新疆維吾爾自治區(qū)衛(wèi)生廳青年科技人才科研項目（編號：2014Y07）

新疆維吾爾自治區(qū)人民醫(yī)院，烏魯木齊，830001