鄭雪　李興勇　陳曉燕　陳永對(duì)　吳闊　劉春明　肖俊華　李宏光　張潔　董家紅

摘要：對(duì)云南紅河州煙田番茄斑萎病毒與傳毒薊馬的發(fā)生流行動(dòng)態(tài)進(jìn)行了調(diào)查研究，共鑒定出西花薊馬、花薊馬和煙薊馬等3種薊馬為煙田傳毒薊馬，其中以西花薊馬種群數(shù)量最多。對(duì)不同時(shí)期傳毒薊馬百株蟲(chóng)量和TSWV發(fā)病率進(jìn)行回歸分析，結(jié)果表明傳毒薊馬蟲(chóng)口數(shù)量與煙田TSWV發(fā)病率呈正相關(guān)關(guān)系，即傳毒薊馬種群數(shù)量高會(huì)導(dǎo)致煙田TSWV的發(fā)生流行。

關(guān)鍵詞：煙田；傳毒薊馬；番茄斑萎病毒；相關(guān)性

中圖分類(lèi)號(hào)：S436.412 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A 文章編號(hào)：1002-1302（2015）05-0118-03

番茄斑萎病毒（tomatospottedwiltvirus，TSWV）屬布尼亞病毒科（Bunyaviridae）番茄斑萎病毒屬（Tospovirus），是該屬病毒中的代表成員。TSWV為世界性分布，寄主范圍廣，是一類(lèi)對(duì)農(nóng)業(yè)生產(chǎn)具有嚴(yán)重破壞作用的植物病毒，每年在世界范圍內(nèi)造成數(shù)億美元的經(jīng)濟(jì)損失，被列為世界危害最大的10種植物病毒之一。

近年來(lái)，隨著全球氣候變暖和國(guó)際貿(mào)易的增加，番茄斑萎病毒的發(fā)生范圍日益擴(kuò)大，且不斷有新種和新株系發(fā)生流行危害。目前，該屬病毒已報(bào)道了25種，其中在云南地區(qū)發(fā)現(xiàn)10種，包括5個(gè)新種，3種新株系。筆者所在實(shí)驗(yàn)室前期調(diào)查結(jié)果顯示，番茄斑萎病毒（TSWV）為該屬病毒在云南的優(yōu)勢(shì)種之一，在云南分布廣泛，寄主植物包含茄科、菊科、藜科、豆科、蔥科、鳶尾科等7科的25種植物。

TSWV主要由薊馬以持久增殖方式傳播，僅在若蟲(chóng)期獲毒的薊馬成蟲(chóng)才可傳毒，獲毒薊馬終生帶毒，且病毒可在薊馬體內(nèi)復(fù)制。在田間可傳播TSWV的薊馬有纓翅目（Thysanoptera）薊馬科（Thripidae）的花薊馬屬（Frankliniella）和薊馬屬（Thrips），主要有西花薊馬（F.occidentalis）、首花薊馬（F.cephalica）、梳缺花薊馬（F.schultzei）、花薊馬（F.bispi-nosa）、煙草褐薊馬（F.fsca）、臺(tái)灣花薊馬（F.intonsa）、棕櫚薊馬（T.palmi）、煙薊馬（T.tabaci）、日本煙草薊馬（T.seto-SItS）等。鄭雪等的研究結(jié)果表明，西花薊馬、花薊馬、煙薊馬和棕櫚薊馬等4種薊馬為云南地區(qū)TSWV的主要傳毒介體。傳毒薊馬通過(guò)傳播TSWV對(duì)寄主植物構(gòu)成間接危害引起的經(jīng)濟(jì)損失遠(yuǎn)大于其直接取食所造成的損失。

紅河州位于云南省東南部，生物資源豐富，氣候類(lèi)型豐富多樣。2012年來(lái)，該州由TSWV引起的主要經(jīng)濟(jì)作物煙草、番茄、辣椒等作物斑萎病暴發(fā)流行，給當(dāng)?shù)氐霓r(nóng)業(yè)經(jīng)濟(jì)生產(chǎn)造成了嚴(yán)重?fù)p失。基于此，筆者于2013年對(duì)紅河州煙區(qū)TSWV發(fā)生隋況與傳毒薊馬的種類(lèi)及數(shù)量動(dòng)態(tài)進(jìn)行了調(diào)查研究，旨在摸清TSWV與傳毒薊馬發(fā)生流行的相關(guān)性，為建立有效的番茄斑萎病毒一傳毒薊馬綜合防控體系提供理論與實(shí)踐依據(jù)。

1.材料與方法

1.1試驗(yàn)調(diào)查地點(diǎn)

在云南省紅河州瀘西縣烤煙種植田選擇3塊試驗(yàn)小區(qū)進(jìn)行（每個(gè)小區(qū)面積約60m²）。該地區(qū)海拔1823.00m，年平均氣溫14.70℃，年降水量983.00mm。

1.2調(diào)查方法

自2014年5月5日煙草團(tuán)棵期始，至6月2日煙草旺長(zhǎng)期止，每隔7d調(diào)查1次薊馬蟲(chóng)口數(shù)量及煙草發(fā)病情況，共調(diào)查5次。調(diào)查采用五點(diǎn)式取樣法，每試驗(yàn)小區(qū)每次調(diào)查5個(gè)樣點(diǎn)，每點(diǎn)選擇5株煙株，且保證樣點(diǎn)至少與煙田邊緣有5m距離，以減少邊緣效應(yīng)對(duì)取樣結(jié)果的影響。用小捧擊振煙株的葉和花，使棲息其上的薊馬振落到下方承接的白色托盤(pán)上，用吸蟲(chóng)器吸入酒精瓶?jī)?nèi)帶回實(shí)驗(yàn)室鑒定種類(lèi)并統(tǒng)計(jì)數(shù)量，折算成百株蟲(chóng)口數(shù)量。

百株蟲(chóng)量（頭）=（調(diào)查總蟲(chóng)數(shù)/調(diào)查總株數(shù)）×100株。

結(jié)合薊馬蟲(chóng)口數(shù)量的調(diào)查同時(shí)進(jìn)行感染TSWV煙株的發(fā)病率調(diào)查，每點(diǎn)選取5株煙抹，將疑似感病煙草的葉片帶回實(shí)驗(yàn)室經(jīng)ELISA檢測(cè)，確定是否帶毒。記錄總株數(shù)、病株數(shù)，計(jì)算煙株發(fā)病率。

煙株發(fā)病率=（發(fā)病株數(shù)/調(diào)查總株數(shù)）×100%。

1.3標(biāo)本鑒定

標(biāo)本的制作參考張宏瑞等、Mirab-Balou等的方法并稍加修改，將采集到的薊馬從離心管中挑出，放在5%KOH溶液中，冷浸12～24h（按蟲(chóng)體大小、顏色深淺而定），除去體內(nèi)脂肪等影響形態(tài)觀(guān)察的內(nèi)含物，并適度褪色。待標(biāo)本的翅及附肢都伸展后，即可制成玻片，以供鑒定。鑒定采用Priesner建立的2亞目、3總科、5科的分類(lèi)系統(tǒng)。

1.4TSWV發(fā)生與傳毒薊馬種群動(dòng)態(tài)相關(guān)性

根據(jù)調(diào)查結(jié)果，分析煙田TSWV發(fā)生流行與傳毒薊馬種群動(dòng)態(tài)的相關(guān)性。

1.5數(shù)據(jù)分析

采用SPSS11.5軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。本研究中數(shù)據(jù)均為“平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)誤”。

2.結(jié)果與分析

2.1傳毒薊馬種類(lèi)鑒定

通過(guò)制作薊馬的玻片標(biāo)本，對(duì)采集的薊馬樣本進(jìn)行鏡檢，共鑒定出3種薊馬，分別為薊馬科（Thripidae）花薊馬屬（Franlliniella）的西花薊馬、花薊馬，薊馬屬（Thr～s）的煙薊馬。其中，西花薊馬所占比例最大，分別占5次調(diào)查收集薊馬蟲(chóng)口總量的92.40%、88.89%、94.66%、92.47%、94.27%（表1）。對(duì)所鑒定的3種薊馬種類(lèi)，根據(jù)其成蟲(chóng)特征，編寫(xiě)了如下檢索表。

紅河瀘西煙田傳毒薊馬檢索表

1.觸角7節(jié)，前胸背片有2對(duì)長(zhǎng)鬃………煙薊馬T.tabaci

觸角8節(jié)，前胸背片有4對(duì)長(zhǎng)鬃…………………………2

2.復(fù)眼后鬃長(zhǎng)，最長(zhǎng)的與單眼問(wèn)鬃等長(zhǎng)，單眼間鬃位于前、后單眼外緣連接線(xiàn)上，后胸盾片具1對(duì)鐘形感受孔……………

…………………………………西花薊馬F.occidentalis

復(fù)眼后鬃短，長(zhǎng)度僅為單眼間鬃的一半，單眼間鬃位于前、后單眼中心連接線(xiàn)上，后胸盾片無(wú)鐘形感受孔………………

…………………………………………花薊馬F.intonsa

2.2傳毒薊馬種群動(dòng)態(tài)

由圖1可以看出，自5月5日起，傳毒薊馬種群數(shù)量呈逐漸上升的趨勢(shì)。調(diào)查初始日5月5日，百株蟲(chóng)口數(shù)量達(dá)2041.40頭，之后5月12日、5月19日、5月26日、6月2日，百株蟲(chóng)口數(shù)量直線(xiàn)上升，分別為2480.70、3501.5l、4082.25、4521.56頭。

2.3TSWV發(fā)生動(dòng)態(tài)

如圖2所示，5月5日田間煙草斑萎病發(fā)病率為1.00%，之后煙草斑萎病的發(fā)病率隨著調(diào)查的延續(xù)呈逐漸上升趨勢(shì)，5月12日、5月19日、5月26日、6月2日的發(fā)病率分別為5.74%、14.19%、17.33%、18.52%。

2.4薊馬與TSWV發(fā)生流行的相關(guān)性

由圖1和圖2可以看出，當(dāng)傳毒薊馬種群數(shù)量較高時(shí)，TSWV發(fā)病率也處于較高水平。通過(guò)對(duì)不同時(shí)期傳毒薊馬百株蟲(chóng)量和TSWV發(fā)病率的動(dòng)態(tài)進(jìn)行回歸分析，得出TSWV發(fā)病率（y）與傳毒薊馬種群數(shù)量（x）回歸方程y=0.00007x-0.1257（r=0.9802）。r>0.90，說(shuō)明傳毒薊馬蟲(chóng)口數(shù)量與煙田TSWV發(fā)病率呈正相關(guān)關(guān)系，即傳毒薊馬種群數(shù)量高會(huì)導(dǎo)致煙田TSWV的發(fā)生流行。

3.討論

TSWV可侵染80多個(gè)科1100多種植物，且該病毒能由西花薊馬F.occidentalis、煙薊馬T.tabaci等8種以上的薊馬進(jìn)行傳播。云南地處低緯高原，生態(tài)類(lèi)型多樣，植物種類(lèi)豐富多樣，為T(mén)SWV和傳毒薊馬提供了豐富的寄主資源，是導(dǎo)致近年云南地區(qū)TSWV暴發(fā)流行的主要原因之一。

薊馬傳播TSWV方式獨(dú)特，薊馬若蟲(chóng)通過(guò)取食帶病毒植株感染病毒，然后通過(guò)攜帶病毒的若蟲(chóng)和成蟲(chóng)轉(zhuǎn)移取食在寄主植物之間進(jìn)行傳播；薊馬能否成功地傳播病毒，從而導(dǎo)致病毒的發(fā)生流行，通常取決于薊馬在寄主植物間的行為和擴(kuò)散能力，受到薊馬的種類(lèi)、性別、齡期、寄主植物種類(lèi)、環(huán)境條件等多種因素的影響。西花薊馬是TSWV最主要的傳播媒介，一般可導(dǎo)致作物損失30%～50%，嚴(yán)重時(shí)可達(dá)到70%，甚至有可能導(dǎo)致絕收。本研究通過(guò)2013年對(duì)瀘西煙田薊馬種類(lèi)、數(shù)量的調(diào)查，發(fā)現(xiàn)西花薊馬、煙薊馬、花薊馬等3種傳毒薊馬。其中以西花薊馬為煙田傳毒薊馬優(yōu)勢(shì)種，5次調(diào)查分別占所收集標(biāo)本總量的92.40%、88.89%、94.66%、92.47%、94.27%。這與鄭雪等報(bào)道的2012年在瀘西煙田中共發(fā)現(xiàn)西花薊馬、煙薊馬、花薊馬和棕櫚薊馬等4種傳毒薊馬略有不同，這種差異可能是由于調(diào)查時(shí)間（月份）不同，溫度、濕度等環(huán)境條件的變化所導(dǎo)致。調(diào)查發(fā)現(xiàn)，煙田TSWV發(fā)病率的動(dòng)態(tài)趨勢(shì)與傳毒薊馬種群數(shù)量變化的趨勢(shì)基本一致，均在煙草旺長(zhǎng)初期達(dá)到最高峰，發(fā)病率為18.52%。經(jīng)相關(guān)性分析，傳毒薊馬蟲(chóng)口數(shù)量與TSWV發(fā)病情況呈正相關(guān)關(guān)系，表明傳毒薊馬蟲(chóng)口數(shù)量越大，越容易造成TSWV的暴發(fā)流行。

寄主植物周邊的雜草和寄主植物的間作組合方式、寄主植物在田間種植的時(shí)間也影響傳毒薊馬對(duì)TSWV的傳播，如雜草和間作的農(nóng)作物是介體薊馬或病毒的寄主，寄主植物主要生長(zhǎng)期的溫度適宜傳毒薊馬的生長(zhǎng)發(fā)育等因素都有利于TSWV的發(fā)生流行。明確TSWV與傳毒薊馬種群發(fā)生動(dòng)態(tài)，分析2者之間的相關(guān)性，將為建立TSWV一傳毒薊馬綜合防控體系與預(yù)警、控制策略提供理論依據(jù)。