劉 威 張洪娟 慕文靜

（黑龍江科倫制藥有限公司·慶安 152400）

芎胡頭痛定膠囊系我廠的中藥復(fù)方膠囊制劑。其功能為祛風(fēng)通絡(luò)止痛，主治外感頭痛、瘀血頭痛、神經(jīng)衰弱頭痛、偏頭痛及各種頑固性頭痛。根據(jù)其功能和主治，本實(shí)驗(yàn)采用SC 注射硝酸甘油注射液致小鼠、大鼠頭痛模型及小鼠醋酸扭體鎮(zhèn)痛實(shí)驗(yàn)，觀察其藥理作用，為臨床用藥提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 材料

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

昆明種小鼠，清潔級(jí)，由黑龍江省腫瘤研究所動(dòng)物室提供。許可證號(hào)：SCXK(黑)2006-008。大鼠：wistan，清潔級(jí)，由長(zhǎng)春吉林大學(xué)白求恩醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，許可證號(hào)SCXK—（吉)2007—0003，實(shí)驗(yàn)設(shè)施許可證號(hào)：實(shí)驗(yàn)動(dòng)物設(shè)施使用許可證：（黑）2006—040。

1.2 藥品

芎胡頭痛定膠囊：自制,膠囊內(nèi)為棕色粉末,每粒膠囊中含內(nèi)容物0.5g,用法用量：口服，一日三次，每次4 粒;大川芎顆粒：棕色顆粒,每袋4g,用法用量：開(kāi)水沖服一次4g，一日三次，批號(hào)20080701(遼寧東方藥業(yè)有限公司)，功能主治：活血化瘀，平肝息風(fēng)，主治頭痛及瘀血頭痛。

芎胡頭痛定膠囊給藥劑量設(shè)計(jì)：根據(jù)日服12 粒/人，每粒內(nèi)容物0.5g，日服共6g。以膠囊內(nèi)容物計(jì)算,按人70 公斤與動(dòng)物表面積系數(shù)折算。藥物配制：取膠囊內(nèi)容物放入乳錐研磨加蒸餾水致所需濃度混懸液。

1.3 試劑

硝酸甘油注射液：性狀：無(wú)色澄明液體。規(guī)格：1ml5mg。批號(hào)：20080703L5241。由山西康寶生物制品股份有限公司提供。批準(zhǔn)文號(hào)：國(guó)藥準(zhǔn)字：H14022197。硝酸甘油注射液造模給藥時(shí)用注射用水稀釋后SC 給藥。

2 方法

2.1 小鼠實(shí)驗(yàn)制備

根據(jù)文獻(xiàn)方法進(jìn)行硝酸甘油致小鼠頭痛預(yù)試驗(yàn)劑量篩選。結(jié)果本實(shí)驗(yàn)硝酸甘油致小鼠出現(xiàn)明顯的撓頭次數(shù)增加的劑量10mg/kg（文獻(xiàn)5～10mg/kg），本實(shí)驗(yàn)硝酸甘油造模劑量定為10mg/kg。

取體重20～24g，小鼠60 只，雌雄兼用，隨機(jī)分六組，每組10 只，即模型組，中藥對(duì)照組（大川芎顆粒）2.0g/kg，芎胡頭痛定膠囊3.0g、1.5g、0.75g/kg。ig給藥，0.2ml/10g，一日一次，連續(xù)5 天，于末次給藥后30min，各組小鼠再SC注射硝酸甘油注射液10mg/kg，0.1ml/10g，于注射后30min觀察（31～60min），（61～90min）內(nèi)小鼠撓頭次數(shù)。組間比較t 檢驗(yàn)。

2.2 大鼠實(shí)驗(yàn)制備

根據(jù)文獻(xiàn)方法進(jìn)行硝酸甘油對(duì)大鼠頭痛預(yù)試驗(yàn)劑量篩選。結(jié)果本試驗(yàn)致小鼠出現(xiàn)明顯頭痛硝酸甘油的劑量是10mg/kg。

取體重220～260g，雌雄兼用，大鼠66 只，隨機(jī)分組，每組11 只，即模型組（蒸餾水），川芎顆粒組1.5g/kg，芎胡頭痛定2.4g、1.2g、0.6g/kg。ig 一次性給藥1ml/100g，于給藥后30min，SC 硝酸甘油注射液1ml/100g，30min 后，即觀察31-60min，61-90min 內(nèi)大鼠出現(xiàn)的撓頭次數(shù)。結(jié)果組間比較t 檢驗(yàn)。

單次給藥實(shí)驗(yàn)觀察撓頭次數(shù)后繼續(xù)給藥，每天1 次，每次1ml/100g，連續(xù)給藥五天，于末次給藥后30min，按單次給藥測(cè)定的指標(biāo)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察。

2.3 醋酸扭體實(shí)驗(yàn)

取小鼠72 只，雌雄各半，隨機(jī)分6 組，每組12 只，分別為芎胡頭痛定3.0g、1.5g、0.75g/kg，川芎顆粒組2.0g/kg，模型組等量生理鹽水，小鼠ig 給藥0.2ml/kg，每天一次，連續(xù)給藥5 天，于末次給藥60 分鐘后，小鼠ip 注射0.6%醋酸溶液0.1ml/10g。5 分鐘后觀察20 分鐘內(nèi)各組小鼠扭體次數(shù)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果與對(duì)照組比較t 檢驗(yàn)。

3 結(jié)果

3.1 芎胡頭痛定膠囊對(duì)小鼠頭痛模型的影響

芎胡頭痛定膠囊高、中劑量組對(duì)硝酸甘油致小鼠頭痛模型撓頭次數(shù)較模型組明顯減少（P＜0.01，P＜0.05)，其高劑量組與陽(yáng)性對(duì)照組無(wú)明顯差異(P＞0.05)，鎮(zhèn)痛效果佳。見(jiàn)表1。

表1 對(duì)硝酸甘油致小鼠頭痛模型的影響（±s）

表1 對(duì)硝酸甘油致小鼠頭痛模型的影響（±s）

注：與模型組比較，**P＜0.01，*P＜0.05。

組別 劑量 動(dòng)物數(shù) 撓頭次數(shù)/30min 31-60min 31-90min模型組 — 10 38.7±13.3 23.0±10.9川芎顆粒組 2.0g/kg 10 17.7±8.55** 9.5±6.42**頭痛定高劑量組 3.0g/kg 10 8.90±5.82** 3.90±3.35**頭痛定中劑量組 1.5g/kg 10 16.4±8.10** 11.8±5.87*頭痛定低劑量組 0.75g/kg 10 23.9±11.3* 16.2±6.18

3.2 芎胡頭痛定膠囊對(duì)大鼠頭痛模型的影響

芎胡頭痛定膠囊高、中劑量組使硝酸甘油致大鼠頭痛模型在31～60min，61～90min 兩個(gè)時(shí)段內(nèi)撓頭次數(shù)明顯少于模型組（P＜0.01，P＜0.05）；其低劑量組撓頭次數(shù)雖減少但差異不顯著（P＞0.05）；且單次給藥大鼠頭痛模型不如多次給藥好（P＜0.05）。見(jiàn)表2、3。

表2 單次給藥對(duì)硝酸甘油致大鼠頭痛模型的影響（－x±s）

表3 多次給藥對(duì)硝酸甘油致大鼠頭痛模型的影響（－x±s）

3.3 對(duì)醋酸致小鼠扭體實(shí)驗(yàn)的影響

芎胡頭痛定膠囊高劑量組對(duì)醋酸致小鼠扭體次數(shù)比模型組明顯減少（P＜0.01）；川芎顆粒組及芎胡頭痛定膠囊中劑量組與模型組比較后接近（P＜0.05）；芎胡頭痛定膠囊低劑量組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。見(jiàn)表4。

表4 對(duì)醋酸所致小鼠扭體試驗(yàn)結(jié)果（－x±s）

4 結(jié)論

根據(jù)文獻(xiàn)給大鼠小鼠SC 注射硝酸甘油注射液造成實(shí)驗(yàn)性頭痛模型，動(dòng)物造模10min后出現(xiàn)雙耳紅，撓頭，煩躁不安現(xiàn)象，提示動(dòng)物出現(xiàn)頭部不適，模型形成。上述現(xiàn)象可持續(xù)3～5小時(shí)左右。根據(jù)預(yù)試結(jié)果，硝酸甘油劑量過(guò)低，頭痛癥狀不明顯，耳紅持續(xù)時(shí)間短；過(guò)高引起死亡。經(jīng)預(yù)試后篩選出大、小鼠劑量為10mg/kg，能出現(xiàn)典型的耳紅，撓頭，躁動(dòng)等癥狀，本試驗(yàn)以撓頭作為主要觀察指標(biāo)，經(jīng)實(shí)驗(yàn)觀察該模型可靠，與人類發(fā)病機(jī)制和表現(xiàn)有一定相似性。

結(jié)果表明：芎胡頭痛定膠囊可顯著的減少SC 硝酸甘油致大鼠、小鼠撓頭次數(shù)，對(duì)醋酸致小鼠扭體的次數(shù)亦明顯減少，表明芎胡頭痛定膠囊對(duì)實(shí)驗(yàn)性動(dòng)物頭痛模型有一定的鎮(zhèn)痛、緩解頭痛作用，且芎胡頭痛定膠囊對(duì)硝酸甘油誘導(dǎo)的大鼠頭痛模型的鎮(zhèn)痛作用多次給藥較單次給藥的藥理作用更為顯著。

[1] 陳奇.中藥藥效研究思路與方法[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，2005：258-270.