康文彪 宋建國(guó) 周峰 薛喜娟 張莉 康新華

摘 要：了解規(guī)?；i場(chǎng)PR野毒感染狀況和免疫效果，為規(guī)?；i場(chǎng)偽狂犬病控制和凈化提供科學(xué)依據(jù)。采用阻斷ELISA方法，對(duì)采自11個(gè)規(guī)模場(chǎng)戶(hù)的379份血清進(jìn)行PR-gE野毒抗體檢測(cè)，對(duì)其中的195份血清進(jìn)行PR-gB抗體檢測(cè)。被調(diào)查的11個(gè)規(guī)模場(chǎng)中有6個(gè)規(guī)模場(chǎng)PR-gE抗體為陽(yáng)性，群體陽(yáng)性率為54.55 %，個(gè)體陽(yáng)性率54.09 %。陽(yáng)性率公豬為58.33 %、母豬為83.44 %，仔豬為5.08 %、育肥豬為39.10 %；PR-gB抗體陽(yáng)性率公豬為100 %、母豬為100 %，仔豬為73.33 %。甘肅省規(guī)模豬場(chǎng)PR-gE抗體的群體陽(yáng)性率和個(gè)體陽(yáng)性率處于較高水平；免疫豬群的高PR-gE抗體陽(yáng)性率是值得重視的問(wèn)題；甘肅省豬偽狂犬病上升勢(shì)頭明顯。

關(guān)鍵詞：PR；gE抗體；gB抗體；阻斷ELISA

中圖分類(lèi)號(hào)：S855.3 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：1001-0769（2015）11-0050-03

豬偽狂犬?。≒seudorabies，PR）是由偽狂犬病病毒（Pseudorabies Virus，PRV）引起的一種高度接觸性傳染病。種豬主要表現(xiàn)為繁殖障礙：母豬產(chǎn)死胎、木乃伊胎和流產(chǎn)，對(duì)仔豬危害最嚴(yán)重，死亡率可達(dá)100 %；成年豬多為隱性感染。PRV感染會(huì)引起機(jī)體免疫抑制，而且豬體可長(zhǎng)期帶毒和排毒，容易并發(fā)感染其他疫病。2001年，我省首次發(fā)現(xiàn)了本病，感染陽(yáng)性率為39.06 %[1]，2006年感染陽(yáng)性率為15.28 %，免疫抗體陽(yáng)性率為60.70 %[2]，2007年免疫抗體陽(yáng)性率為63.52 %[3]。為了解當(dāng)前甘肅省規(guī)模養(yǎng)豬場(chǎng)豬PR感染情況，我們選擇中小規(guī)模養(yǎng)豬比較集中地區(qū)的11個(gè)養(yǎng)殖場(chǎng)進(jìn)行了感染抗體檢測(cè)，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下：

1 材料與方法

1.1 樣品采集

隨機(jī)選擇全省9個(gè)市州的11個(gè)規(guī)模場(chǎng)戶(hù)采集并分離血清。共采集血清379份，其中公豬24份、母豬163份、仔豬59份、育肥豬133份。

1.2 檢測(cè)方法與結(jié)果判定

1.2.1 阻斷ELISA

按試劑說(shuō)明書(shū)操作。

1.2.2 結(jié)果判定

陰性對(duì)照平均OD630nm—陽(yáng)性對(duì)照平均OD630nm≥0.3（gB為0.4）時(shí)試驗(yàn)成立，計(jì)算S/N值。其中：S=樣品孔OD630nm值，N=陰性對(duì)照平均OD630nm值。

1.2.2.1 PR-gE抗體

當(dāng)S/N≤0.35，判定為陽(yáng)性；0.350.4，判為陰性。

1.2.2.2 PR-gB抗體

當(dāng)S/N≤0.6，判定為陽(yáng)性；0.60.7，判為陰性。

1.3 試劑來(lái)源

ELISA試劑盒購(gòu)自武漢科前動(dòng)物生物制品有限責(zé)任公司，批號(hào)：PR-gE抗體：20140813、150301；PR-gB抗體：150101、150403。

2 檢測(cè)結(jié)果與分析

2.1 PR-gE抗體檢測(cè)

對(duì)采自11個(gè)規(guī)模養(yǎng)豬場(chǎng)的378份血清進(jìn)行PR-gE抗體檢測(cè)，11個(gè)場(chǎng)中6個(gè)場(chǎng)檢出PR-gE抗體豬，群體陽(yáng)性率為54.55 %；檢出PR-gE抗體陽(yáng)性血清205份，個(gè)體陽(yáng)性率54.09 %。其中7個(gè)育肥豬群中有4個(gè)育肥豬群PR-gE抗體為陽(yáng)性，群體陽(yáng)性率為57.14 %，個(gè)體陽(yáng)性率為39.10 %；2個(gè)仔豬群中有1個(gè)仔豬群PR-gE抗體為陽(yáng)性，群體陽(yáng)性率50 %，個(gè)體陽(yáng)性率為 5.08 %；2個(gè)公豬群中有1個(gè)公豬群PR-gE抗體為陽(yáng)性，群體陽(yáng)性率50 %，個(gè)體陽(yáng)性率為58.33 %；3個(gè)母豬群有兩個(gè)群PR-gE抗體為陽(yáng)性，群體陽(yáng)性率66.67 %，個(gè)體陽(yáng)性率為80.21 %（150/187）；各場(chǎng)結(jié)果見(jiàn)表1。

2.2 PR-gB抗體檢測(cè)

共對(duì)2個(gè)大型規(guī)模場(chǎng)的195份血清進(jìn)行了PR-gB抗體檢測(cè)。陽(yáng)性份數(shù)187份，陽(yáng)性率為95.90 %。各場(chǎng)結(jié)果詳見(jiàn)表2。

3 小結(jié)與討論

3.1 群體和個(gè)體陽(yáng)性率

甘肅省規(guī)模豬場(chǎng)PR-gE抗體的群體陽(yáng)性率和個(gè)體陽(yáng)性率處于較高水平。本次調(diào)查結(jié)果表明，11個(gè)場(chǎng)的群體陽(yáng)性率為54.55 %，個(gè)體陽(yáng)性率為54.09 %；而江西省規(guī)模種豬場(chǎng)的PR-gE抗體群體陽(yáng)性率為40.00 %[4]。本次調(diào)查中育肥豬群群體陽(yáng)性率為57.14 %，個(gè)體陽(yáng)性率為39.10 %；而川渝地區(qū)育肥豬的PR-gE抗體個(gè)體陽(yáng)性率為18.11 %[5]。本次調(diào)查中種豬的群體陽(yáng)性率為60.00 %，個(gè)體陽(yáng)性率為90.91 %（150/165），而福建省的種豬個(gè)體陽(yáng)性率為19.39 %[6]。

3.2 免疫豬群PR抗體陽(yáng)性率

免疫豬群的高PR-gE抗體陽(yáng)性率是值得重視的問(wèn)題。本次調(diào)查中，對(duì)兩個(gè)規(guī)模場(chǎng)的195份樣品同時(shí)進(jìn)行了PR-gB和PR-gE抗體檢測(cè)，結(jié)果PR-gB抗體陽(yáng)性187份，陽(yáng)性率為95.90 %；PR-gE抗體陽(yáng)性153份，陽(yáng)性率為78.46 %。說(shuō)明在免疫抗體水平很高的情況下，豬群仍然存在高感染抗體的現(xiàn)象，這種現(xiàn)象在豬偽狂犬病的防控中應(yīng)當(dāng)引起高度重視。

3.3 甘肅省豬偽狂犬病發(fā)病趨勢(shì)

甘肅省的豬偽狂犬病上升勢(shì)頭明顯。本次對(duì)11個(gè)規(guī)模養(yǎng)豬場(chǎng)的379份血清進(jìn)行PR-gE抗體檢測(cè)，個(gè)體陽(yáng)性率為54.09 %。2001年我省對(duì)39個(gè)養(yǎng)豬場(chǎng)的調(diào)查結(jié)果表明，個(gè)體陽(yáng)性率為39.06 %[1]；2006年的調(diào)查結(jié)果為個(gè)體陽(yáng)性率15.28 %[2]；2011年的調(diào)查結(jié)果為18.4 %[3]。

4 防控建議

4.1 陽(yáng)性場(chǎng)

陽(yáng)性場(chǎng)應(yīng)定時(shí)監(jiān)測(cè)gE和gB抗體，特別是對(duì)母源抗體快要消失的后備豬。根據(jù)豬場(chǎng)血清學(xué)檢測(cè)結(jié)果，結(jié)合臨床實(shí)際情況，制定適合本場(chǎng)豬群的免疫程序和綜合控制（凈化）方案施，盡力遏制場(chǎng)內(nèi)偽狂犬病的流行。

4.2 疫苗與器械的選擇

選用優(yōu)質(zhì)gE基因缺失疫苗強(qiáng)化后備豬免疫，注重后備豬的選擇，加強(qiáng)定期監(jiān)測(cè)工作。仔豬采用滴鼻免疫方式，以建立牢固的局部粘膜免疫和早期的主動(dòng)免疫力，有效預(yù)防野毒的潛伏感染和杜絕母源抗體的干擾。滴鼻免疫建議采用專(zhuān)用的滴鼻器，將疫苗液滴噴成均勻的霧狀，以利于疫苗的吸收。

4.3 建議使用的免疫方案

陽(yáng)性豬場(chǎng)對(duì)仔豬采取如下方法進(jìn)行免疫：0日齡滴鼻免疫1次，30日齡和70日齡各進(jìn)行肌肉注射免疫1次。12～13周齡及配種前1個(gè)月再各免疫1次。

陰性豬場(chǎng)種豬可采用一年3次普免，仔豬8～9周齡和11～12周齡各免疫1次，后備豬在配種前間隔1個(gè)月免疫2次，末次在配種前1個(gè)月進(jìn)行。

4.4 新引進(jìn)種豬

新引進(jìn)種豬必須進(jìn)行偽狂犬病檢疫，并隔離飼養(yǎng)。 2個(gè)月后抽血樣檢查，抗體或野毒感染抗體為陰性者方可與本場(chǎng)其他豬混群飼養(yǎng)；所有豬群每半年應(yīng)作一次血清學(xué)鑒別檢查，嚴(yán)格隔離檢測(cè)出的野毒感染陽(yáng)性豬，并將其淘汰不作種豬用或進(jìn)行撲殺；健康豬場(chǎng)每3個(gè)月應(yīng)進(jìn)行1次血清學(xué)抽查，抽檢母豬數(shù)量不得少于25 %。檢測(cè)發(fā)現(xiàn)的陽(yáng)性豬立即淘汰，同時(shí)免疫陰性豬，并加強(qiáng)監(jiān)測(cè)。

參考文獻(xiàn)：（6篇，略）