孫紅艷等

摘要[目的]在現(xiàn)有方法的基礎(chǔ)上，優(yōu)化前處理方法，總結(jié)出一套更合理的農(nóng)藥殘留檢測方法。[方法]采用液相色譜法檢測，對旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)法、氮吹法、水浴法3種濃縮方法，2種提取液體積和4種洗脫液體積回收率進行比較。[結(jié)果]上機條件相同的情況下，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)法、氮吹法、水浴法3種方法回收率水平無明顯差異；2種提取液體積和4種洗脫液體積試驗結(jié)果表明回收率水平無明顯差異。[結(jié)論]綜合成本、時間、準(zhǔn)確度等幾方面因素，以5 ml提取液水浴法濃縮，6 ml淋洗液淋洗為最佳。

關(guān)鍵詞安捷倫快速液相；農(nóng)藥殘留；前處理方法優(yōu)化

中圖分類號S481+.8文獻標(biāo)識碼A文章編號0517-6611（2015）21-119-02

筆者在2011年對安捷倫快速液相檢測蔬菜水果中7種農(nóng)藥殘留的上機方法進行了優(yōu)化，在近年的應(yīng)用中發(fā)現(xiàn)前處理方法還有很大的優(yōu)化空間，為此，筆者對旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)法、氮吹法、水浴法3種濃縮方法，不同提取液和淋洗液體積的回收率進行了試驗比較，以期總結(jié)出一套更合理的農(nóng)藥殘留檢測方法。

1材料與方法

1.1材料

1.1.1試驗材料。試驗所用樣品為從水果、食用菌、葉菜、莖菜和茄果類五大類果蔬中各選取1種，樣品分別為蘋果、平菇、油麥菜、芹菜、番茄。從超市購買樣品，重量約3 kg。

1.1.2標(biāo)準(zhǔn)溶液。100 mg/L的吡蟲啉、啶蟲脒、多菌靈、除蟲脲、滅幼脲、辛硫磷、阿維菌素單一標(biāo)準(zhǔn)溶液均由農(nóng)業(yè)部環(huán)境保護科研監(jiān)測所提供；美國Agilent固相萃取氨基柱，容積6 ml，填充物500 mg；乙腈、甲醇、二氯甲烷為色譜純，均為迪馬科技有限公司產(chǎn)品。

1.1.3試劑。去離子水采用密理博實驗室臺式超純化水機制備；0.22 μm有機系濾膜。

1.1.4主要儀器。

1200SL型快速液相色譜儀系統(tǒng)，包含二極管檢測器、二元梯度泵、自動進樣器、在線脫氣機和恒溫柱溫箱，為美國Agilent公司產(chǎn)品；ZORBAX Eclipse plus C18色譜柱，Narrow Bore RR 2.1×150 mm，3.5Micron（美國Agilent公司）。

1.2色譜條件

色譜柱：C18色譜柱；二極管檢測器：時間為0、2.6、10.0、13.8、16.0 min時，波長依次為270、245、254、280、245 nm。

流動相：組成及梯度變化見表1；

流速為0.5 ml/min；

進樣量為5 μl；

柱溫為40 ℃。

采用外標(biāo)法峰面積定量。

1.3方法

1.3.1樣品制備。通過四分法取不少于1 000.00 g的樣品，將可食部分切碎，充分混勻放入食物調(diào)理機粉碎，制成待測樣。

1.3.2不同濃縮方法試驗。

1.3.2.1樣品前處理。

每個樣品用150 ml燒杯稱取3000 g各3份，其中1份作為空白對照，另外2份作為添加平行，添加量為0.5 mg/kg。分別加入60.0 ml乙腈，高速勻漿2 min，然后過濾，濾液收集到預(yù)先裝有140 ℃烘烤4 h的10.00 g氯化鈉的100 ml具塞量筒中，劇烈振蕩1 min，在室溫下靜置分層30 min。

前處理過程中提取方法一致，濃縮方法不同，從100 ml具塞量筒中吸取10.0 ml乙腈相溶液，分別用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)法、水浴法、氮吹法蒸發(fā)至近干（均為50 ℃）；加入2.0 ml甲醇+二氯甲烷（5+95）的混合液溶解殘渣，待凈化。

1.3.2.2凈化。將氨基柱分別用4.0 ml甲醇+二氯甲烷（5+95）的混合液預(yù)洗，當(dāng)預(yù)洗溶劑液面到達柱吸附層表面時，立即加入樣品溶解液，用25 ml比色管收集洗脫液，用4.0 ml甲醇+二氯甲烷（5+95）洗滌燒杯后過柱，并重復(fù)1次。將比色管置于氮吹儀上，水浴溫度為50 ℃，氮吹蒸發(fā)至近干，分別用5.0 ml甲醇+水（3+2）的混合液溶解。在混合器上混勻后，用0.45 μm有機濾膜過濾，待測。

1.3.2.3上機測定。上機測定時3個處理儀器條件均一致。試驗重復(fù)3次。

1.3.32種提取液體積和4種洗脫液體積比較試驗。

樣品前處理參照“1.3.2.1”，其中濃縮采用水浴法。提取液吸取體積和洗脫液體積試驗設(shè)計見表2。上機測定時儀器條件均一致。試驗重復(fù)3次。

2結(jié)果與分析

2.1不同濃縮方法比較

2.1.1準(zhǔn)確度比較。

按加標(biāo)回收率=（加樣后總測定量-加樣前測定量）/理論加樣量×100%計算，以其反映方法的準(zhǔn)確度。5個樣品不同參數(shù)的平均加標(biāo)回收率結(jié)果（表3）表明，3種濃縮方法的加標(biāo)回收率都符合檢測要求（80%～110%）。

方差分析（可重復(fù)雙因素分析）表明，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)法、水浴法、氮吹法3種濃縮方法對添加相同濃度（0.5 mg/kg）混合標(biāo)準(zhǔn)品的樣品進行前處理，在上機條件相同的情況下，3種方法回收率無明顯差異，均滿足同時測定7種農(nóng)藥殘留分析要求。

2.1.2精密度比較。

計算3種濃縮方法5個樣品之間的回收率相對標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD），以其反映方法的精密度。由表4可知，3種濃縮方法的RSD分別為2.01%～9.83%、2.24%～8.94%、2.30%～9.48%。從7種農(nóng)藥3個濃縮處理方法的RSD總體比較分析可見，處理2即水浴法相對較好。

2.1.3花費時間和花費成本比較。

通過對3 種濃縮處理方法消耗時間進行比較發(fā)現(xiàn)，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)法需2～4

min，水浴法需35 min左右，氮吹法需40 min以上。在樣品

較少的情況下，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)法效率較高；樣品較多時，因水浴法

可一次性處理幾十個樣品，極大地節(jié)約時間，所以選擇水浴法為佳；而氮吹法雖然也可一次性處理多個樣品，但其耗時長且成本高，所以不建議采用。同時在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀、水浴鍋、氮吹儀3種試驗設(shè)備中，水浴鍋成本較低且常用。因此，在做大批量樣品時，對于一般實驗室而言，水浴法比較有優(yōu)勢。

2.22種提取液體積和4種洗脫液體積比較

可重復(fù)雙因素分析結(jié)果表明，

3次重復(fù)試驗7個參數(shù)樣本F值均遠小于 F crit值，表明數(shù)據(jù)無明顯差異。因此，綜合考慮效率、成本等因素，不同提取液體積和洗脫體積的4個組合中，以吸取提取液體積5 ml濃縮、洗脫液洗脫體積6 ml為最佳。

3結(jié)論

以現(xiàn)有方法同時測定吡蟲啉、啶蟲脒、多菌靈、除蟲脲、滅幼脲、辛硫磷、阿維菌素7種農(nóng)藥殘留時，前處理中濃縮采用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)法、氮吹法、水浴法的準(zhǔn)確度和精密度均符合農(nóng)藥多殘留檢測的技術(shù)要求。但從時間、成本、操作等方面綜合考慮，在樣品量較大的情況下采用恒溫水浴法處理最好；提取液吸取體積以5 ml，洗脫液洗脫體積以6 ml為最佳。

參考文獻

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