閆明 啟曲丹 鐘進(jìn)義

綜合療養(yǎng)干預(yù)措施對(duì)涉核官兵抗氧化能力的效果研究

閆明 啟曲丹 鐘進(jìn)義

目的研究綜合療養(yǎng)干預(yù)措施對(duì)涉核官兵機(jī)體抗氧化能力的影響。方法將60名涉核療養(yǎng)官兵隨機(jī)均分為干預(yù)組和非干預(yù)組，另選取非涉核療養(yǎng)官兵30人作為對(duì)照組。非干預(yù)組、對(duì)照組均按常規(guī)方法療養(yǎng)，干預(yù)組則在常規(guī)療養(yǎng)基礎(chǔ)上施加膳食調(diào)整、營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充、心理疏導(dǎo)等綜合療養(yǎng)干預(yù)措施。檢測(cè)分析各組淋巴細(xì)胞增殖活性、脂質(zhì)過氧化物(MDA)含量、紅細(xì)胞溶血度、總抗氧化能力(T-AOC)等指標(biāo)。結(jié)果療養(yǎng)前干預(yù)組和非干預(yù)組間各項(xiàng)指標(biāo)差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，但兩組與對(duì)照組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。療養(yǎng)后，干預(yù)組的平均MDA含量和紅細(xì)胞溶血度較非干預(yù)組顯著降低，而T-AOC和淋巴細(xì)胞增殖活性則顯著升高，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。結(jié)論綜合性療養(yǎng)干預(yù)措施可減輕氧化損傷，提高涉核官兵機(jī)體的抗氧化能力。

療養(yǎng)；干預(yù)；核輻射；抗氧化

涉核官兵因長(zhǎng)期從事核接觸作業(yè)，容易發(fā)生不同程度的輻射損傷，導(dǎo)致機(jī)體抗氧化能力降低，產(chǎn)生脂質(zhì)過氧化水平升高等生理生化改變[1]。有研究報(bào)道，植物多酚和大豆復(fù)合物等可降低涉核人員的脂質(zhì)過氧化水平，對(duì)輻射損傷有一定的防護(hù)作用[2]。但關(guān)于療養(yǎng)對(duì)涉核官兵氧化損傷防護(hù)的效果，特別是相關(guān)干預(yù)措施的研究應(yīng)用至今尚未見有報(bào)道。本文對(duì)來我院療養(yǎng)的涉核官兵施加膳食調(diào)整、營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充、心理疏導(dǎo)等綜合性干預(yù)措施，并進(jìn)行了綜合療養(yǎng)措施對(duì)涉核官兵抗氧化能力影響的研究。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料①酶標(biāo)儀(美國(guó)Thermo公司生產(chǎn))。②倒置顯微鏡(日本OLYMPUS公司產(chǎn)品)。③CO2培養(yǎng)箱(日本TABAIESOEC公司產(chǎn)品)。④小牛血清(美國(guó)Gelman Sciences公司生產(chǎn))。⑤1640培養(yǎng)基(美國(guó)GLBCD BRL公司生產(chǎn))。⑥血清總抗氧化能力(T-AOC)試劑盒(南京建成生物技術(shù)公司提供)。⑦丙二醛(MDA)試劑盒(南京建成生物技術(shù)公司提供)。

1.2 實(shí)驗(yàn)對(duì)象與分組選取同一部隊(duì)來我院療養(yǎng)的涉核官兵60名，隨機(jī)均分為干預(yù)組和非干預(yù)組，另選取非涉核官兵30人作為對(duì)照組。實(shí)驗(yàn)對(duì)象均為男性，年齡25～40歲，經(jīng)臨床體檢身體符合實(shí)驗(yàn)要求，核接觸的時(shí)間、方式與劑量基本一致，對(duì)本次實(shí)驗(yàn)均知情同意。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)對(duì)象均于入院后第2天清晨抽空腹靜脈血6 mL，每份血樣分不抗凝和肝素抗凝2種處理。不抗凝血樣1 500 r/min離心10 min，分離血清備用；抗凝血樣分離淋巴細(xì)胞和紅細(xì)胞，制成密度為1×109/L的淋巴細(xì)胞懸液和體積分?jǐn)?shù)為1%的紅細(xì)胞懸液備用。

療養(yǎng)期間，實(shí)驗(yàn)對(duì)象均按普通飲食、景觀治療和適量運(yùn)動(dòng)等常規(guī)方法進(jìn)行療養(yǎng)，干預(yù)組則在此基礎(chǔ)上，給予膳食調(diào)整、營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充、心理疏導(dǎo)、規(guī)律活動(dòng)和科普宣教等綜合療養(yǎng)干預(yù)措施。實(shí)驗(yàn)對(duì)象于出院前一天清晨按前述同樣方法進(jìn)行抽血和處理。

1.4 綜合療養(yǎng)干預(yù)措施的主要內(nèi)容

1.4.1 膳食調(diào)整參照2000年頒布的軍人營(yíng)養(yǎng)素供給量(GJB823A-1998)[3]和中國(guó)居民膳食營(yíng)養(yǎng)素參考攝入量2000版(Dietary reference intakes，DRIs)標(biāo)準(zhǔn)[4]，通過膳食計(jì)算，制定營(yíng)養(yǎng)食譜。平均每人每天攝入蛋白質(zhì)為80～85 g，其中來源于魚、蛋、奶、瘦肉等的優(yōu)質(zhì)蛋白約占1/3；適當(dāng)增加富含維生素的食物，每天保證新鮮水果和蔬菜的攝入量500 g以上；補(bǔ)充一些具有解毒作用與可增強(qiáng)抗輻射能力的食物和營(yíng)養(yǎng)素，如黑芝麻、海帶、螺旋藻等；適當(dāng)攝入高碘食品以阻滯碘-131在體內(nèi)沉積；每日沖服銀杏葉茶50～60 g。

1.4.2 營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充療養(yǎng)期間的每周第1天和第4天各服用維生素C 100 mg和維生素B25 mg，第2天服用維生素A膠丸1粒(10 000單位)，第3天服用維生素E膠丸1粒(100 mg)，間隔3 d后再按上述順序和劑量重復(fù)執(zhí)行，一直到療養(yǎng)結(jié)束。

1.4.3 心理疏導(dǎo)請(qǐng)專職心理醫(yī)生和具有心理衛(wèi)生知識(shí)的醫(yī)護(hù)人員多與涉核官兵溝通，減輕官兵對(duì)接觸核輻射作業(yè)的焦慮、憂郁、恐懼心理。組織舞會(huì)、棋牌比賽等文化娛樂活動(dòng)，分散官兵注意力，松弛情緒，平衡心理，消除疲勞。

1.4.4 規(guī)律活動(dòng)在自由活動(dòng)的基礎(chǔ)上，定時(shí)定量運(yùn)動(dòng)，嚴(yán)格控制運(yùn)動(dòng)時(shí)間和強(qiáng)度。運(yùn)動(dòng)方式分為集體和單獨(dú)兩種，集體活動(dòng)一是做健身操和打太極拳，時(shí)間為30 min/d；二是增加風(fēng)景區(qū)景觀治療的次數(shù)和時(shí)間，每5 d 1次，3～3.5 h/次。單獨(dú)活動(dòng)則為日光浴和空氣浴，時(shí)間控制在30 min/d。

1.4.5 科普宣教采用以下方式進(jìn)行：①集中授課，安排專人準(zhǔn)備課件，集中講解核輻射的相關(guān)知識(shí)。②專題交流，針對(duì)涉核官兵可能存在的各種健康問題展開專題交流。③個(gè)別輔導(dǎo)，指定責(zé)任護(hù)士，進(jìn)房間與官兵進(jìn)行面對(duì)面的交流，根據(jù)官兵的身體狀況，有針對(duì)性的實(shí)施個(gè)性化的指導(dǎo)。④其他方式，設(shè)立涉核知識(shí)宣傳欄，發(fā)放宣傳手冊(cè)，增加官兵對(duì)核輻射衛(wèi)生防護(hù)知識(shí)的了解，糾正不良的生活習(xí)慣，提高自我保健能力。

1.5 檢測(cè)指標(biāo)與方法

1.5.1 淋巴細(xì)胞增殖活性用四甲基偶氮噻唑藍(lán)(MTT)法檢測(cè)[5]。將淋巴細(xì)胞懸液接種于96孔板，每孔100 μL，每組設(shè)3個(gè)平行孔。每份血樣分給予和不給予氧化劑2種處理，氧化損傷組加入終濃度100 mmol/L的H2O2，非氧化損傷組只加入同體積蒸餾水。置37℃，5%CO2培養(yǎng)箱內(nèi)24 h后，每孔加入5 g/L MTT液20 μL，繼續(xù)培養(yǎng)4 h，每孔再加入二甲基亞砜(DMSO)200 μL，充分混勻，用酶標(biāo)儀測(cè)定細(xì)胞吸光度(A)值。各組淋巴細(xì)胞增殖活性用平均(A)值表示。

1.5.2 紅細(xì)胞溶血度每個(gè)樣本分為A、B兩個(gè)管，每管加入2 mL紅細(xì)胞懸液。A管加終濃度為100 mmol/L的H2O2，B管加等量蒸餾水，混勻。分別置于37℃水浴箱溫浴0.5 h，3 000 r/min離心5 min，取上清液，用721分光光度計(jì)在540 nm波長(zhǎng)比色。溶血度(%)＝(A管吸光度值×B管吸光度值)×100%。

1.5.3 脂質(zhì)過氧化指標(biāo)用南京建成生物技術(shù)公司提供的試劑盒檢測(cè)血清T-AOC、MDA和SOD 3項(xiàng)指標(biāo)。T-AOC檢測(cè)采用菲啉比色法，MDA檢測(cè)采用硫代巴比妥酸(TBA)比色法，SOD檢測(cè)采用黃嘌呤氧化酶法。

2 結(jié)果

2.1 淋巴細(xì)胞增殖活性療養(yǎng)前干預(yù)組和非干預(yù)組淋巴細(xì)胞增殖活性平均(A)值差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，但兩組與對(duì)照組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。療養(yǎng)后干預(yù)組非氧化損傷組和氧化損傷組的A值分別為(0.83±0.08)和(0.50±0.05)，均較非干預(yù)組顯著升高(P＜0.05，表1)。

表1 淋巴細(xì)胞增殖活性(A值)檢測(cè)結(jié)果(±s)

表1 淋巴細(xì)胞增殖活性(A值)檢測(cè)結(jié)果(±s)

注：與療養(yǎng)后的非干預(yù)組比較，#P＜0.05；與非氧化損傷組比較，△P＜0.05

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2.2 各組療養(yǎng)前后脂質(zhì)過氧化指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果(表2)療養(yǎng)前干預(yù)組和非干預(yù)組T-AOC和SOD差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，但兩組與對(duì)照組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。療養(yǎng)后干預(yù)組和非干預(yù)組的T-AOC和SOD分別為(16.12±1.67)U/mL、(50.40±4.31)U/mL和(15.25±1.52)U/mL、(49.15±5.77)U/mL，均較療養(yǎng)前顯著升高(P＜0.05)，干預(yù)組較非干預(yù)組升高更明顯，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。療養(yǎng)前干預(yù)組和非干預(yù)組MDA和紅細(xì)胞溶血度差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，但兩組與對(duì)照組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。療養(yǎng)后干預(yù)組和非干預(yù)組的MDA和紅細(xì)胞溶血度分別為(4.49±0.37)nmol/L、(22.89±1.13)%和(4.61±0.35)nmol/L、(23.99±1.01)%，均較療養(yǎng)前顯著降低(P＜0.05)，干預(yù)組降低較非干預(yù)組更明顯，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。

表2 各組療養(yǎng)前后脂質(zhì)過氧化指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果(±s)

表2 各組療養(yǎng)前后脂質(zhì)過氧化指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果(±s)

注：與療養(yǎng)前的干預(yù)組和非干預(yù)組比較，*P＜0.05；與療養(yǎng)后的非干預(yù)組比較，#P＜0.05

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3 討論

涉核官兵長(zhǎng)期接觸放射性核素，必然會(huì)引起機(jī)體不同程度的氧化損傷，致使抗氧化能力降低[6]。淋巴細(xì)胞具有很高的輻射敏感性，輻射損傷后抗氧化能力減弱，增殖活性降低。本次實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，療養(yǎng)前干預(yù)組和非干預(yù)組淋巴細(xì)胞增殖活性均低于對(duì)照組，說明涉核官兵抗氧化能力受損，淋巴細(xì)胞增殖活性下降。療養(yǎng)后，干預(yù)組和非干預(yù)組增殖活性均升高，說明經(jīng)過療養(yǎng)機(jī)體抗氧化能力得到了改善；而干預(yù)組升高較非干預(yù)組更明顯，說明干預(yù)組較非干預(yù)組改善更明顯。此外，在體外培養(yǎng)條件下加入氧化劑H2O2后，雖然兩組增殖活性均降低，但干預(yù)組降低的幅度小于非干預(yù)組，這說明干預(yù)組抗氧化能力較非干預(yù)組增強(qiáng)，綜合療養(yǎng)干預(yù)措施對(duì)減輕氧化損傷、提高抗氧化能力更有效。

MDA是脂質(zhì)過氧化反應(yīng)的產(chǎn)物，其含量反映了脂質(zhì)過氧化反應(yīng)程度的強(qiáng)弱和機(jī)體細(xì)胞受自由基損傷的程度[7]。MDA升高，提示脂質(zhì)過氧化反應(yīng)增強(qiáng)，機(jī)體受到了氧化損傷。紅細(xì)胞溶血度與機(jī)體的抗氧化水平密切相關(guān)，發(fā)生脂質(zhì)過氧化反應(yīng)時(shí)，H2O2可交聯(lián)紅細(xì)胞膜上的磷脂和蛋白質(zhì)，也可氧化蛋白質(zhì)的巰基，損傷紅細(xì)胞，發(fā)生溶血[8]。本次研究中，療養(yǎng)前干預(yù)組和非干預(yù)組的MDA和紅細(xì)胞溶血度明顯高于對(duì)照組，說明兩組官兵已受到氧化損傷。經(jīng)過療養(yǎng)，MDA和紅細(xì)胞溶血度均下降，說明氧化損傷減輕；而干預(yù)組較非干預(yù)組下降更明顯，說明綜合療養(yǎng)干預(yù)措施與常規(guī)療養(yǎng)方法相比，在提高機(jī)體抗氧化能力方面更有效。

T-AOC是衡量機(jī)體抗氧化能力的重要指標(biāo)，機(jī)體受到氧化損傷時(shí)T-AOC水平降低。SOD是一類重要的抗氧化酶，它能夠催化超氧化物陰離子自由基轉(zhuǎn)化為水，從而有效降低自由基的損傷[9]。機(jī)體受到輻射損傷后，SOD的數(shù)量和活性都會(huì)發(fā)生改變，抗氧化能力減弱。本次研究結(jié)果顯示，療養(yǎng)前，干預(yù)組和非干預(yù)組的T-AOC、SOD低于非涉核對(duì)照組，說明兩組人員受到了不同程度的氧化損傷。療養(yǎng)后，干預(yù)組和非干預(yù)組的T-AOC、SOD較療養(yǎng)前明顯升高，干預(yù)組升高比對(duì)照組更明顯，也說明了在減輕抗氧化損傷、提高機(jī)體抗氧化能力方面，綜合性療養(yǎng)干預(yù)措施比常規(guī)療養(yǎng)方法更有效。

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ObjectiveTo study the effects of comprehensive recuperation intervention measures on antioxidant capacity among nucleus-related officers and soldiers.Methods60 nucleus-related officers and soldiers were randomly divided into intervention group and non-intervention group，and another non-nucleus-related 30 officers and soldiers were selected to be a control group.The non-intervention group and the control group were given conventional recuperation，while the intervention group were given additional comprehensive recuperation intervention measures such as diet adjustment，nutritional supplement，and psychological counseling.The indicators of lymphocyte proliferative activity，MDA content，erythrocyte hemolysis degree，and total antioxidant capacity(T-AOC)were detected and analyzed.ResultsThe differences of the indicators between the intervention group and the non-intervention group before recuperation had no statistical significance(P＞0.05).But compared with the control group，the differences of both groups showed statistical significance(P＜0.05).After recuperation，the average MDA content and erythrocyte hemolysis degree in the intervention group were remarkably lower than those in the non-intervention group，while T-AOC and lymphocyte proliferative activity remarkably increased，with the difference of statistical significance(P＜0.05).ConclusionComprehensive recuperation intervention measures can alleviate oxidative damage and increase the antioxidant capacity of organism among nucleus-related officers and soldiers.

Recuperation；Intervention；Nuclear radiation；Antioxidant

2012-02-10)

1005-619X(2015)10-1015-03

10.13517/j.cnki.ccm.2015.10.003

266071濟(jì)南軍區(qū)青島第一療養(yǎng)院第一療養(yǎng)區(qū)