袁慧銘王蕾 阮國(guó)祥 趙毓宏 謝玨（浙江大學(xué)附屬第一醫(yī)院輸血科 杭州 310003)

混合抗-Mur、抗-E和抗-Jkb抗體導(dǎo)致配血困難一例

袁慧銘*王蕾 阮國(guó)祥 趙毓宏 謝玨**
（浙江大學(xué)附屬第一醫(yī)院輸血科 杭州 310003)

交叉配血不合 抗-Mur抗體 抗-E抗體 抗-Jkb抗體

引起交叉配血不合的原因較多，主要有：①技術(shù)因素；②血清抗體因素；③紅細(xì)胞抗原因素。究其原因有：①實(shí)驗(yàn)操作不認(rèn)真，標(biāo)本張冠李戴，試劑管理紊亂，實(shí)驗(yàn)結(jié)果觀察不仔細(xì)等人為因素；②患者因反復(fù)輸血、妊娠等產(chǎn)生不規(guī)則抗體及自身免疫性疾病患者血清中自身抗體所引起的交叉配血不合以及兩類(lèi)抗體混合引起的交叉配血不合；③血漿蛋白紊亂、冷凝集素及某些藥物因素使紅細(xì)胞聚集，干擾交叉配血結(jié)果[1-3]。文獻(xiàn)報(bào)道臨床交叉配血中，多數(shù)由單一同種抗體或同種抗體合并自身冷抗體所致，三種同種抗體引發(fā)的交叉配血困難相對(duì)少見(jiàn)。本文報(bào)道1例因混合抗-Mur、抗-E和抗-Jkb抗體導(dǎo)致配血困難的個(gè)案。

1　病例介紹

患者男，42歲，A型RhD陽(yáng)性，曾于2014年5月至7月于某市級(jí)醫(yī)院多次輸血，合計(jì)2 500 ml?；颊?年前在當(dāng)?shù)蒯t(yī)院檢查提示肝硬化，6個(gè)月前無(wú)明顯誘因出現(xiàn)嘔血、黑便，當(dāng)?shù)蒯t(yī)院內(nèi)鏡提示食管重度靜脈曲張和食管胃底輕度靜脈曲張。上腹CT示脾腫大、門(mén)脈高壓、食管下端靜脈曲張和腹腔積液。2個(gè)月前患者來(lái)我院就診，診斷：①肝硬化（失代償，自身免疫性）；②食管胃底靜脈曲張（硬化劑治療術(shù)后）；③脾腫大。當(dāng)時(shí)肝功能為Child-Pugh C級(jí)，不宜手術(shù)， 繼續(xù)采用護(hù)肝、退黃、利尿治療，待膽紅素降至40 μmol/L以下準(zhǔn)備行“脾切除、門(mén)奇靜脈斷流術(shù)加術(shù)中肝活檢術(shù)”，術(shù)前對(duì)患者進(jìn)行血型鑒定（ABO血型正反定型用試管法，Rh血型定型用卡式法）、不規(guī)則抗體篩選（用鹽水法+抗人球蛋白試驗(yàn)法）、抗體鑒定（凝膠卡技術(shù)）、抗人球蛋白試驗(yàn)[4]、效價(jià)測(cè)定（抗人球蛋白試驗(yàn)法）和交叉配血[5]（鹽水法+聚凝胺法，抗人球蛋白試驗(yàn)法，微柱凝膠法多種方法）。

結(jié)果顯示，患者紅細(xì)胞血型鑒定為A型，Rh血型為CCDee；抗人球蛋白試驗(yàn)顯示直接抗人球蛋白試驗(yàn)陰性，間接抗人球蛋白試驗(yàn)陽(yáng)性；手術(shù)前不規(guī)則抗體篩選發(fā)現(xiàn)抗篩細(xì)胞3+，認(rèn)為血清中存在不規(guī)則抗體，用紅細(xì)胞血型抗體鑒定細(xì)胞直接進(jìn)行抗體鑒定（表1、2)?？贵w特異性鑒定顯示6、8、9號(hào)譜細(xì)胞為+，1、4、5、10號(hào)譜細(xì)胞為3+，2號(hào)譜細(xì)胞為4+，3、7號(hào)譜細(xì)胞為－（表1）。LISS /Coombs凝膠卡顯示1、6、8、9號(hào)譜細(xì)胞為+，2、3、4、5號(hào)譜細(xì)胞為3+，7號(hào)譜細(xì)胞為4+，10號(hào)譜細(xì)胞為－（表2）。此外，患者自身細(xì)胞對(duì)照，直接抗人球蛋白試驗(yàn)均陰性。綜合實(shí)驗(yàn)結(jié)果，患者體內(nèi)血清中含有抗-Mur、抗-E和抗-Jkb三種抗體，效價(jià)測(cè)定分別為64、64和8。通過(guò)患者血型抗原鑒定發(fā)現(xiàn)患者缺少M(fèi)ur、E和Jkb三種抗原。交叉配血試驗(yàn)先采用盲配法為患者配血，從庫(kù)中所有血型為A型DCCee的懸浮紅細(xì)胞中進(jìn)行篩選，從57份獻(xiàn)血員標(biāo)本中篩選到4份，共8 U。通過(guò)鹽水法+聚凝胺法、抗人球蛋白試驗(yàn)法、微柱凝膠法進(jìn)行交叉配血，主側(cè)、次側(cè)均無(wú)溶血，無(wú)凝集。對(duì)篩選到的4份獻(xiàn)血員標(biāo)本進(jìn)行血型抗原鑒定，Mur、E和Jkb均為陰性?；颊咻斪⒓t細(xì)胞懸液4 U后無(wú)輸血不良反應(yīng)，且血紅蛋白從60 g/L上升至83 g/L，紅細(xì)胞從2.75×1012/L上升至3.72×1012/L，紅細(xì)胞壓積由20.6%上升至27.5%，說(shuō)明該患者輸血有效。

表1　紅細(xì)胞血型抗體鑒定細(xì)胞反應(yīng)格局表—譜細(xì)胞（批號(hào)：20145706）

表2　紅細(xì)胞血型抗體鑒定細(xì)胞反應(yīng)格局表—譜細(xì)胞（批號(hào)：20145704）

2　討論

ABO、Rh血型是人類(lèi)紅細(xì)胞膜上抗原性最強(qiáng)的兩種血型系統(tǒng)，Rh血型抗原性強(qiáng)度僅次于A和B抗原，在Rh抗原中以D抗原為最強(qiáng)，其次為 E、C、c、e，且常以復(fù)合抗原形式存在[6-7]。Rh抗體除抗-E、抗-C抗體為天然產(chǎn)生外，其余多為外來(lái)紅細(xì)胞免疫刺激產(chǎn)生，即通過(guò)輸血或妊娠產(chǎn)生，這些抗體均為IgG型，但在免疫早期也可有部分為IgM型[8]。Mur抗原在白種人中罕見(jiàn)，有報(bào)道在50 000名白人中僅發(fā)現(xiàn)6例Mur陽(yáng)性，但在黃種人則常見(jiàn)，在東亞地區(qū)更常見(jiàn)，且存在地區(qū)差異，如在中國(guó)香港人中Mur抗原的頻率為6%，在泰國(guó)人中其頻率為10%，而在中國(guó)臺(tái)灣的阿美山人中，其頻率可達(dá)88%[9]。Kidd血型系統(tǒng)的控制基因位于人類(lèi)染色體18q11-12，常見(jiàn)的抗原為Jka和Jkb，大部分為IgG抗體[10]，Jka和Jkb抗原免疫原性極弱，一般對(duì)外來(lái)抗原免疫力強(qiáng)的人才會(huì)產(chǎn)生抗體，抗-Jka、抗-Jkb抗體與其他大多數(shù)抗體不同，常與其他抗體混合存在。在臨床交叉配血實(shí)踐中，Rh、Kidd、MNS等血型系統(tǒng)的不規(guī)則抗體均可引起嚴(yán)重輸血反應(yīng)，具有重要的臨床意義。因此，要重視對(duì)這些不規(guī)則抗體的檢測(cè)。除少數(shù)低頻不規(guī)則抗體外，其他多數(shù)不規(guī)則抗體的存在首先表現(xiàn)在抗體篩選實(shí)驗(yàn)陽(yáng)性、交叉配血不相合。因此，通過(guò)抗體鑒定實(shí)驗(yàn)確定抗體種類(lèi)，再選擇相應(yīng)抗原陰性的紅細(xì)胞進(jìn)行交叉配血才能確保輸血安全。對(duì)于兩種或兩種以上不規(guī)則抗體并存時(shí)，抗體鑒定實(shí)驗(yàn)尤應(yīng)警惕，不要漏檢其中的某一種抗體，以免導(dǎo)致后續(xù)輸血風(fēng)險(xiǎn)[11-12]。本文患者缺乏E、Mur、Jkb抗原，在外院長(zhǎng)期反復(fù)輸血過(guò)程中，由于輸入了含有E、Mur、Jkb抗原的紅細(xì)胞，刺激機(jī)體產(chǎn)生了免疫性抗-E、抗-Mur和抗-Jkb抗體，造成再次輸血時(shí)出現(xiàn)交叉配血不合。鑒于紅細(xì)胞抗原的復(fù)雜性，為避免產(chǎn)生不規(guī)則抗體給輸血帶來(lái)困難，建議對(duì)全部輸血人群、反復(fù)輸血患者進(jìn)行不規(guī)則抗體篩選和Rh血型系統(tǒng)五種抗原表型符合輸注，以確保輸血安全、有效。此外，通過(guò)本文病例的不規(guī)則抗體鑒定，在對(duì)多種抗體混合時(shí)的鑒定工作中，如何避免抗體漏檢應(yīng)該注意：①重視患者的性別、年齡、診斷、輸血史、妊娠史等，必要時(shí)與臨床醫(yī)師溝通，取得明確詳細(xì)的病情資料；②在抗體鑒定過(guò)程中建議使用多種檢測(cè)方法、多種不同批號(hào)的檢測(cè)試劑，以提高抗體鑒定結(jié)果的準(zhǔn)確性；③輸血工作者本身要有一定的臨床知識(shí)和一定的經(jīng)驗(yàn)積累，同時(shí)應(yīng)該具備高度責(zé)任心。

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Difficult blood matching for a patient with mixed anti -Mur, anti -E and anti -Jkbantibodies

YUAN Huiming, WANG Lei, RUAN Guoxiang, ZHAO Yuhong, XIE Jue
(Department of Blood Transfusion, the First Affiliated Hospital of Zhejiang University, Hangzhou 310003, China)

crossmatching incompatibility; anti-Mur antibody; anti-E antibody; anti-Jkbantibody

R457.1+1

A

1006-1533（2015）14-0012-03

袁慧銘，男，輸血技師，主要從事免疫檢驗(yàn)及臨床輸血工作。E-mail：15858115743@163.com.

**通訊作者簡(jiǎn)介：謝玨，女,副主任技師，浙江大學(xué)附屬第一醫(yī)院輸血科主任。研究方向?yàn)榕R床用血管理、血小板相關(guān)研究、Rh五種抗原表型符合輸注應(yīng)用與研究等。E-mail：zyyyxj2011@163.com

2015-05-14）