許宏昌，張紅軍，王月娥

(大連弘豐制藥有限公司，遼寧 大連 116052)

尼群地平雜質(zhì)A的合成及結(jié)構(gòu)確認(rèn)①

許宏昌，張紅軍，王月娥

(大連弘豐制藥有限公司，遼寧 大連 116052)

目的：合成尼群地平雜質(zhì)A并確認(rèn)結(jié)構(gòu)。方法：尼群地平于冰醋酸和稀硫酸中與硫酸鈰反應(yīng)得雜質(zhì)A。結(jié)果：收率約70%。結(jié)論：所得產(chǎn)物經(jīng)UV、IR、MS和HMR等確認(rèn)其結(jié)構(gòu)。

尼群地平；尼群地平雜質(zhì)A；合成；結(jié)構(gòu)確認(rèn)

尼群地平(Nitrendipine)為第二代二氫吡啶類鈣拮抗劑，中國(guó)藥典二部2010年版[1]和歐洲藥典EP8.0版[2]均收載。2, 6-二甲基-4-(3-硝基苯基)吡啶-3, 5-二甲酸甲基乙基酯為尼群地平的有關(guān)物質(zhì)之一，英國(guó)藥典2000版及歐洲藥典4.0版即開(kāi)始將其作為關(guān)鍵控制雜質(zhì)，稱之為雜質(zhì)A(Nitredipine Impurity A)。為提高尼群地平藥品標(biāo)準(zhǔn)的需要，我們于2003年合成了雜質(zhì)A并經(jīng)UV、IR、MS和HMR等確認(rèn)其結(jié)構(gòu)。該物質(zhì)經(jīng)中國(guó)藥品生物制品檢定所岳志華等[3]復(fù)核，正式列入中國(guó)藥典二部2010年版作為國(guó)家對(duì)照品分發(fā)并稱之為雜質(zhì)I。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

YRT-3熔點(diǎn)儀(天津大學(xué)精密儀器廠)，UV-2102OPCS型紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)(尤尼柯(上海)儀器有限公司)，Avatar 360型紅外光譜儀(美國(guó)尼高力公司)，HP 110-MSD 型質(zhì)譜儀(美國(guó)惠普公司)，Varian INOVA 400型核磁共振儀(美國(guó)瓦里安公司)。

1.2 試藥

尼群地平(大連弘豐制藥有限公司)，硫酸鈰(Ce(SO4)2)·4H2O(分析純)，雜質(zhì)A歐洲對(duì)照品(EP)(購(gòu)自英國(guó))。

2 方法

2.1 雜質(zhì)A的制備

尼群地平雜質(zhì)A的合成路線如圖1。具體方法如下：尼群地平0.5g，溶于冰醋酸20mL和稀硫酸10mL中，加鄰二氮菲指示液2滴，攪拌下緩慢滴加0.1mol/L硫酸鈰溶液15.1mL至紅色消失；調(diào)pH近中性，放置析出沉淀，濾出沉淀，水洗，于40℃以下干燥，得白色結(jié)晶粉末0.35g，收率70%。

圖1 合成路線

2.2 測(cè)定方法2.2.1 熔點(diǎn)測(cè)定

取雜質(zhì)A適量，研成細(xì)粉，按中國(guó)藥典2005版附錄熔點(diǎn)測(cè)定第一法測(cè)定熔點(diǎn)。

2.2.2 紫外測(cè)定

取雜質(zhì)A適量，用無(wú)水乙醇制成每1mL中約含20μg的溶液。將溶液置1cm石英吸收池內(nèi)，以無(wú)水乙醇為參比，在可見(jiàn)-紫外分光光度計(jì)上，于200～400nm掃描，記錄紫外吸收光譜及其數(shù)據(jù)。

2.2.3 紅外測(cè)定

取雜質(zhì)A約1mg，按溴化鉀壓片法制備紅外掃描試樣，于紅外分光光度計(jì)上于400～4000cm-1區(qū)間掃描，記錄紅外光譜及主要光譜數(shù)據(jù)。

2.2.4 質(zhì)譜測(cè)定

稱取雜質(zhì)A適量，置于棕色容量瓶中，加入甲醇進(jìn)行溶解并稀釋，配制濃度為0.1mg/mL的供試品溶液。設(shè)定離子源為ESI源，流動(dòng)注射泵直接進(jìn)樣的流速為5μL/min，毛細(xì)管電壓為4000V，毛細(xì)管溫度為325℃，鞘氣流速為10L/min，輔助氣流速為0.15L/min，碰撞氣為氦氣，鞘氣和輔助氣為氮?dú)?，質(zhì)荷比的掃描范圍為210～400m/z，在正離子模式下，進(jìn)行一級(jí)離子全掃描，記錄雜質(zhì)A的質(zhì)譜圖及各離子的數(shù)據(jù)。

2.2.5 核磁共振譜測(cè)定

取雜質(zhì)A適量，置于直徑5mm核磁共振樣品管中，加入適量的氘代三氯甲烷使其完全溶解。在測(cè)試溫度25℃，環(huán)境濕度35%下，調(diào)整儀器的觀察頻率、譜寬、脈沖寬度、采集時(shí)間、脈沖延遲時(shí)間、累加次數(shù)等參數(shù)，經(jīng)鎖場(chǎng)、勻場(chǎng)后測(cè)定雜質(zhì)A樣品的氫譜的質(zhì)子化學(xué)位移值?；瘜W(xué)位移δ精確到±0.01ppm，偶合常數(shù)精確到±0.1Hz。另按照碳核磁共振波譜儀操作規(guī)程，調(diào)整儀器的參數(shù)，分別以適宜寬度的脈沖序列，測(cè)定雜質(zhì)A樣品的碳化學(xué)位移值。

3 結(jié)果與討論

3.1 結(jié)果

3.1.1 熔點(diǎn)

毛細(xì)管法測(cè)得雜質(zhì)A的熔點(diǎn)為mp 60.5～61.5℃，與歐洲對(duì)照品一致。

3.1.2 紫外光譜

尼群地平雜質(zhì)A的紫外吸收?qǐng)D譜沒(méi)有最大吸收峰，并與歐洲對(duì)照品完全一致。

3.1.3 紅外圖譜

尼群地平雜質(zhì)A及其歐洲對(duì)照品(EP)的特征紅外吸收峰位置(cm-1)、透光率(T%)見(jiàn)來(lái)源見(jiàn)表1。

雜質(zhì)A的紅外吸收?qǐng)D譜與歐洲對(duì)照品(EP)所得圖譜完全一致。另與尼群地平的紅外圖譜比較，雜質(zhì)A缺少一個(gè)3318cm-1γ(NH)峰，與其結(jié)構(gòu)特征相符。

表1 雜質(zhì)A與其歐洲對(duì)照品的特征紅外吸收峰

3.1.4 質(zhì)譜測(cè)定

正離子掃描方式下，雜質(zhì)同A的質(zhì)譜圖見(jiàn)圖2。分析圖1得到，質(zhì)荷比(m/z)359，相對(duì)強(qiáng)度12%的準(zhǔn)分子離子峰為雜質(zhì)A的加氫峰；質(zhì)荷比381的基峰為雜質(zhì)A的加鈉峰，分子離子峰的m/z與雜質(zhì)A的計(jì)算分子量358符合。

圖2 雜質(zhì)A質(zhì)譜圖

3.1.5 核磁共振譜位移歸屬

雜質(zhì)A的1H-NMR(CDCl3)和13C-NMR(CDCl3)核磁共振譜位移歸屬分別如下：

1H-NMR(CDCl3) 譜位移歸屬δ/ppm：1.08(3H,t,7.14,11-CH3)，2.63(3H, s, 2-CH3)，2.64(3H, s, 6-CH3)，3.59(3H,s,9-CH3)，4.06(2H, q, 7.14, 10-CH2)，7.57 (1H, m, 5′或6′-H)，7.68(1H, m, 6′或5′-H)，8.18 (1H, m, 2′-H)，8.27 (1H, m, 4′-H)。

13C-NMR(CDCl3)譜位移歸屬 δ/ppm：156.4(C-2)，126.7(C-3)，143.7(C-4)，126.5(C-5)， 156.3(C-6)，23.3(C-2-CH3)， 23.3(C-6-CH3)，52.6(C-9)，61.8(C-10)，13.9(C-11)， 167.9(C-7)，167.3(C-8), 150.0(C-1′)，123.6 (C-2′)，138.2(C-3′)，123.3 (C-4′)，129.4(C-5′)，134.4(C-6′)。

3.2 討論

雜質(zhì)A的制備方法為典型的二氫吡啶環(huán)氧化脫氫反應(yīng)，在所用條件下可瞬間精確定量完成。雜質(zhì)A的熔點(diǎn)、紫外吸收?qǐng)D譜及紅外吸收?qǐng)D譜與歐洲對(duì)照品(EP)完全一致，并參照尼群地平的紅外圖譜作為旁證。結(jié)合質(zhì)譜所得分子量與結(jié)構(gòu)相符，可以確認(rèn)其結(jié)構(gòu)。1H-NMR(CDCl3)和13C-NMR(CDCl3)核磁共振譜位移歸屬完全支持結(jié)構(gòu)特征。

[1]國(guó)家藥典委員會(huì). 中國(guó)藥典2010年版二部[S]. 2010，232

[2]Council of Europe strasbourg. European Pharmacopoeia[S]. 8.0 Edition. 2859-2860

[3]岳志華, 牛秀華, 張啟明. 關(guān)于中國(guó)藥典與英國(guó)藥典(2005年版)尼群地平原料和片劑中有關(guān)物質(zhì)檢查HPLC方法的比較與討論[J]. 中國(guó)藥品標(biāo)準(zhǔn), 2007, 8(5):5-6

Synthesis and determination of Nitrendipine Impurity A

XUHong-chang,ZHANGHong-jun,WANGYue-e

(Dalian Hongfeng Pharmaceutical Co., Ltd,Dalian 116052, China)

Objective: To compound Nitrendipine Impurity A. Methods: Impurity A was obtained by Nitrendipine and cerous sulfate in a mixture of acetic acid and dilute sulfuric acid. Results: The yield was about 70%. Conclusion: The structure was determined by UV, IR, MS, 1H-NMR and 13C-NMR.

Nitrendipine; Nitrendipine Impurity A; synthesis; structure determined

許宏昌(1953～)男，遼寧丹東人，高級(jí)工程師。

R284.1

A

1008-0104(2015)01-0026-02

2014-05-11)