段曉芳

摘要：目的： 探討臨床免疫檢驗(yàn)的影響因素及相關(guān)控制措施。方法： 選取我院收治的患者96例作為研究對(duì)象，按照免疫檢驗(yàn)控制方法劃分，對(duì)照組46例患者采用常規(guī)免疫檢驗(yàn)，觀(guān)察組50例從標(biāo)本采集到檢測(cè)全程均采用嚴(yán)格監(jiān)控措施，對(duì)比兩組患者免疫檢驗(yàn)假陽(yáng)性檢出率。結(jié)果： 觀(guān)察組假陽(yáng)性檢出率為6.0%，顯著低于對(duì)照組28.3%，對(duì)比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0. 05）。結(jié)論 ：有諸多因素會(huì)影響臨床免疫檢驗(yàn)結(jié)果，因此一定要控制好檢驗(yàn)室溫濕度，選擇高質(zhì)量?jī)x器與試劑，提升檢驗(yàn)人員水平，避免影響檢驗(yàn)結(jié)果。

關(guān)鍵詞：免疫檢驗(yàn)；影響原因；措施

臨床免疫檢驗(yàn)范圍較大，包括放射免疫檢驗(yàn)、免疫原制備、抗血清制備、酶免疫檢驗(yàn)、化學(xué)發(fā)光免疫檢驗(yàn)以及抗原抗體反應(yīng)等[1]。臨床醫(yī)師在對(duì)疾病種類(lèi)進(jìn)行判斷并選擇最佳治療方法時(shí)多將檢驗(yàn)結(jié)果作為主要依據(jù)，因此疾病治療療效在很大程度上受到免疫檢驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確性的影響，故此一定要保證免疫檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。然而，臨床免疫檢驗(yàn)工作影響因素較多，因此對(duì)其檢驗(yàn)質(zhì)量進(jìn)行控制的關(guān)鍵在于做好免疫檢驗(yàn)前的質(zhì)量控制工作。本文為探討臨床免疫檢驗(yàn)的主要影響因素并采取針對(duì)性預(yù)防措施，現(xiàn)選取患者96例作為研究對(duì)象，對(duì)其臨床資料進(jìn)行回顧性分析，報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取我院2013年3月至2014年3月收治的患者96例作為研究對(duì)象，對(duì)其臨床資料進(jìn)行回顧性分析。按照免疫檢驗(yàn)控制方法劃分，對(duì)照組46例患者采用常規(guī)的免疫檢驗(yàn)，觀(guān)察組50例從標(biāo)本采集到檢測(cè)全程均采用嚴(yán)格監(jiān)控措施。對(duì)照組患者中男性27例，女性19例；年齡為36至71歲，平均（53.6±6.2）歲。觀(guān)察組患者中男性29例，女性21例；年齡為35至70歲，平均（52.8±5.8）歲。

1.2 一般方法

對(duì)照組采用常規(guī)免疫檢驗(yàn)，觀(guān)察組從標(biāo)本采集到檢測(cè)全程均采用嚴(yán)格監(jiān)控措施，具體如下：

1.2.1 免疫檢驗(yàn)前監(jiān)控措施 標(biāo)本質(zhì)量得以保證是采集標(biāo)本的前提，與此同時(shí)還要將標(biāo)本采集時(shí)間、止血帶使用方式以及采血姿勢(shì)等全方位考慮進(jìn)來(lái)。若患者口服過(guò)激素類(lèi)藥物，在采集其血液標(biāo)本時(shí)應(yīng)高度關(guān)注患者體位變化以及采集時(shí)間，防止出現(xiàn)生長(zhǎng)激素、促卵泡激素以及促黃體激素的激素峰值。同時(shí)在保存標(biāo)本時(shí)要按照標(biāo)本特性進(jìn)行分類(lèi)，比如對(duì)于熱敏感標(biāo)本在送檢之前需要冰凍，心鈉素或者血栓素等在檢測(cè)之前需要添加抗凝劑。在開(kāi)始免疫檢驗(yàn)前需對(duì)酶標(biāo)儀、比濁儀、水浴箱、恒溫箱、分光光度計(jì)以及溫度計(jì)等行校正與核對(duì)，同時(shí)還要對(duì)反應(yīng)板、吸量管、微量加樣器以及稀釋棒進(jìn)行定期檢查，最大程度降低實(shí)驗(yàn)誤差，此外對(duì)于免疫檢驗(yàn)儀器應(yīng)防止對(duì)制造商予以頻繁更換。

1.2.2 免疫檢驗(yàn)中監(jiān)控措施 主要采用EQA（室間質(zhì)量評(píng)價(jià)），每個(gè)季度按照相關(guān)要求對(duì)臨檢中心與衛(wèi)生部下發(fā)的標(biāo)本予以嚴(yán)格檢驗(yàn)。應(yīng)用IQC（室內(nèi)質(zhì)量控制）：在檢測(cè)艾滋病、乙型肝炎、丙型肝炎以及甲型肝炎等患者時(shí)推薦第三代夾心法酶免試劑盒，在選取試劑時(shí)應(yīng)注重其保存條件、有效期等。最好固定廠(chǎng)家，避免頻繁更換。醫(yī)院在選擇自行配置的試劑時(shí)應(yīng)確保其配置過(guò)程的嚴(yán)格性，且經(jīng)過(guò)鑒定顯示合格后才能夠使用。

1.2.3 臨床免疫檢驗(yàn)后監(jiān)控措施 初檢全部樣本，同時(shí)檢驗(yàn)人員還要審查初檢結(jié)果，對(duì)可疑樣本或者結(jié)果為陽(yáng)性樣本需復(fù)檢，且每次都對(duì)血清采用室內(nèi)質(zhì)量控制。同時(shí)檢驗(yàn)室還要對(duì)標(biāo)本予以保留，認(rèn)真記錄，便于后期查詢(xún)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

應(yīng)用軟件SPSS21.0對(duì)所有數(shù)據(jù)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，若P<0.05代表差異存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

3 討論

3.1 臨床免疫檢驗(yàn)影響因素

3.1.1 內(nèi)源性感染因素 包括異嗜性抗體、濃度較高的非特異性免疫球蛋白、類(lèi)風(fēng)濕因子、部分自身抗體。補(bǔ)體以及交叉反應(yīng)物質(zhì)等均屬于免疫檢查的內(nèi)源性干擾因素。一般而言臨床血清標(biāo)本中均存有程度不一的內(nèi)源性干擾因素，進(jìn)而會(huì)導(dǎo)致結(jié)果產(chǎn)生假陽(yáng)性現(xiàn)象。在本研究中觀(guān)察組假陽(yáng)性檢出率為6.0%，對(duì)照組為28.3%，對(duì)比差異明顯（P<0.05）。為避免行ELISA檢驗(yàn)時(shí)受到類(lèi)風(fēng)濕因子干擾，需對(duì)血清標(biāo)本予以稀釋?zhuān)畲笙薅冉档头翘禺愋灶?lèi)風(fēng)濕因子濃度，進(jìn)而將ELISA測(cè)定遭受的類(lèi)風(fēng)濕因子干擾程度降至最低，以提升檢驗(yàn)結(jié)果的有效性與精準(zhǔn)度。此外，還可對(duì)酶標(biāo)抗體進(jìn)行改變，首先用變性IgG對(duì)類(lèi)風(fēng)濕因子進(jìn)行封閉，再檢測(cè)抗原，亦可添加LgY（特異性雞蛋黃抗體）或者還原劑至標(biāo)本中[2]，降解類(lèi)風(fēng)濕因子，將干擾充分消除。

3.1.2 外源性感染因素 在免疫檢驗(yàn)中外源性影響因素包括溫度、洗液更換、實(shí)驗(yàn)員素質(zhì)、標(biāo)本質(zhì)量以及試劑平衡時(shí)間等。在免疫學(xué)檢驗(yàn)中多為血液類(lèi)標(biāo)本，除血液標(biāo)本外還有腦脊液、大小便等標(biāo)本，其標(biāo)本質(zhì)量會(huì)受到采集時(shí)間、過(guò)程以及方法的影響，比如在采集血漿時(shí)患者姿勢(shì)一定要正確，同時(shí)還要觀(guān)察是否需要應(yīng)用添加劑等。此外標(biāo)本放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)、溶血、凝固不全以及遭受細(xì)菌污染等都會(huì)影響檢驗(yàn)結(jié)果，因此要想確保檢驗(yàn)質(zhì)量就一定要避免標(biāo)本出現(xiàn)溶血現(xiàn)象。而采血會(huì)受到不良習(xí)慣及劣質(zhì)采血器具影響等會(huì)導(dǎo)致標(biāo)本溶血。因?yàn)檠t素基團(tuán)存在于血紅蛋白中，故而其性質(zhì)與過(guò)氧化物相似，在ELLSA（酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)）中主要將HPR（辣根過(guò)氧化物酶）當(dāng)做標(biāo)記酶，在該實(shí)驗(yàn)中若血清有較高的血紅蛋白濃度，就會(huì)在溫育時(shí)吸附固定相，而后顯色于HRP底物，對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果造成干擾。且在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中使用電化學(xué)發(fā)生免疫分析法對(duì)NSE（神經(jīng)特異性酸純化酶）予以檢測(cè)時(shí)若發(fā)生溶血現(xiàn)象其影響較為明顯。當(dāng)溶血在1g/L Hb標(biāo)準(zhǔn)時(shí)會(huì)明顯提升NSE檢測(cè)結(jié)果，且血紅蛋白提升水平與NSE檢測(cè)結(jié)果的影響為正相關(guān)關(guān)系。一般而言，血紅蛋白提升1g/LNSE檢測(cè)結(jié)果會(huì)上升25mg/ml左右[3]，因此一旦出現(xiàn)溶血現(xiàn)象需重新采血，避免檢驗(yàn)結(jié)果受到誤差影響。此外，檢驗(yàn)設(shè)備、試劑與檢驗(yàn)人員等均會(huì)影響檢驗(yàn)結(jié)果。一定要定期校正與檢查儀器設(shè)備，確保使用時(shí)具有高精密度。檢驗(yàn)人員參與檢驗(yàn)全程，因此其專(zhuān)業(yè)水平、操作熟練度以及工作態(tài)度等均會(huì)對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生影響。

3.2 相關(guān)措施

①在孵箱中放置酶標(biāo)板時(shí)溫度為25℃或者4℃，其時(shí)間顯示差在10min左右，且若實(shí)驗(yàn)室濕度在40%以下則會(huì)受到靜電影響，帶電微粒會(huì)吸附于塑料器皿上，污染標(biāo)本。因此應(yīng)控制好實(shí)驗(yàn)室溫濕度，溫度最好在18至25℃，濕度最好在30%至60%范圍中。②采集標(biāo)本時(shí)方法應(yīng)正確，在恰當(dāng)時(shí)間采集，再應(yīng)用抗凝劑或者穩(wěn)定劑。若檢驗(yàn)患者生長(zhǎng)激素需陣發(fā)性釋放激素，并告知患者相關(guān)注意事項(xiàng)，在血液采集前14d科學(xué)飲食與規(guī)律作息，前3天應(yīng)避免食用高脂肪食物，前1d避免攝取酒精，前12至16h應(yīng)確保處于空腹?fàn)顟B(tài)。標(biāo)本采集時(shí)間最好為清晨，患者坐位或者平臥時(shí)采集，止血帶時(shí)間應(yīng)在1min以?xún)?nèi)。③選取采血器物時(shí)應(yīng)注重其質(zhì)量，避免使用劣質(zhì)品。在選用試劑時(shí)應(yīng)選擇相同生產(chǎn)廠(chǎng)家同批次產(chǎn)品，在檢驗(yàn)過(guò)程中要按照要求操作試劑，使用后于專(zhuān)用冰箱中放置。若較長(zhǎng)時(shí)間沒(méi)使用則要先測(cè)試其特性，及時(shí)更換不合格試劑，避免影響檢驗(yàn)結(jié)果。④檢驗(yàn)完成后倒出洗液并用蒸餾水清洗，強(qiáng)化檢驗(yàn)人員素質(zhì)，防止不良習(xí)慣。

綜上所述，有諸多因素會(huì)影響臨床免疫檢驗(yàn)結(jié)果，因此一定要控制好檢驗(yàn)室溫濕度，選擇高質(zhì)量?jī)x器與試劑，提升檢驗(yàn)人員水平，避免影響檢驗(yàn)結(jié)果。

參考文獻(xiàn)：

[1]陶小美.臨床免疫檢驗(yàn)影響因素及對(duì)策分析[J].大家健康（下旬版），2014，（2）：64-64.

[2]梁輝.臨床免疫檢驗(yàn)質(zhì)量的影響因素及控制措施研究[J].中外醫(yī)學(xué)研究，2014，（7）：145-145，146.

[3]胡偉.控制臨床免疫檢驗(yàn)質(zhì)量的方法及措施分析[J].醫(yī)藥前沿，2014，（20）：382-382.