方宏罡 董秀鵬 (大慶油田總醫(yī)院檢驗(yàn)科，黑龍江 大慶 163000)

抗病毒是治療慢性乙肝的最常用方法，但是治療后仍有部分患者的病情會(huì)不斷發(fā)展。目前，關(guān)于乙型肝炎病毒造成肝細(xì)胞損傷的機(jī)制尚未完全闡明〔1〕，這也不利于靶向藥物的研發(fā)。近年來，臨床學(xué)者致力于探尋與乙肝發(fā)生密切相關(guān)的分子機(jī)制，其中白細(xì)胞介素(IL)-18是新發(fā)現(xiàn)的一類炎癥因子，它能夠調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng)和免疫功能，可能與乙型肝炎的發(fā)生密切相關(guān)〔2〕。筆者分析慢性乙型肝炎IL-18及其結(jié)合蛋白與乙型肝炎病毒(HBV)DNA載量的相關(guān)性。

1 對(duì)象與方法

1.1 對(duì)象 將2013年7月至2014年9月我院收治的慢性乙型肝炎160例。均符合2010年中華醫(yī)學(xué)會(huì)肝病學(xué)分會(huì)修訂的《慢性乙型肝炎防治指南》的慢性乙肝診斷標(biāo)準(zhǔn)〔3〕。根據(jù)HBV-DNA載量不同分為高載量組和低載量組各80例。高載量組:HBV-DNA＞105/L;男56例，女24例;年齡61～72〔平均(65.62±7.22)〕歲;病程 1 ～7〔平均(3.14±0.05)〕年;低載量組:HBV-DNA＜104/L;男 53例，女 27例;年齡 61～74〔平均(66.34±7.52)〕歲;病程1 ～5〔平均(3.12±0.05)〕年。兩組患者性別、年齡、病程等資料比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，具有可比性。

1.2 血清學(xué)指標(biāo) 采集兩組患者的靜脈血，離心后取血清，采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)Ⅲ型前膠原(PⅢNP)、Ⅳ型膠原(ⅣC)、IL-18以及IL-18BP含量。檢測(cè)儀器:帝肯freedom evolyzer酶標(biāo)儀;采用化學(xué)法檢測(cè)層黏連蛋白(LN)、透明質(zhì)酸酶(HA)，羅氏COBAS C702生化分析儀。

1.3 免疫功能指標(biāo) 采集外周血后分離淋巴細(xì)胞，采用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)各亞群的量，包括 CD3+、CD4+、CD8+T細(xì)胞、CD16+/CD56+NK細(xì)胞。檢測(cè)儀器:BD FACSCalibur流式細(xì)胞儀。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS18.0軟件進(jìn)行t檢驗(yàn)和單因素回歸分析。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者的HBV-DNA載量以及IL-18含量比較 高載量組血清中IL-18含量、HBV-DNA載量高于低載量組，IL-18BP含量低于低載量組(P＜0.05)。見表1。

2.2 兩組患者治療后肝纖維化指標(biāo)比較 高載量組患者HA、LN、ⅣC、PⅢNP水平均高于低載量組(均P＜0.05)。見表2。

表1 兩組患者的HBV-DNA載量以及IL-18含量比較(n=80，±s)

表1 兩組患者的HBV-DNA載量以及IL-18含量比較(n=80，±s)

組別 HBV-DNA(×104/L)IL-18(ng/ml) IL-18BP(ng/ml)0.87±0.09351.29±45.6718.89±2.32高載量組 7.82±1.17789.91±93.429.11±1.02 t/P值低載量組26.284/＜0.0513.092/＜0.0511.092/＜0.05

表2 兩組患者的肝纖維化指標(biāo)比較(n=80，±s，ng/ml)

表2 兩組患者的肝纖維化指標(biāo)比較(n=80，±s，ng/ml)

組別 HA(ng/ml) LN(ng/ml) ⅣC(ng/ml)PⅢNP(ng/ml)低載量組 57.43±6.2492.29±10.2772.47±9.239.44±1.18高載量組 92.26±10.31172.51±21.11136.35±17.4516.26±1.92 t/P 值 8.019/＞0.059.383/＞0.058.498/＞0.057.982/＞0.05

2.3 兩組細(xì)胞免疫功能比較 兩組患者的CD3+T細(xì)胞含量無差異(P＞0.05)，高載量組患者的CD4+T細(xì)胞、CD16/65+NK細(xì)胞含量低于低載量組，CD8+T細(xì)胞的含量高于低載量組(均P＜0.05)。見表3。

表3 兩組患者的細(xì)胞免疫功能比較(n=80，%，±s)

表3 兩組患者的細(xì)胞免疫功能比較(n=80，%，±s)

細(xì)胞低載量組 58.12±7.1645.22±5.9522.27±2.2824.56±3.48組別 CD3+T細(xì)胞CD4+T細(xì)胞CD8+T細(xì)胞CD16/65+NK高載量組 58.33±6.8431.67±4.2129.32±3.1516.45±1.92 t/P 值 0.102/＞0.056.182/＞0.055.293/＞0.055.559/＞0.05

2.4 IL-18與HBV-DNA、肝功能、免疫功能的相關(guān)性 單因素回歸分析表明，IL-18含量與 HA、LN、ⅣC、PⅢNP水平以及CD8+T細(xì)胞含量呈正相關(guān)，與CD4+T細(xì)胞、CD16/65+NK細(xì)胞含量呈負(fù)相關(guān)(P＜0.05)。見表4。

表4 慢性乙型肝炎IL-18與HBV-DNA、肝功能、免疫功能的相關(guān)性

3 討論

抗病毒、免疫調(diào)節(jié)、保肝、抗纖維化等藥物是目前治療乙型肝炎的主要藥物，但是患者肝功能損傷的病情仍無法被完全逆轉(zhuǎn)，這與乙型肝炎病毒損傷機(jī)制仍未完全闡明有關(guān)〔4〕。近年來，臨床學(xué)者也致力于探尋慢性乙肝發(fā)生的潛在機(jī)制。IL-18是新近發(fā)現(xiàn)的與炎癥反應(yīng)以及免疫反應(yīng)密切相關(guān)的細(xì)胞因子，參與多個(gè)生理調(diào)節(jié)過程〔5〕。IL-18可以增強(qiáng)Th1免疫細(xì)胞的功能并促進(jìn)IFN-γ的產(chǎn)生，還能促進(jìn)NK細(xì)胞表達(dá)Fas配體來介導(dǎo)細(xì)胞毒性作用;此外，IL-18還具有上調(diào)核轉(zhuǎn)錄因子NK-κB表達(dá)、促進(jìn)多種炎性因子表達(dá)的作用〔6〕。乙型肝炎病毒造成肝細(xì)胞損傷的過程中，最重要的特征是炎癥反應(yīng)亢進(jìn)和免疫功能失調(diào)，而IL-18對(duì)炎癥反應(yīng)以及免疫反應(yīng)均具有調(diào)節(jié)作用〔7〕。IL-18過度表達(dá)與乙型肝炎的發(fā)生和發(fā)展密切相關(guān)，具有明確的促炎作用〔8〕;IL-18結(jié)合蛋白能夠與IL-18結(jié)合并拮抗其促炎作用，具有明確的抑炎功能〔9〕。慢性乙型肝炎病情的發(fā)展與乙型肝炎病毒的感染密切相關(guān)，乙型肝炎病毒載量一直是評(píng)價(jià)乙肝病情的重要指標(biāo)〔10〕。本研究結(jié)果提示乙肝病毒感染與IL-18、IL-18BP表達(dá)異常有關(guān);病毒DNA載量越高，IL-18含量越高、IL-18BP含量越低。乙肝病毒感染后對(duì)機(jī)體直接的影響在于肝臟功能損害以及免疫功能損害。肝功能損害表現(xiàn)為肝臟纖維化進(jìn)程加速，血清中纖維化指標(biāo)含量增加〔11〕;免疫功能損害表現(xiàn)為輔助性T細(xì)胞含量降低、抑制性T細(xì)胞含量增加〔12〕。由于本文樣本選擇對(duì)象的原因，研究結(jié)論可能會(huì)有偏倚，有待于今后擴(kuò)大樣本展開更深入的研究。

1 Mehmedovic A，Mesihovic R，Prnjavorac B，et al.Non-invasive liver fibrosis markers:use of serum levels of cytokines IL 1α and TGFβ1 in management of chronic liver diseases〔J〕.Med Glas(Zenica)，2013;10(1):20-7.

2 倪童天，陸倫根.慢性乙型肝炎患者血清中HA、LN、PCⅢ、TGF-β1、TNF-α含量與肝纖維化程度的關(guān)系探討〔J〕.實(shí)用肝臟病雜志，2010;13(2):142-5.

3 Jegaskanda S，Ahn SH，Kkinner N，et al.Downregulation of interleukin-18-mediated cell signaling and interferon gamma expression by the hepa-titis B virus e antigen〔J〕.J Virol，2014;88(18):10412-20.

4 中華醫(yī)學(xué)會(huì)肝病學(xué)分會(huì)，中華醫(yī)學(xué)會(huì)感染病學(xué)分會(huì).慢性乙型肝炎防治指南，2010年更新版〔J/CD〕.中華實(shí)驗(yàn)和臨床感染病雜志:電子版，2011;15(1):79-100.

5 劉 林，馮成全.慢性乙型肝炎患者血清IL-18的檢測(cè)與臨床價(jià)值〔J〕.成都醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2012;7(4):632-4.

6 王 焱，仰大貴，周曉萍.白介素18與乙肝病毒感染的相關(guān)性研究〔J〕.臨床血液學(xué)雜志，2011;24(8):460-2.

7 李迎杰，李東復(fù)，魏麗娟.HLA-DRB1等位基因多態(tài)性與慢性乙型肝炎、肝硬化關(guān)聯(lián)性的臨床研究〔J〕.中國老年學(xué)雜志，2011;31(11):1953-5.

8 Zhang Z，Zhang S，Zou Z，et al.Hypercytolytic activity of hepatic natural killer cells correlates with liver injury in chronic hepatitis B patients〔J〕.Hepatology，2011;53(1):73-85.

9 江 華，曹 紅，黃巧新，等.慢性乙型肝炎患者白介素18基因多態(tài)性與其表達(dá)水平之間的相關(guān)性研究〔J〕.中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2014;24(23):5797-9.

10 覃羽華，岑光旅，王俊利，等.慢性乙型肝炎患者外周血T細(xì)胞亞群的表達(dá)及意義〔J〕.中國老年學(xué)雜志，2015;35(2):475-6.

11 Poovorawan K，Tangkijvanich P，Chirathaworn C，et al.Circulating cytokines and histological liver damage in chronic hepatitis B infection〔J〕.Hepat Res Treat，2013;2013:757246.

12 徐公民.慢性乙型肝炎患者免疫狀態(tài)變化規(guī)律研究〔J〕.中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2012;22(2):280-1.