夏富益

紅細胞ABO疑難血型檢測分析與處理方案

夏富益

目的 分析紅細胞ABO疑難血型檢測結(jié)果及產(chǎn)生原因,提出解決處理方案。方法 根據(jù)紅細胞ABO疑難血型檢測處理程序，設(shè)計針對性試驗進行正確的紅細胞分型。結(jié)果 共檢測紅細胞ABO疑難血型標本41例,由抗原所致的17例（41.46%），其中亞型15例，抗原減弱或缺失2例；由抗體所致的24例（58.54%），其中冷自身抗體13例，抗體減弱或缺失6例，同種抗體5例。結(jié)論 由抗原或抗體所致的紅細胞ABO疑難血型可根據(jù)相應(yīng)原因，通過設(shè)計針對性實驗進行正確的鑒定或確認。

紅細胞；ABO疑難血型；檢測分析；處理方案

ABO血型系統(tǒng)是輸血中最重要的血型系統(tǒng),正確鑒定ABO血型是輸血前血型血清學(xué)檢查的重要環(huán)節(jié)，關(guān)乎受血者的用血安全。但在ABO血型血清學(xué)檢測過程中,除由于新生兒自然發(fā)生的抗-A、抗-B量很少,只檢測其紅細胞抗原正定型外,常規(guī)檢測、判斷ABO血型,須正反定型相符[1],才能確保ABO血型鑒定的正確性；若出現(xiàn)正反定型不符,則須進入ABO疑難血型鑒定程序，查找出現(xiàn)ABO血型正、反不符的原因,并提出解決處理方案。本研究對41例ABO疑難血型標本檢測結(jié)果及產(chǎn)生原因進行分析，現(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 2012年1月～2014年12月廣元市中心血站血型參比室收到的本血站血液檢測實驗室和本地區(qū)各臨床醫(yī)院ABO疑難血型標本共41例。獻血者標本26例,男11例,女15例,年齡24～51歲。醫(yī)院受血者標本15例,男6例,女9例,年齡21～73歲，其中白血病2例，支原體肺炎3例，肺氣腫4例，自身免疫性溶血性貧血2例，消化道出血1例，外科手術(shù)者3例。

1.2 試劑 單克隆抗-A、抗-B、抗-AB、抗-A1、抗-H、抗球蛋白試劑（抗-IgG+C3d、單價抗-IgG）、A2紅細胞、篩檢紅細胞、譜細胞（由上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司提供）、3%～5% A1、B及O型試劑紅細胞鹽水懸液由本站血型室自制。

1.3 方法

1.3.1 排除人為因素與技術(shù)錯誤，詢問、查閱病歷，了解患者病史（尤其輸血史、妊娠史、和家族史等）、臨床診斷、藥物治療情況[2-4]；對獻血者需查閱相關(guān)獻血檔案及以前血型檢測記錄。

1.3.2 嚴格按照“輸血相容性試驗標準檢測流程[5]”重新抽取血液新鮮標本，確定血型定型試劑和試劑紅細胞有效性，洗滌紅細胞（必要時使用37℃洗滌，使用血清代替血漿），重新檢測ABO正反定型。

1.3.3 如仍為ABO正反定型不符，根據(jù)檢測結(jié)果查找原因，設(shè)計針對性實驗增加項目分析。

1.3.4 （1）出現(xiàn)減弱或缺失抗原的抗原反應(yīng)：I ABO亞型：①正定型增加抗-AB、抗-A1、抗-H；反定型：增加A2紅細胞；②吸收放散試驗陽性確認紅細胞A、B抗原存在；③唾液型物質(zhì)檢測輔助鑒定ABO血型；④有條件可作血型基因檢測和家系調(diào)查。

ⅡA、B抗原減弱：①延長反應(yīng)時間（放置≥30min）；②吸收放散試驗及唾液型物質(zhì)檢測；③既往血型調(diào)查；④血型基因檢測；⑤臨床追蹤（一般病情緩解后血型抗原恢復(fù)）。

（2）抗體減弱或缺失：①延長反應(yīng)時間，室溫下孵育15～30min；②增加血清量（紅細胞：血清比例1∶2或1∶3以上）；③于室溫及4℃檢查血清中的抗體，用A、B、O（或酶處理的A、B、O）及自身紅細胞進行檢查（必要時需進行冷抗體自身吸收）；④確定受血者年齡及臨床診斷（如新生兒、免疫病、輸血史、異型血漿輸注等）。

（3）冷自身抗體：①將血清和紅細胞分別在37孵育后再混合；②用37℃溫鹽水洗滌紅細胞；③45℃熱放散3min；④（抗體濃度較高時）巰基試劑(DTT)處理紅細胞[6]；⑤自身吸收去除血清中的自身冷抗體。

（4）室溫反應(yīng)的同種抗體：①用譜細胞做抗體鑒定；②選擇沒有相應(yīng)抗原的A、B細胞做反定型。

2 結(jié)果

通過對41例血液樣本進行上述試驗，發(fā)現(xiàn)造成ABO血型正反不符的主要原因為血型抗原減弱或缺失、冷自身抗體、抗體減弱或缺失及同種抗體。見表1～4。

表1 41例ABO血型正反不符檢測結(jié)果分析（n）

表2 41例ABO血型正反不符原因統(tǒng)計［n（%）］

表3 抗原所致ABO血型正反不符原因統(tǒng)計［n（%）］

表4 抗體所致ABO血型正反不符原因統(tǒng)計［n（%）］

3 討論

3.1 通常認為，ABO疑難血型是指排指除人為因素、技術(shù)操作錯誤外，血型試劑有效性確定的情況下，紅細胞定型與血清定型出現(xiàn)矛盾，不能呈現(xiàn)ABO血型抗原和抗體的互補結(jié)果，與年齡、疾病、遺傳、藥物、臨床治療等諸多因素有關(guān)。主要包括多或少的抗原、抗體反應(yīng)，抗原、抗體的不凝集和弱凝集結(jié)果。

3.2 在本文的41例正反定型不符樣本中，因抗原所致的17例（41.46%），其中亞型15例，抗原減弱或缺失2例；因抗體所致的24例（58.54%），其中冷自身抗體13例，抗體減弱或缺失6例，同種抗體5例。其原因分類為：（1）紅細胞（抗原）：包括A、B抗原亞型、血液?。ㄈ绨籽　⒐撬柙錾惓＞C合征）所致抗原減弱及機體含過多血型物質(zhì)（如腹腔腫瘤）導(dǎo)致凝集強度減弱等。其中亞型主要來自成人，未患使抗原、抗體減弱疾病，有明顯的血清學(xué)特征，抗原減弱或血清中出現(xiàn)意外抗體（抗-A1、抗-B），具有遺傳基礎(chǔ)；（2）血漿：先天性無ABO抗體；年齡（4個月內(nèi)嬰兒、老年人），低丙種球蛋白血癥，單采血漿或血漿置換治療及大量輸液等所致抗體減弱；體內(nèi)存在冷自身抗體，輸注異型血漿，ABO亞型產(chǎn)生的抗體與室溫反應(yīng)性同種抗體（主要為MN、Lewis、P血型系統(tǒng)IgM類同種抗體）所致的抗體增多等。

3.3 ABO血型疑難鑒定通過查閱相關(guān)資料與病史分析，設(shè)計針對性實驗，通常均能獲得較為滿意結(jié)果。對獻血者的血液無論什么原因，只要明確ABO血型正反不符，需對其建立相關(guān)檔案，僅供血型研究之用。對正反定型不符的受血者，其疑難血型鑒定需要一定的時間，在ABO血型難以確定（如：ABO血型系統(tǒng)的亞型表型，或其它生理、病理因素引起的ABO血型鑒定困難），生命體征不平穩(wěn)，危及生命的急性失血的緊急情況下，須向受血者充分告知并取得其書面知情同意可首選主側(cè)交叉配血陰性的O型紅細胞與AB型血漿輸注；血型確認后，若需繼續(xù)輸血治療，應(yīng)重新抽取受血者血液標本做交叉配血，應(yīng)遵循輸注與受血者ABO同型的交叉配血陰性紅細胞，若交叉配血陽性則應(yīng)輸注O型紅細胞的原則[7]，其中冷自身抗體可采用凝聚胺方法在37℃條件下配血，保溫輸注可有效提高受血者配血成功率[8]；產(chǎn)生同種抗體時，應(yīng)及時記錄并告知受血者，以后需輸血時，即使抗篩陰性也應(yīng)選擇相應(yīng)抗原陰性的血液輸用，避免引起回憶性免疫反應(yīng)導(dǎo)致溶血性輸血反應(yīng)發(fā)生的不良后果[9]。

［1］ 李勇，楊貴貞.人類紅細胞血型學(xué)實用理論與實驗技術(shù)[M].北京：中國科學(xué)技術(shù)出版社,1999：126-127.

［2］ 蘭炯采，劉景漢，馬麗紅.輸血前試驗中值得研討的若干問題[J].中國輸血雜志，2013，26（1）：1-2.

［3］ 丁蘇鄂.抗體效價與同種自身抗體的檢測[A]//劉達莊.免疫血液學(xué)[M].上海：上?？茖W(xué)技術(shù)出版社，2002：39-217.

［4］ 蘭炯采，陳靜嫻，武平英，等.推薦疑難配血三步分析法[J].中國輸血雜志，2010，3（4）：43-44.

［5］ 臨床輸血規(guī)范流程協(xié)作組.輸血相容性試驗標準檢測流程[J].中國輸血雜志，2012，25（9）：815-817.

［6］ 李勇，楊貴貞.人類紅細胞血型學(xué)實用理論與實驗技術(shù)[M].北京：中國科學(xué)技術(shù)出版社,1999,289-290.

［7］ 中國醫(yī)師協(xié)會輸血科醫(yī)師分會，中華醫(yī)學(xué)會臨床輸血學(xué)分會.特殊情況緊急搶救輸血推薦方案[J].中國輸血雜志，2014，27（1）：1-2.

［8］ 陶翠華，張真路，王文武.高效價冷自身抗體致血型鑒定和交叉配血困難的處理方法[J].臨床血液學(xué)雜志，2011，24（4）：201-203.

［9］ 孔文兵，賴福才，彭道波，等.紅細胞血型不規(guī)則抗體與安全輸血[J].中國輸血雜志，2014，27（9）：929-930.

10.3969/j.issn.1009-4393.2015.35.050

四川 628017 廣元市中心血站 (夏富益)