李　穎，許秀舉，鄧　洋（包頭醫(yī)學院營養(yǎng)研究所，內蒙古包頭014060）

苦蕎茶對衰老小鼠肝組織SOD和MDA影響的研究

李穎，許秀舉*，鄧洋
（包頭醫(yī)學院營養(yǎng)研究所，內蒙古包頭014060）

摘要：研究苦蕎茶對衰老小鼠肝組織SOD、MDA是否有影響。采用動物實驗的方法對造模衰老小鼠的SOD和MDA酶進行研究。苦蕎茶低、中、高劑量組小鼠的肝組織SOD含量高于衰老小鼠模型組，低于空白對照組；苦蕎茶低、中、高劑量組小鼠的肝組織MDA含量低于衰老小鼠模型組。苦蕎茶能有效地降低衰老對小鼠的肝組織SOD和MDA的影響。

關鍵詞：苦蕎茶；衰老；SOD；MDA

黃酮類化合物是一種很強的抗氧化劑，可有效清除體內的氧自由基，這種抗氧化作用可以阻止細胞的退化、衰老，也可阻止癌癥的發(fā)生[1-3]。研究發(fā)現，苦蕎茶中含有黃酮類物質，其主要成分為蘆丁[4]。蘆丁含量占苦蕎總黃酮的70%～90%，具有降低毛細血管脆性，改善微循環(huán)的作用，現在臨床上主要用于糖尿病、高血壓的輔助治療。本試驗通過對衰老模型小鼠的肝組織SOD和MDA酶的研究，探討苦蕎茶對抗氧化及抗衰老的作用。

1　對象與方法

1.1研究對象

昆明種小鼠，均為雄性，體重（20.89±2.62）g，由內蒙古大學實驗動物中心提供，為清潔級動物。合格證號：SCX（蒙）2002-0001。

1.2主要儀器及試劑

1.2.1儀器

TGL-16B高速臺式離心機：上海分析儀器廠；儀表恒溫水浴鍋：北京金北德工貿有限公司；S-Z型快速混勻器：江蘇金壇市金城國勝實驗儀器廠；T6新悅分光光度計：北京普析通用儀器有限公司；HC.TP11B.5架盤藥物天平：北京醫(yī)用天平廠；TG328A電光分析天平：上海天平儀器廠。

1.2.2試劑

D-半乳糖（批號060227）：美國Amresco公司；超氧化物歧化酶（SOD）檢測試劑盒（批號20130205）、丙二醛（MDA）檢測試劑盒（批號20130205）、考馬斯亮蘭蛋白測定試劑盒（批號20130104）：南京建成生物工程研究所；苦蕎茶（批號2012-11-03）：包頭市娜其格爾食品有限公司。

1.3研究方法

本研究采用動物實驗方法進行，試劑采用南京建成研究所提供試劑盒的方法測定超氧化物歧化酶，采用SPSS11.5統計軟件分析試驗結果。

動物分組及處理：將60只健康昆明種雄性小鼠，隨機分為5組，每組12只，分別為空白對照組、衰老模型組、低劑量苦蕎茶組、中劑量苦蕎茶組和高劑量苦蕎茶組。其中苦蕎茶低、中和高劑量組分別按苦蕎茶2.5、5、10 g/kg的劑量給予。試驗期間空白對照組每天腹腔注射生理鹽水120 mg/kg，其余4組每天腹腔注射D-半乳糖生理鹽水溶液120 mg/kg，連續(xù)42 d，適應性喂養(yǎng)4 d開始灌胃，空白對照組和衰老模型組每天灌胃涼白開水（5 g/kg），其余各組按相應的苦蕎茶劑量進行灌胃，連續(xù)42 d。在試驗期間，每周稱一次體重，觀察小鼠的一般情況。第42天時斷頭處死小鼠，稱體重、肝重量，取肝組織測定SOD和MDA的含量。

2　結果

2.1小鼠體重變化情況

小鼠體重變化情況見表1。

表1　各組小鼠每周平均體重值Table 1　The weekly average weight of each groups

如表1所示，在試驗進程中各組小鼠體重逐漸增加，空白對照組與3個劑量組之間平均體重無顯著性差異（P＞0.05），而衰老模型組與其它4組之間的平均體重有顯著性差異（P<0.01），說明D-半乳糖對小鼠體重增長有明顯影響。

2.2肝組織SOD檢測情況

各試驗組小鼠肝SOD的含量見表2。

表2　各試驗組小鼠肝SOD的含量Table 2　The SOD in the liver tissue of the experimental group

方差齊性檢驗顯示5組動物SOD含量方差齊。采用單因素方差分析，結果顯示空白對照組與衰老模型組和苦蕎茶低劑量組相比較，結果有統計學差異（P＜0.05）；衰老模型組與苦蕎茶低、中、高劑量組相比較，結果有統計學差異（P＜0.05）。提示苦蕎茶對衰老小鼠肝組織SOD酶的降低有一定的保護作用。

2.3肝組織MDA檢測情況

方差齊性檢驗顯示5組動物MDA含量方差齊。采用單因素方差分析，結果顯示空白對照組與衰老模型組和苦蕎茶高劑量組相比較，結果有統計學差異（P＜0.01），與苦蕎茶低、中劑量組相比較，結果有統計學差異（P＜0.05）；衰老模型組與苦蕎茶低、中、高劑量組比較均有顯著性差異（P<0.01）；苦蕎茶高劑量組與低、中劑量組比較均有顯著性差異（P<0.01）；苦蕎茶中劑量組和低劑量組之間無統計學意義（P＞0.05）。提示苦蕎茶對衰老小鼠肝組織MDA酶的升高有一定的抑制作用。結果見表3。

表3　各試驗組小鼠肝組織MDA測定結果比較Table 3　The comparison of mouse liver tissue MDA of each experimental groups

3　討論

機體代謝過程中會產生氧自由基（包括·O2-、·OH、1O2、H2O2），生理正常情況下，能夠被體內的抗氧化酶（如SOD、GSH-Px等）或抗氧化劑迅速清除，使體內自由基的產生和清除處于平衡狀態(tài)，一般不會對細胞產生損傷作用。隨著年齡的增長，機體內抗氧化酶的活性會下降，使體內清除自由基的能力下降。當氧自由基活性會下降，使體內清除自由基的能力下降。當氧自由基與生物膜中的不飽和脂肪酸發(fā)生過氧化反應時，生物膜的結構和功能被破壞，從而引起細胞的衰老和死亡[5]。

衰老模型的建立是評價抗衰老藥物以及研究抗衰老機制的關鍵，本試驗所使用的是D-半乳糖所致衰老模型小鼠。一段時間內，連續(xù)對小鼠進行腹腔注射大量的D-半乳糖，而D-半乳糖在還原酶作用下生成的半乳糖醇不能被細胞代謝，而沉積在細胞內，會增大細胞滲透壓，破壞細胞的正常代謝，最終導致衰老的發(fā)生[6-7]。

研究顯示，小鼠在42 d喂飼苦蕎茶，腹腔注射D-半乳糖造模后，空白對照組與衰老模型組相比較，結果有統計學差異（P<0.05），提示造模成功。衰老模型組與苦蕎茶低、中、高劑量組相比較，飲用苦蕎茶可顯著減少肝組織由于衰老引起的SOD酶的降低（P<0.05），降低肝組織由于衰老引起的MDA酶的升高（P<0.01）。提示苦蕎茶可通過抗氧化作用，從而對衰老導致的肝組織SOD酶的下降起到保護作用，對衰老小鼠肝組織MDA酶的升高有一定的抑制作用。

參考文獻：

[1]彭芳,陳植和.黃酮類化合物的生物活性[J].國外醫(yī)藥(植物藥分冊),1998(5):207-209

[2]毛雪石.黃酮類化合物的抗腫瘤活性[J].國外醫(yī)學.藥學分冊, 1995(2):92-96

[3]劉成倫,唐德容.黃酮類化合物抗氧化性質的研究進展[J].食品研究與開發(fā),2006(5):158-160,168

[4]王靜波,趙江林,彭鐮心,等.苦蕎芽中黃酮類化合物含量及其抗氧化性的研究[J].現代食品科技,2013(5):965-968

[5]Serranoa F,Klann E.Reactive oxygen species and synaptic plasticity in the aging hippocampus[J].Ageing Res Rev,2004,3(4):431-433

[6]石根勇,呂中明,陳新霞,等.建立衰老模型的實驗研究[J].江蘇預防醫(yī)學,2003,14(2):63-64

[7] 許揚,吳濤,顧佳黎,等.D-半乳糖誘導衰老動物模型研究進展[J].中國老年學雜志,2009(29):1710-1712

DOI：10.3969/j.issn.1005-6521.2015.18.011

收稿日期：2014-03-30

作者簡介：李穎（1989—），女（漢），在讀研究生，研究方向：營養(yǎng)保健與食品衛(wèi)生安全。

Study the Effect of Buckwheat Tea on Liver Tissue SOD and MDA of Aging Mice

LI Ying，XU Xiu-ju*，DENG Yang
（Nutrition Research Institute，Baotou Medical College，Baotou 014060，Inner Mongolia，China）

Abstract：Studying the effect of buckwheat tea on aging mice liver tissue related enzymes.Studying the molding aging mice liver tissue related enzymes through animal experimental method.Low，medium and high dose of the buckwheat tea groups of mice liver tissue SOD content was higher than that of aging mice model group，lower than the normal control group.And the Low，medium and high dose of the buckwheat tea groups of mice liver tissue MDA content was higher than that of aging mice model group，lower than the normal control group. Buckwheat tea can effectively reduce the damage to the aging mice liver tissue SOD and MDA.

Key words：buckwheat tea；aging；SOD；MDA