劉慧

【摘 要】目的：探討免疫組織化學(xué)檢測用于乳腺病理診斷中的價(jià)值。方法：選取我院2012年9月至2014年9月50例乳腺病患者，并選取同時(shí)期50例健康者，均應(yīng)用免疫組織化學(xué)檢測，分析其檢測結(jié)果。結(jié)果：免疫組織化學(xué)檢測對(duì)乳腺疾病檢查時(shí)，能夠區(qū)分良惡性腫瘤、評(píng)估間質(zhì)浸潤，觀察到MEC蛋白表達(dá)情況。結(jié)論：免疫組織化學(xué)檢測應(yīng)用到乳腺病理診斷中存在明顯臨床價(jià)值，值得應(yīng)用推廣。

【關(guān)鍵詞】免疫組織化學(xué)；乳腺；病理診斷

乳腺癌在臨床中是最為常見的一種女性惡性腫瘤疾病，對(duì)女性健康造成極為嚴(yán)重危害。目前臨床中存在多種指標(biāo)對(duì)于乳腺癌預(yù)后有決定性作用[1]。免疫組織化學(xué)檢測在一定程度上可以區(qū)分乳腺腫瘤的良、惡性，觀察導(dǎo)管-小葉原位癌、浸潤癌等[2]。本文選取50例乳腺病患者，分析免疫組織化學(xué)檢測的臨床應(yīng)用價(jià)值。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取我院2012年9月至2014年9月50例乳腺病患者，均為女性，年齡26～44歲，平均年齡（31.6±3.8）歲。經(jīng)病理學(xué)診斷顯示，患者中良性病變32例，惡性腫瘤18例。并選取同時(shí)期50例健康者，均為女性，年齡23～45歲，平均年齡（32.8±4.2）歲。

1.2 方法

采集患者標(biāo)本，對(duì)其進(jìn)行免疫組織化學(xué)SP法進(jìn)行染色檢測。對(duì)標(biāo)本進(jìn)行脫蠟、水化，以PBS洗2～3次，每次5min；將3%H2O2（80%甲醇）滴到TMA上，在室溫狀態(tài)下靜置10min；再予以PBS洗2～3次，5min/次；對(duì)標(biāo)本進(jìn)行抗原修復(fù)處理；PBS洗2～3次，5min/次；滴入正常山羊血清封閉液，在室溫狀態(tài)下放置20min，將多出的液體完全甩出。滴入Ⅰ抗50μl，在室溫狀態(tài)下放置1h或4℃穩(wěn)定下過夜或在37℃環(huán)境下放置1h。當(dāng)4℃溫度下過夜后應(yīng)以37℃進(jìn)行45min的復(fù)溫處理。PBS洗3次，5min/次；滴入Ⅱ抗40～50μl，在室溫下放置，或37℃溫度下放置1h；在Ⅱ抗中可加入0.05%tween-20。PBS洗3次，5min/次；應(yīng)用DAB顯色5～10min，經(jīng)顯微鏡觀察染色情況；PBS或自來水沖洗10min；應(yīng)用蘇木精進(jìn)行復(fù)染2min，以鹽酸酒精進(jìn)行合理分化；自來水沖洗10～15min；然后予以脫水、透明、封片、鏡檢。

1.3 觀察指標(biāo)

區(qū)分患者乳腺良、惡性腫瘤；評(píng)估間質(zhì)浸潤；區(qū)分導(dǎo)管與小葉性腫瘤；相關(guān)蛋白表達(dá)情況。

2 結(jié)果

與健康者進(jìn)行對(duì)比，乳腺發(fā)生良性增生時(shí)存在肌上皮細(xì)胞（myoepithelial cell，MEC），腺性腺病并無MEC。大部分乳腺發(fā)生惡性腫瘤癥狀時(shí)無MEC。所以觀察MEC是否存在對(duì)于乳腺良性與惡性腫瘤是一個(gè)主要依據(jù)。對(duì)健康者乳腺組織HE切面，可極易發(fā)現(xiàn)MEC，但因有的乳腺良性增生性疾病極有可能導(dǎo)致乳腺細(xì)胞成分及小葉結(jié)構(gòu)發(fā)生變化，使得MEC在進(jìn)行辨別存在較大困難。

3 討論

在臨床中對(duì)標(biāo)本進(jìn)行檢查時(shí)，比較常用的MEC標(biāo)記物為肌源性蛋白、P63、S-100蛋白、CD10、高分子量細(xì)胞角蛋白等[3]。

3.1 肌源性蛋白

肌源性蛋白內(nèi)肌動(dòng)蛋白（Actin）、肌特異性肌動(dòng)蛋白（muscle-specificactin，MSA）、α-平滑肌肌動(dòng)蛋白（α-smooth muscleactin，α-SMA）、平滑肌肌球蛋白重鏈（smooth muscle myosin heavy chain，SMMHC）、Calponin均會(huì)于乳腺M(fèi)EC胞漿內(nèi)存在表達(dá)。Actin、MSA、α-SMA對(duì)于判定MEC是較為常用的幾種標(biāo)記物，存在較為明顯的敏感性及特異性。Calponin、SMMHC存在更有效的敏感程度及特異性，對(duì)于判定乳腺M(fèi)EC也成為首選抗體。

3.2 P63

在多個(gè)器官的基底細(xì)胞核中均存在P63表達(dá)，乳腺組織內(nèi)P63表達(dá)存在明顯特異性，對(duì)于乳腺腺上皮細(xì)胞與肌纖維母細(xì)胞，其只可以對(duì)MEC進(jìn)行有效表達(dá)[4]。所以對(duì)于良性病變與惡性腫瘤，可以應(yīng)用P63作為有效的肌上皮細(xì)胞標(biāo)記物。

3.3 S-100

S-100蛋白為酸性鈣結(jié)合蛋白，分成α、β兩個(gè)亞單位。對(duì)于硬化性腺病、纖維囊性病、導(dǎo)管內(nèi)乳頭狀瘤等乳腺良性病變，MEC內(nèi)S-100具有陽性表達(dá)，對(duì)于腺上皮細(xì)胞、間質(zhì)細(xì)胞和基底膜呈現(xiàn)陰性表達(dá)[5]。對(duì)于導(dǎo)管原位癌、小葉原位癌，腫瘤細(xì)胞及周圍所存MEC具有陰性表達(dá)。因此S-100蛋白能夠?qū)θ橄倭夹圆∽?、?dǎo)管/小葉原位癌進(jìn)行有效檢測。

3.4 CD10

CD10是一種較為普通的急性淋巴母細(xì)胞性白血病抗原，應(yīng)用到造血系統(tǒng)中對(duì)惡性腫瘤具有良好診斷價(jià)值，對(duì)于乳腺組織的MEC具有良好表達(dá)。MEC內(nèi)CD10呈現(xiàn)陽性表達(dá)，對(duì)于血管平滑肌細(xì)胞、腺上皮細(xì)胞無明顯表達(dá)，所以對(duì)于浸潤性癌、乳腺腺病具有明顯鑒別價(jià)值[6]。

3.5 高分子量細(xì)胞角蛋白

高分子量CK內(nèi)CK5/6、CK14和CK17均為基底細(xì)胞角蛋白，對(duì)于乳腺組織內(nèi)MEC胞漿存在明顯陽性表達(dá)。CK14、CK17對(duì)比CK5/6存在更為顯著敏感性，通常在全部乳腺M(fèi)EC內(nèi)均可以表達(dá)。對(duì)于乳腺導(dǎo)管/小葉原位癌，CK14、CK17均無表達(dá)現(xiàn)象，對(duì)于乳腺浸潤性癌通常9%～31%腫瘤細(xì)胞存在CK14、CK17的明顯表達(dá)，CK5/6對(duì)于腫瘤細(xì)胞存在陽性表達(dá)。

參考文獻(xiàn)

[1]汪勤，唐曼，劉婷珽.免疫組織化學(xué)檢測在乳腺病理診斷中的作用[J].安徽醫(yī)藥，2014，22（5）：957.

[2]鄭明軍.免疫組織化學(xué)技術(shù)在病理診斷中的應(yīng)用和要求[J].實(shí)用醫(yī)技雜志，2014，15（4）：396.

[3]張景華，王保信，汪萍，等.乳腺癌組織中HSG和EGFR的表達(dá)及其與臨床病理特征的關(guān)系[J].實(shí)用癌癥雜志，2013，23（1）：216.

[4]霍臨明，李挺，劉蔭華，等.對(duì)美國臨床腫瘤學(xué)會(huì)/美國病理醫(yī)師學(xué)院乳腺癌激素受體免疫組織化學(xué)檢測指南應(yīng)用的專家座談會(huì)簡介[J].中華病理學(xué)雜志，2010，39（11）：791-792.

[5]王紅群，李道旺，吳正升.536例乳腺癌的臨床病理特征及預(yù)后分析[J].安徽醫(yī)藥，2013，17（9）：1536-1538.

[6]張景華，王保信，汪搖萍，等.乳腺癌組織中HSG和EGFR的表達(dá)及其與臨床病理特征的關(guān)系[J].實(shí)用癌癥雜志，2013，28（1）：24-27.