尤亞輝　閆懷芝

（1 洛陽市孟津縣中醫(yī)院檢驗科，河南 洛陽 471100；2 洛陽市孟津縣人民醫(yī)院檢驗科，河南 洛陽 471100）

縣級醫(yī)院產(chǎn)廣譜β-內(nèi)酰胺酶大腸埃希菌的耐藥分析

尤亞輝1閆懷芝2

（1 洛陽市孟津縣中醫(yī)院檢驗科，河南 洛陽 471100；2 洛陽市孟津縣人民醫(yī)院檢驗科，河南 洛陽 471100）

目的 了解臨床上我院分離的大腸埃希菌產(chǎn)廣譜β-內(nèi)酰胺酶的情況，并對其耐藥性進(jìn)行分析，從而為臨床上抗菌藥物的合理使用提供科學(xué)的使用依據(jù)。方法 使用珠海黑馬半自動微生物鑒定敏分析儀對細(xì)菌進(jìn)行鑒定，而藥敏試驗使用K-B紙片擴(kuò)散法。結(jié)果 在2013年6月至2014年6月，我院共送檢600份臨床標(biāo)本，在其中共分離出大腸埃希菌150株，而其中共有40株能夠產(chǎn)廣譜β-內(nèi)酰胺酶?？倷z出率為26.67%（40/150）。產(chǎn)廣譜β-內(nèi)酰胺酶大腸埃希菌極度耐藥的抗生素為頭孢類抗生素包括頭孢唑啉、頭孢他啶，其耐藥率分別為100%和93.23%；對于復(fù)方新諾明、慶大霉素的耐藥性也較強(qiáng)，其耐藥率分別為86.11%和72.87%；對于阿米卡星、氨芐西林以及哌拉西林的耐藥性較弱，其耐藥率分別為51.23%、48.56%和34.21%；對于亞胺培南、頭孢哌酮/舒巴坦及左氧氟沙星和的耐藥性最弱，其耐藥率分別為0%、10.8%與21.2%。結(jié)論 目前，我院產(chǎn)廣譜β-內(nèi)酰胺酶的大腸埃希菌的陽性率比較高，已經(jīng)成為患者發(fā)生感染的主要病原菌，因此應(yīng)該以細(xì)菌耐藥性的監(jiān)測數(shù)據(jù)資料為根據(jù)，嚴(yán)格管理并加強(qiáng)臨床上抗菌藥物的合理使用，積極預(yù)防耐藥菌株的產(chǎn)生和醫(yī)院感染的暴發(fā)流行。

大腸埃希菌；產(chǎn)廣譜β-內(nèi)酰胺酶；耐藥性

作為臨床上一種比較常見的革蘭陰性致病菌，大腸埃希菌在臨床標(biāo)本中分離很高，而且該菌對于抗生素的耐藥性越來越嚴(yán)重。由于臨床上對于廣譜抗生素特別是第三代頭孢的廣泛應(yīng)用，致使臨床上產(chǎn)廣譜β-內(nèi)酰胺酶的細(xì)菌檢出率呈現(xiàn)逐年上升的趨勢［1］。廣譜β-內(nèi)酰胺酶是一種質(zhì)粒介導(dǎo)的酶類，具有此酶的細(xì)菌對β-內(nèi)酰胺類抗生素存在耐藥性，這是臨床上使用廣譜抗生素產(chǎn)生耐藥性的主要原因，也是臨床上抗生素治療效果不佳的根本，也有可能是發(fā)生醫(yī)院內(nèi)感染和耐藥菌株擴(kuò)散的原因［2］。為了了解臨床上我院分離的大腸埃希菌產(chǎn)廣譜β-內(nèi)酰胺酶的情況，并對其耐藥性進(jìn)行分析，從而為臨床上抗菌藥物的合理使用提供科學(xué)的使用依據(jù)，本文對我院2013年6月至2014年6月送檢600份臨床標(biāo)本進(jìn)行分離檢測?，F(xiàn)將其結(jié)果報道如下。

1　資料與方法

1.1標(biāo)本來源：為我院2013年6月至2014年6月送檢600份臨床標(biāo)本主要包括血液、痰液、胸腹水以及中段尿液和傷口分泌物等標(biāo)本，在其中共分離出大腸埃希菌150株。質(zhì)控菌株為大腸埃希菌ATCC25922購自上海伊華醫(yī)學(xué)科技有限公司。

1.2細(xì)菌鑒定：使用珠海黑馬半自動微生物鑒定藥敏分析儀對細(xì)菌進(jìn)行鑒定，并使用革蘭陰性菌鑒定板條。

1.3抗菌藥物紙片及M-H培養(yǎng)基：抗菌藥物紙片和培養(yǎng)基購自北京天壇藥品生物技術(shù)開發(fā)公司。M-H培養(yǎng)基中的水解酪蛋白干粉是從益陽生化試劑廠購自，而后由我科微生物室自行配制。

1.4方法

1.4.1藥敏試驗：根據(jù)第二版《全國臨床檢驗操作規(guī)程》［3］，采用K-B紙片擴(kuò)散法進(jìn)行。其具體操作如下：首先將待檢測的細(xì)菌配制成菌液，其濃度為0.5麥?zhǔn)蠁挝?，然后將菌液涂在M-H板上，并使其均勻分布。等待片刻待其干后，即可貼藥敏紙片，注意每兩個相鄰紙片間的中心應(yīng)相距約24 mm左右，而每個紙片的中心距離平皿的邊緣至少15 mm。嚴(yán)格按照美國國家臨床實驗室標(biāo)準(zhǔn)化委員會2000年制定標(biāo)準(zhǔn)對藥敏的結(jié)果進(jìn)行判定［4］。

1.4.2產(chǎn)廣譜β-內(nèi)酰胺酶的檢測：在進(jìn)行藥敏實驗時，將分離得到的大腸埃希菌按照上述標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行判定，其抑菌圈的標(biāo)準(zhǔn)如下：①頭孢噻肟鈉不高于27 mm；②頭孢他啶不高于22 mm；③氨曲南不高于27 mm；④頭孢曲松鈉不高于25 mm。滿足上述標(biāo)準(zhǔn)其中之一者，即可認(rèn)為疑似產(chǎn)廣譜β-內(nèi)酰胺酶的細(xì)菌。然后進(jìn)行下一步的確證實驗。

1.4.3確診實驗：將待檢測的菌液涂在M-H平皿上，并將頭孢他啶和頭孢他啶/克拉維酸紙片、頭孢噻肟鈉和頭孢噻肟/克拉維酸紙片貼在平皿上，并使其均勻分布。然后將上述平皿放在35 ℃環(huán)境中進(jìn)行培養(yǎng)，時間大約為16 h。結(jié)束后對抑菌圈的直徑進(jìn)行測定，如果發(fā)現(xiàn)有至少1對紙片的直徑差值不小于5 mm，即可確認(rèn)該菌為產(chǎn)廣譜β-內(nèi)酰胺酶的細(xì)菌。

2　結(jié)果與分析

在我院共送檢600份臨床標(biāo)本中，共分離出大腸埃希菌150株，而其中共有40株能夠產(chǎn)廣譜β-內(nèi)酰胺酶?？倷z出率為26.67%（40/150）。產(chǎn)廣譜β-內(nèi)酰胺酶大腸埃希菌極度耐藥的抗生素為頭孢類抗生素包括頭孢唑啉、頭孢他啶，其耐藥率分別為100%和93.23%；對于復(fù)方新諾明和慶大霉素的耐藥性也較強(qiáng)，其耐藥率分別為86.11%和72.87%；對于阿米卡星、氨芐西林以及哌拉西林的耐藥性較弱，其耐藥率分別為51.23%、48.56%和34.21%；對于亞胺培南、頭孢哌酮/舒巴坦及左氧氟沙星和的耐藥性最弱，其耐藥率分別為0%、10.8%與21.2%。見表1。

表1　產(chǎn)廣譜β-內(nèi)酰胺酶陽性和陰性大腸埃希菌對10種抗生素的耐藥情況

3　討 論

作為臨床上一種比較常見的致病原菌，大腸埃希菌可引起泌尿系統(tǒng)、呼吸系統(tǒng)以及傷口等多個系統(tǒng)和組織的感染，而其中最常見的耐藥菌是產(chǎn)廣譜β-內(nèi)酰胺酶的大腸埃希菌［5］。本文的研究結(jié)果表明，我院分離出的產(chǎn)廣譜β-內(nèi)酰胺酶的大腸埃希菌的陽性比較高。而且結(jié)果也顯示，產(chǎn)酶菌株對多種抗生素的耐藥率都比非產(chǎn)酶菌株要高，這些菌株已經(jīng)成為患者發(fā)生醫(yī)院內(nèi)感染的主要病原菌。因此，臨床以及實驗室應(yīng)該對此給予高度的重視，將開展廣譜β-內(nèi)酰胺酶的檢測納入到常規(guī)工作中來，同時也應(yīng)該根據(jù)以上細(xì)菌耐藥性的監(jiān)測數(shù)據(jù)資料，嚴(yán)格管理并加強(qiáng)臨床上抗菌藥物的合理使用，積極預(yù)防耐藥菌株的產(chǎn)生和醫(yī)院感染的暴發(fā)流行。

［1］張繼紅.縣級醫(yī)院肺炎克雷伯氏菌感染的耐藥性調(diào)查分析［J］.中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2008，18（10）:1452-1453.

［2］陳子松，喻長法，鄭英姿.產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶大腸埃希氏菌與肺炎克雷伯氏菌的檢測及耐藥性分析［J］.中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2009，19（8）:998-999.

［3］陳浙涌.超廣譜β-內(nèi)酰胺酶肺炎克雷伯氏菌的耐藥性分析［J］.中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2008，18（9）:1326-1327.

［4］章清，魏麗，魏光美，等.大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌的耐藥性變遷［J］.中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2004，14（2）:220-222.

［5］潘曉龍，周曉東，吳祥鏡，等.產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶大腸埃希菌表型及基因型的研究［J］.檢驗醫(yī)學(xué)，2005，20（5）:462-416.

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1671-8194（2015）20-0065-02