吳燕等
摘要:采用表面增強(qiáng)拉曼光譜方法(surface-enhanced Raman spectroscopy,SERS)結(jié)合快速溶劑提取前處理方法快速檢測(cè)茶葉中多菌靈農(nóng)藥殘留。以表面增強(qiáng)試劑為基底,采集不同濃度多菌靈溶液的表面增強(qiáng)拉曼信號(hào);以表面增強(qiáng)試劑為基底,采集以茶葉提取液為基質(zhì)的不同濃度多菌靈溶液表面增強(qiáng)拉曼信號(hào)。結(jié)果表明:630、730、1 004、1 221、1 262、1 368、1 462、1 528 cm-1處的拉曼信號(hào)較強(qiáng),可作為多菌靈農(nóng)藥的特征峰;采用SERS方法檢測(cè)干茶中多菌靈農(nóng)藥的最低檢測(cè)濃度為2 mg/L,滿足國(guó)標(biāo)檢測(cè)茶葉的要求;選用630 cm-1處的峰強(qiáng)度與多菌靈濃度制定標(biāo)準(zhǔn)曲線,在2~50 mg/L具有良好的線性關(guān)系,線性方程為y=15.731x+1 151.9,r2=0.980 2;回收率為86.84%~9240%,相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差均小于5%,說(shuō)明本方法有良好的重現(xiàn)率。
關(guān)鍵詞:農(nóng)藥殘留;多菌靈;表面增強(qiáng)拉曼光譜方法;茶葉;快速檢測(cè);回收率;RSD
中圖分類號(hào): TQ450.2+63文獻(xiàn)標(biāo)志碼: A文章編號(hào):1002-1302(2015)09-0338-02
多菌靈是一種廣譜殺菌劑,廣泛用于農(nóng)作物病害的防治。其化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定,半衰期長(zhǎng),進(jìn)入人體后,會(huì)引起精神恍惚、頭昏等中毒癥狀,影響消費(fèi)者的健康[1-2]。目前,農(nóng)藥殘留常規(guī)檢測(cè)方法有高效液相色譜法(HPLC)、液-質(zhì)聯(lián)用法等[3-4],這些方法存在前處理過(guò)程復(fù)雜、成本高、檢測(cè)時(shí)間長(zhǎng)等缺陷。激光拉曼光譜能得到物質(zhì)分子振動(dòng)、轉(zhuǎn)動(dòng)的信息,拉曼峰位置表明物質(zhì)的某種基團(tuán)存在,可用于作為有關(guān)試樣定性分析的手段。SERS可以對(duì)微量樣品快速檢測(cè),操作簡(jiǎn)便,已經(jīng)應(yīng)用于農(nóng)產(chǎn)品農(nóng)藥殘留的快速檢測(cè)[5-6]。李曉舟等[7]、張萍等[8]利用SERS建立了食品中農(nóng)藥殘留物質(zhì)的檢測(cè)方法。本研究以表面增強(qiáng)試劑為基底,利用SERS技術(shù)對(duì)茶葉中多菌靈農(nóng)藥殘留進(jìn)行定性定量分析。
1材料與方法
1.1試驗(yàn)材料
多菌靈標(biāo)準(zhǔn)品(99%,河北威遠(yuǎn)生物化工股份有限公司);乙腈和甲醇(色譜純,河北冠龍農(nóng)化有限公司);表面增強(qiáng)試劑(OTR202、OTR103,歐普?qǐng)D斯光學(xué)納米科技有限公司);婺源綠茶;硫酸鎂、四氧化三鐵和石墨化炭(國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)網(wǎng))。
1.2試驗(yàn)儀器
拉曼光譜儀(Ram Tracer-200-HS,歐普?qǐng)D斯光學(xué)納米科技有限公司);天平(AR3202CN,精度為0.01 mg,奧豪斯電子天平);渦旋混合器(Vortex-Genie 2/2T,上海凌初環(huán)保儀器有限公司)。
1.3配制多菌靈標(biāo)準(zhǔn)溶液和以茶葉提取液為基質(zhì)的多菌靈溶液
稱取10 mg多菌靈標(biāo)準(zhǔn)品放入100 mL容量瓶中,用甲醇超聲溶解,待完全溶解后定容至刻度,得到濃度為100 mg/L的多菌靈標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液,用甲醇稀釋,分別得到50、20、15、10、8、5、4、2、1、0.5 mg/L的多菌靈溶液;稱取5 g茶葉粉末樣品,放入50 ml離心管中,加入乙腈10 mL,渦旋振蕩1 min,超聲提取2 min,以5 000 r/min轉(zhuǎn)速離心5 min,取上清液;取茶葉提取液和100 mg/L的多菌靈標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液混合放入15 mL離心管中,渦旋振蕩,分別得到50、25、20、16、12、10、8、5、4、3、2、1、0.5 mg/L的以茶葉提取液為基質(zhì)的多菌靈溶液;將上一步驟中的多菌靈溶液加入自制柱子(石墨化炭、四氧化三鐵和硫酸鎂按一定比例混合而成)中,混合振蕩,以5 000 r/min轉(zhuǎn)速離心5 min,去除色素等物質(zhì),取上清液用于檢測(cè)。
1.4光譜數(shù)據(jù)采集
以拉曼光譜儀為采集平臺(tái),激發(fā)波長(zhǎng)為785 nm,功率為200 mW,掃描范圍400~1 800 cm-1,分辨率為4 cm-1,積分時(shí)間為10 s,積分2次求平均,進(jìn)樣瓶中加入500 μL OTR202試劑、20 μL待測(cè)液、100 μL OTR103試劑,分別采集多菌靈標(biāo)準(zhǔn)溶液和以茶葉提取液為基質(zhì)的多菌靈溶液的拉曼光譜。
2結(jié)果與分析
2.1多菌靈標(biāo)準(zhǔn)溶液的普通拉曼光譜與表面增強(qiáng)拉曼光譜比較
圖1-a是50 mg/L多菌靈標(biāo)準(zhǔn)溶液的表面增強(qiáng)拉曼譜圖,圖1-b是甲醇溶劑的表面增強(qiáng)拉曼譜圖,圖1-c是 50 mg/L 多菌靈標(biāo)準(zhǔn)溶液的普通拉曼譜圖,從甲醇和多菌靈溶液的表面增強(qiáng)拉曼光譜圖可看出,甲醇存在少量SERS峰,但峰強(qiáng)較弱且出峰位置與多菌靈的譜峰不同,表明多菌靈溶液的表面增強(qiáng)拉曼信號(hào)不會(huì)受到甲醇溶液背景信號(hào)的干擾。對(duì)比多菌靈溶液的普通拉曼光譜和表面增強(qiáng)拉曼光譜,其普通拉曼譜圖中只有單一譜峰,且峰強(qiáng)不高,而多菌靈溶液的表面增強(qiáng)拉曼譜圖中的譜峰強(qiáng)度較高且譜峰較多,說(shuō)明納米增強(qiáng)試劑能有效增強(qiáng)多菌靈溶液的拉曼信號(hào)。圖1中630、730、1 004、1 221、1 262、1 368、1 462、1 528 cm-1處的拉曼信號(hào)較強(qiáng),可作為多菌靈農(nóng)藥的特征峰,對(duì)這8處特征峰進(jìn)行譜峰歸屬[9-10]:630 cm-1歸屬于C—C—C的面內(nèi)彎曲振動(dòng),730 cm-1歸屬于苯環(huán)中C—H的面外彎曲振動(dòng),1 004 cm-1歸屬于C—O的拉伸振動(dòng),1 221 cm-1歸屬于N—H的面內(nèi)彎曲振動(dòng),1 262 cm-1歸屬于C—H的面內(nèi)彎曲振動(dòng),1 368 cm-1歸屬于C—N的伸縮振動(dòng),1 462 cm-1歸屬于—CH3的形變振動(dòng),1 528 cm-1歸屬于C—C的伸縮振動(dòng),這些特征譜峰可作為鑒別多菌靈農(nóng)藥的特征峰。
2.2多菌靈標(biāo)準(zhǔn)溶液標(biāo)準(zhǔn)曲線的制定與線性分析
圖2為不同濃度多菌靈溶液的表面增強(qiáng)拉曼光譜。由圖2可看出,隨著多菌靈濃度的減小,其表面增強(qiáng)拉曼信號(hào)逐漸減弱,當(dāng)濃度為1 mg/L時(shí),630、730、1 004、1 221、1 262 cm-1處的拉曼信號(hào)依然明顯。將630、730、1 004、1 221、1 262 cm-1 處的特征峰強(qiáng)與多菌靈溶液濃度進(jìn)行線性回歸,發(fā)現(xiàn)特征峰630 cm-1的峰強(qiáng)與多菌靈溶液濃度有良好的線性關(guān)系(圖3),線性方程為y=191.55x+2 444.8,r2=0.981 2。
2.3茶葉中多菌靈農(nóng)藥殘留分析
圖4為含干茶提取液的不同濃度多菌靈甲醇溶液的SERS。
由圖4可看出,隨著多菌靈濃度的降低,信號(hào)強(qiáng)度明顯降低,但特征峰的位置幾乎沒(méi)有改變。濃度為5 mg/L時(shí),630 cm-1的拉曼峰非常明顯,當(dāng)濃度為2 mg/L時(shí),630 cm-1的拉曼峰依然明顯,當(dāng)濃度為1 mg/L時(shí),與干茶空白的譜峰類似,未出現(xiàn)多菌靈的拉曼峰,說(shuō)明采用SERS方法檢測(cè)干茶中多菌靈農(nóng)藥的最低檢測(cè)濃度為2 mg/L。國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定多菌靈在茶葉中的最大殘留量為5 mg/L,本方法的最低檢測(cè)濃度能滿足檢測(cè)要求。
選用630 cm-1處的峰強(qiáng)度與多菌靈濃度制定標(biāo)準(zhǔn)曲線,在2~50 mg/L具有良好的線性關(guān)系(圖5),線性方程為y=15.731x+1 151.9,r2=0.980 2。
2.4精確度試驗(yàn)分析
使用多菌靈標(biāo)準(zhǔn)溶液和茶葉提取液,分別制備濃度為4.00、12.00、18.00 mg/L的以茶葉提取液為基質(zhì)的多菌靈溶液,每個(gè)樣本制作3份平行樣本,檢測(cè)3次,回收率為86.84%~92.40%,RSD均小于5%(表1)。
3結(jié)論
研究采用SERS結(jié)合快速溶劑提取前處理方法快速檢測(cè)茶葉中多菌靈農(nóng)藥殘留,建立干茶葉中多菌靈農(nóng)藥殘留的快
速檢測(cè)分析方法,確定了多菌靈的表面增強(qiáng)拉曼特征峰:630、730、1 004、1 221、1 262、1 368、1 462、1 528 cm-1。采用SERS方法檢測(cè)干茶中多菌靈農(nóng)藥的最低檢測(cè)濃度為2 mg/L,滿足國(guó)標(biāo)檢測(cè)茶葉的要求;選用630 cm-1處的峰強(qiáng)度與多菌靈濃度制定標(biāo)準(zhǔn)曲線,在2~50 mg/L具有良好的線性關(guān)系,線性方程為y=15.731x+1 151.9,r2=0.980 2;回收率為 86.84%~92.40%,RSD均小于5%,說(shuō)明本方法有良好的重現(xiàn)率。該方法前處理簡(jiǎn)單,整個(gè)試驗(yàn)操作在20 min內(nèi)完成,為檢測(cè)農(nóng)產(chǎn)品中農(nóng)藥殘留提供了技術(shù)支持。
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