朱鑫方范亮峰烏宇波楊李輝方勇夏榮*（.復(fù)旦大學(xué)附屬華山醫(yī)院輸血科 上海 00040;.上海市血液中心血型參比實(shí)驗(yàn)室 上海 00050)

罕見Rh分型引起輸血反應(yīng)一例*

朱鑫方1**范亮峰2烏宇波1楊李輝1方勇1夏榮1***
（1.復(fù)旦大學(xué)附屬華山醫(yī)院輸血科 上海 200040;2.上海市血液中心血型參比實(shí)驗(yàn)室 上海 200050)

Rh血型 抗C 抗E 輸血反應(yīng)

Rh血型系統(tǒng)是紅細(xì)胞血型系統(tǒng)中最復(fù)雜的一個(gè)系統(tǒng)，臨床重要性僅次于ABO血型系統(tǒng)，患者血清中產(chǎn)生的Rh血型抗體也是導(dǎo)致遲發(fā)型輸血反應(yīng)最多的抗體[1]。出現(xiàn)不規(guī)則抗體的患者很多都有多次輸血史，輸血時(shí)患者Rh抗原陰性的細(xì)胞遇到Rh抗原陽性的血液制品，刺激免疫系統(tǒng)產(chǎn)生抗體，導(dǎo)致交叉配血不合，當(dāng)輸入的Rh抗原陽性紅細(xì)胞激發(fā)回憶反應(yīng)時(shí)，即會(huì)發(fā)生輸血反應(yīng)。現(xiàn)將1例罕見Rh分型R0產(chǎn)生抗C和抗E抗體引起的輸血反應(yīng)報(bào)道如下。

1　病例介紹

患者男，87歲，漢族，因肝硬化、上消化道出血入院，實(shí)驗(yàn)室檢查示血紅蛋白32 g/L，總膽紅素168 μmol/ L?；颊咴?014年11月底和12月20日分別輸血2 U，效果不佳，末次輸血后出現(xiàn)醬油色尿。本次入院輸血科交叉配血不合，送至血液中心行血液特配。①ABO血型定型及RH分型：采用試管法，將患者紅細(xì)胞洗滌3次后配成3%懸液，標(biāo)記好試管后分別加抗體-A、-B、 -D、-C、-c、-E、-e，以上各管加患者紅細(xì)胞懸液；患者血清加ABO細(xì)胞，設(shè)自身對(duì)照管，具體按免疫血液學(xué)試驗(yàn)方法操作[2]。②不規(guī)則抗體篩查及鑒定：采用鹽水法及快速間接抗人球蛋白法進(jìn)行抗體篩查；用進(jìn)口譜細(xì)胞，使用微柱凝膠檢測(cè)卡進(jìn)行抗體鑒定，具體按說明書操作。③直接抗球蛋白試驗(yàn)、間接抗球蛋白試驗(yàn)：患者3%紅細(xì)胞懸液分別加多特異性抗球蛋白試劑、單特異性抗-IgG、單特異性抗-C3d，立即離心看結(jié)果。快速間接抗人球蛋白法是血清加紅細(xì)胞加10滴liss液，37 ℃，10 min后洗3次，最后1次扣干后加1滴多抗或單抗，離心看結(jié)果。經(jīng)典間接抗人球蛋白法不加liss液，37 ℃，30 min，具體見免疫血液學(xué)試驗(yàn)方法[2]。④吸收放散試驗(yàn)：取正常獻(xiàn)血源中篩選Rh分型為dce/dce的紅細(xì)胞，洗滌3次后離心取1 ml壓積細(xì)胞，加患者1 ml血清，充分混勻，置37 ℃、30 min，離心后留取上清，如自身抗體強(qiáng)，可進(jìn)行2次吸收[2]?；颊呒t細(xì)胞酸放散：取洗滌3次后患者壓積紅細(xì)胞1 ml，加1 ml酸試劑，充分混勻后離心取上清，用堿液滴定至中性，譜細(xì)胞采用微柱凝膠檢測(cè)卡檢測(cè)放散液格局，具體按試劑盒說明書操作。⑤毛細(xì)血管法：取患者紅細(xì)胞離心去盡上清液充分混勻。將紅細(xì)胞裝入10根毛細(xì)管中至60 mm，用密封物質(zhì)封閉毛細(xì)管一端。離心5 min(封閉端置于遠(yuǎn)心端方向)后，割下毛細(xì)管中近心端和遠(yuǎn)心端各5 mm紅細(xì)胞。將割下的毛細(xì)管分別置于試管中，加入鹽水充分搖動(dòng)，將毛細(xì)管中的紅細(xì)胞沖出，以1 000 g離心1 min，去除空玻璃管，將紅細(xì)胞配制成2%～5%的紅細(xì)胞懸液備用[3]。⑥交叉配血：采用鹽水法、聚凝胺法、快速間接抗人球蛋白法，操作按血液免疫學(xué)試驗(yàn)方法[2]。

結(jié)果顯示患者Rh分型為R0，血清中檢出抗C和抗E抗體。①血型及直接抗球蛋白試驗(yàn)：患者血型為B型，正反定型一致，但自身對(duì)照有弱陽性?；颊叩腞h分型為ccDee（R0），其中C、E抗原有混合視野，提示輸血反應(yīng)，毛細(xì)管法遠(yuǎn)心端陳舊細(xì)胞CE抗原陽性，提示患者輸入了C、E抗原陽性細(xì)胞，遠(yuǎn)端細(xì)胞直接抗球蛋白抗體強(qiáng)于近端（表1），提示遠(yuǎn)端細(xì)胞表面有抗體結(jié)合被破壞，支持輸血反應(yīng)?；颊呒t細(xì)胞直接抗球蛋白試驗(yàn)多特異性抗-IgG 2+、單特異性抗-IgG 2+、單特異性抗-C3d陰性，直接抗球蛋白試驗(yàn)陽性，進(jìn)一步支持患者發(fā)生輸血反應(yīng)。②抗體篩選和鑒定：抗體篩選鹽水法陰性，間接抗球蛋白試驗(yàn)法（IAT）Ⅰ1+Ⅱ1+Ⅲ1+，自身對(duì)照管1+；患者血清及紅細(xì)胞放散液抗體鑒定細(xì)胞均為陽性，但有格局，為抗C抗體，抗E抗體不確定（表2）?；颊呒t細(xì)胞放散液細(xì)胞譜無格局，均為3+，提示患者有自身抗體，干擾抗體檢測(cè)，用Rh分型為dce/dce的細(xì)胞對(duì)患者血清行2次吸收試驗(yàn)，去除自身抗體后再次鑒定，顯示為抗C和抗E抗體（表2）。③交叉配血：獻(xiàn)血源紅細(xì)胞懸液中50份未篩到對(duì)應(yīng)的ccDee分型，在Rh陰性血源中篩選C、E抗原陰性的懸浮紅細(xì)胞，采用鹽水法、聚凝胺法、抗人球法交叉配血，鹽水法主次側(cè)均陰性，因患者有自身抗體同時(shí)直接抗球蛋白試驗(yàn)陽性，聚凝胺法和抗人球蛋白法主次側(cè)均有弱凝集，因此給患者輸注ccdee的Rh陰性洗滌紅細(xì)胞，患者輸注后無輸血不良反應(yīng)，輸注效果佳，血紅蛋白升至53 g/L。

2　討論

Rh血型系統(tǒng)包括D、C、c、E和e5種主要血型抗原。RhD血型是臨床輸血前常規(guī)檢測(cè)項(xiàng)目，而其他4種血型抗原在臨床并未常規(guī)檢測(cè)。許多試驗(yàn)結(jié)果提示，由于輸血或妊娠原因而產(chǎn)生的紅細(xì)胞同種抗體大多為抗Rh系統(tǒng)抗體，且多為IgG型，雖然有天然的IgM型抗C、抗E抗體，但多數(shù)是有抗原刺激產(chǎn)生的IgG型[4-7]，本試驗(yàn)中抗體篩選鹽水法為陰性，提示患者體內(nèi)無IgM型Rh相關(guān)抗體。D抗原目前是臨床常測(cè)抗原，患者產(chǎn)生抗D抗體機(jī)會(huì)不大，但C、c、E、e抗原在臨床并未常規(guī)檢測(cè)，極易因血型抗原不合而使患者產(chǎn)生抗體，當(dāng)患者再次暴露于某種致敏性Rh血型抗原時(shí)，受者免疫系統(tǒng)回憶反應(yīng)可迅速產(chǎn)生大量抗體，引起嚴(yán)重的輸血不良反應(yīng)[8-9]。本文患者Rh分型為ccDee，部分地區(qū)統(tǒng)計(jì)只占人群的1.87%或更低[10-11]，而C、E抗原分布頻率高，患者很容易接觸到C、E抗原，從而產(chǎn)生抗體。利用毛細(xì)管法，檢測(cè)到患者體內(nèi)有陳舊的含CE抗原的紅細(xì)胞，與患者產(chǎn)生的抗C、抗E抗體發(fā)生反應(yīng)，出現(xiàn)輸血反應(yīng)。

表1　患者Rh分型及毛細(xì)管Rh分型

表2　患者血清抗體鑒定結(jié)果（凝膠卡法）

對(duì)于兩種或更多不規(guī)則抗體同時(shí)存在時(shí)，抗體鑒定尤需謹(jǐn)慎，防止漏檢，增加輸血風(fēng)險(xiǎn)，本文患者有自身抗體干擾，采用吸收試驗(yàn)去除自身抗體后鑒定出抗C和抗E抗體。對(duì)于有輸血史或有輸血反應(yīng)的患者，每次輸血前，建議進(jìn)行抗篩及抗體鑒定檢測(cè)，同時(shí)可以檢測(cè)患者Rh分型，以減少輸血反應(yīng)的發(fā)生。

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Transfusion reaction caused by rare Rh typing: case report

ZHU Xinfang1, FAN Liangfeng2, WU Yubo1, YANG Lihui1, FANG Yong1, XIA Rong1
(1.Department of Transfusion Medicine, Huashan Hospital, Fudan University, Shanghai 200040, China; 2.Blood Group Reference Room of Shanghai Blood Center, Shanghai 200050, China)

Rh typing; anti-C; anti-E; transfusion reaction

·社區(qū)衛(wèi)生管理·

R457.1+1

A

1006-1533（2015）14-0010-02

國(guó)家自然科學(xué)基金面上項(xiàng)目（81170530）；

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朱鑫方，女，碩士研究生，主要從事臨床輸血治療；

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簡(jiǎn)介：夏榮，男，教授，主任醫(yī)師，復(fù)旦大學(xué)附屬華山醫(yī)院輸血科主任，博士研究生導(dǎo)師，主要從事血液病及臨床輸血治療、輸血相關(guān)免疫調(diào)節(jié)的研究。 E-mail:xiarongcn@126.com

2015-05-14）