陳朝喜，賀冬梅，文 娟，湯 承

（西南民族大學(xué)生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院，四川成都610041）

藏獸醫(yī)學(xué)是祖國(guó)獸醫(yī)學(xué)的重要組成部分，也是藏族勞動(dòng)人民同家畜疾病做斗爭(zhēng)的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)，是藏族勞動(dòng)人民在長(zhǎng)期的醫(yī)療實(shí)踐中，吸取中醫(yī)理論和外來醫(yī)學(xué)的精華，再結(jié)合本地區(qū)的特色建立起來的具有獨(dú)特理論體系的民族獸醫(yī)學(xué)，對(duì)于保證廣大牧區(qū)畜牧業(yè)的發(fā)展有著重要的作用和貢獻(xiàn)。然而，長(zhǎng)期以來，同時(shí)由于歷史條件的限制，對(duì)藏獸醫(yī)驗(yàn)方的收集和整理只限于部分畜牧業(yè)發(fā)達(dá)的地區(qū)，使得藏獸醫(yī)驗(yàn)方資源的發(fā)展和傳承受到一定的限制。因此，本研究利用中醫(yī)傳承輔助系統(tǒng)，對(duì)收集到的藏獸醫(yī)驗(yàn)方和文獻(xiàn)資料記載的方劑進(jìn)行數(shù)據(jù)挖掘，對(duì)收集到的630個(gè)藏獸醫(yī)驗(yàn)方和26個(gè)含有纖毛婆婆納的驗(yàn)方進(jìn)行組方規(guī)律分析，以期將寶貴的藏獸醫(yī)驗(yàn)方得到系統(tǒng)的整理，同時(shí)為后期系統(tǒng)研究收集到藏獸醫(yī)驗(yàn)方的現(xiàn)代藥理學(xué)機(jī)理奠定基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 處方來源 630個(gè)藏獸醫(yī)方劑主要來源于《藏獸醫(yī)經(jīng)驗(yàn)選編》［1］、《常用藏藥志》［2］、《現(xiàn)代中獸醫(yī)大全》［3］、《藏獸醫(yī)驗(yàn)方選》［4］、《高原中草藥治療手冊(cè)》［5］及中國(guó)知網(wǎng)（CNKI）檢索“藏獸醫(yī)”和“藏獸藥”關(guān)鍵詞篩選到的相關(guān)文獻(xiàn)（1975年－2013年）［6－13］。

1.1.2 分析軟件 “中醫(yī)傳承輔助系統(tǒng)（V2.0）”軟件，由中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院中藥研究所提供。

1.2 方法

1.2.1 處方的輸入和核對(duì) 將1.1文獻(xiàn)資料中篩選的藏獸醫(yī)驗(yàn)方方劑錄入中醫(yī)傳承輔助系統(tǒng)。為確保數(shù)據(jù)源和篩選方劑的數(shù)據(jù)挖掘結(jié)果的準(zhǔn)確性，避免錄入過程可能出現(xiàn)遺漏或重復(fù)輸入等錯(cuò)誤，在完成篩選方劑的錄入后，再由錄入人員以外人員負(fù)責(zé)數(shù)據(jù)源的審核和修正。

1.2.2 數(shù)據(jù)分析 用中醫(yī)傳承輔助系統(tǒng)“數(shù)據(jù)報(bào)表系統(tǒng)”模塊的“方劑分析”功能，對(duì)630個(gè)藏獸醫(yī)方劑進(jìn)行“常用藥物頻次分析”和“方劑藥性分析”。同時(shí)，基于關(guān)聯(lián)規(guī)則和熵聚變算法對(duì)含有藏藥關(guān)鍵詞“纖毛婆婆納”的26個(gè)方劑進(jìn)行組方規(guī)律分析。

2 結(jié)果

2.1 630個(gè)方劑組方藥物基本信息統(tǒng)計(jì)與分析

利用中醫(yī)傳承輔助系統(tǒng)軟件對(duì)收集到的630個(gè)藏獸醫(yī)方劑進(jìn)行藥物頻次、歸類統(tǒng)計(jì)、四氣統(tǒng)計(jì)、五味統(tǒng)計(jì)和歸經(jīng)統(tǒng)計(jì)，分析其組方規(guī)律。

2.1.1 藥物頻次 從參考文獻(xiàn)中共檢索到630個(gè)藏獸醫(yī)驗(yàn)方（其中四川省409 個(gè)，西藏自治區(qū)119個(gè)，甘肅省59個(gè)，云南省3個(gè)，青海省15個(gè)，未提供驗(yàn)方來源單位的驗(yàn)方25 個(gè)），共有1 143 味藥物。對(duì)630個(gè)處方中的藥物頻次進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，使用頻次高于20的藥物共有32味，其中植物藥物25味，動(dòng)物藥物2味，礦物藥物5味（表1）。

2.1.2 藥物歸類 對(duì)使用頻次高于100的科屬進(jìn)行歸類分析，有8個(gè)種屬的藥物使用頻次較高，菊科植物的使用頻次最高，其次為毛茛科、豆科、傘形科、唇形科、姜科、使君子科和玄參科（圖1）。值得一提的是盡管其他科屬藥物使用頻次在100次以下，但其使用頻次遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于傳統(tǒng)中獸醫(yī)臨床用藥頻次（如鹿科，數(shù)據(jù)未列出），這可能與藏區(qū)藥物資源優(yōu)勢(shì)和藏獸藥的使用習(xí)慣有一定的關(guān)系。

表1 630個(gè)方劑中頻次20以上的藥物Table 1 Drugs of frequency over 20times in 630prescriptions

圖1 630個(gè)方劑藥物科統(tǒng)計(jì)分析Fig.1 Statistical analysis of family in 630prescriptions

2.1.3 四氣統(tǒng)計(jì)分析 630個(gè)方劑中藥物的四氣統(tǒng)計(jì)分析結(jié)果見圖2，溫性藥物的使用頻次最高，共使用1 371次；熱性藥物使用頻次最低，共使用217次。

2.1.4 五味統(tǒng)計(jì)分析 630個(gè)方劑中藥物的五味統(tǒng)計(jì)分析結(jié)果見圖3，苦味藥物的使用頻次最高，共使用2 110次；淡味藥物使用頻次最低，共使用33次。其他性味使用頻次順序?yàn)樾粒靖剩緷舅幔鞠獭?/p>

2.1.5 歸經(jīng)統(tǒng)計(jì)分析 630個(gè)方劑中藥物的歸經(jīng)統(tǒng)計(jì)分析結(jié)果見圖4，歸經(jīng)頻次最高的是肝臟，共1 406次；歸經(jīng)頻次最低的是三焦，共74次。其他歸經(jīng)的統(tǒng)計(jì)結(jié)果除了歸經(jīng)為膽、膀胱、小腸和心包的藥物使用頻次低于260次外，其他歸經(jīng)的藥物使用頻次都在600次以上。

圖2 630個(gè)方劑藥物四氣統(tǒng)計(jì)分析Fig.2 Statistical analysis of four properties in 630prescriptions

圖3 630個(gè)方劑藥物五味統(tǒng)計(jì)分析Fig.3 Statistical analysis of five tastes in 630prescriptions

圖4 630個(gè)方劑藥物歸經(jīng)統(tǒng)計(jì)分析Fig.4 Statistical analysis of channel－tropism in 630prescriptions

2.2 藏藥纖毛婆婆納組方規(guī)律分析

從630個(gè)藏獸醫(yī)方劑中共篩選到26個(gè)含有“纖毛婆婆納”的方劑，共166味藥物。利用中醫(yī)傳承輔助系統(tǒng)“方劑分析系統(tǒng)”模塊，對(duì)其組方規(guī)律進(jìn)行分析，從而篩選出新的組方。

2.2.1 基于關(guān)聯(lián)規(guī)則分析的組方規(guī)律研究 ①用藥模式分析。在設(shè)置支持度＝20%和置信度＝90%的條件下對(duì)26個(gè)含有“纖毛婆婆納”的藏獸醫(yī)方劑進(jìn)行組方規(guī)律分析，26個(gè)方劑中使用頻次在5以上的組合見表2。使用頻次在5以上的用藥組合共35個(gè)，其中排在前5位的組合分別是“五靈脂，纖毛婆婆納”、“訶子，纖毛婆婆納”、“廣木香，纖毛婆婆納”、“波棱瓜子，纖毛婆婆納”和“五脈綠絨蒿，纖毛婆婆納”。②規(guī)則分析。26個(gè)方劑藥用藥規(guī)則見表3，共有12條規(guī)則。從表中看出，在2味藥模式中，牛黃、波棱瓜子、五靈脂、五脈綠絨蒿、訶子和廣木香與纖毛婆婆納合用的幾率較高；在3味藥模式中，“五靈脂，五脈綠絨蒿”和“紅花，五靈脂”組合與纖毛婆婆納合用的幾率較高。③網(wǎng)絡(luò)展示：對(duì)26個(gè)方劑的12條規(guī)則進(jìn)行網(wǎng)絡(luò)顯示，直觀展示藥物間相互關(guān)系（圖5）。

續(xù)表2

表3 26個(gè)方劑中藥物組合的用藥規(guī)則（置信度＞0.9）Table 3 Rules of herbal combinations in 26prescriptions（confidence level＞0.9）

2.2.2 基于熵聚變的方劑組方規(guī)律研究 ①基于改進(jìn)的互信息法的藥物間關(guān)聯(lián)度分析：根據(jù)方劑數(shù)量的多少，同時(shí)結(jié)合經(jīng)驗(yàn)判斷，在設(shè)置相關(guān)度為8，懲罰度為2的情況下進(jìn)行聚類分析，得到26個(gè)方劑中兩兩藥物間的相關(guān)度，共得到149條藥物關(guān)聯(lián)信息，將關(guān)聯(lián)系數(shù)0.08以上的藥對(duì)列表（表4）。②基于復(fù)雜系統(tǒng)熵聚類的藥物核心組合分析：以改進(jìn)的互信息法的藥物間關(guān)聯(lián)度分析結(jié)果為基礎(chǔ)，按照相關(guān)度為8和懲罰度為2的約束規(guī)則，基于復(fù)雜系統(tǒng)熵聚類，得到4個(gè)藥物核心組合，分別是“翼首草，訶子，廣木香”、“余甘子，白檀香，高山龍膽”、“波棱瓜子，牛黃，藏馬兜鈴”和“余甘子，白檀香，甘青青蘭”。③基于無(wú)監(jiān)督熵層次聚類的新處方分析：在提取核心組合基礎(chǔ)上，運(yùn)用無(wú)監(jiān)督熵層次聚類算法，得到2個(gè)新處方，分別是“翼首草，訶子，廣木香，波棱瓜子，牛黃，藏馬兜鈴”和“余甘子，白檀香，高山龍膽，甘青青蘭”，候選新方的網(wǎng)絡(luò)展示見圖6。

3 討論

3.1 中醫(yī)傳承輔助系統(tǒng)軟件對(duì)藏獸醫(yī)經(jīng)驗(yàn)方的挖掘與開發(fā)

藏獸醫(yī)藥學(xué)是我國(guó)古老的科學(xué)文化遺產(chǎn)之一，也是我國(guó)傳統(tǒng)獸醫(yī)藥學(xué)的重要分支。藏獸醫(yī)藥學(xué)隨著藏區(qū)科學(xué)文化和畜牧業(yè)生產(chǎn)技術(shù)的進(jìn)步而產(chǎn)生和發(fā)展。解放后，藏區(qū)獸醫(yī)教育迅速發(fā)展，改變了解放前由于歷史條件的限制使得很多古方和驗(yàn)方僅能采用口傳心授方式傳承下來的局面，出版了大量的獸醫(yī)學(xué)著作并培養(yǎng)了大批獸醫(yī)人員，使得藏獸醫(yī)資源得到記錄和傳承。

中醫(yī)傳承輔助系統(tǒng)軟件能夠?qū)︶t(yī)案進(jìn)行數(shù)據(jù)挖掘和發(fā)現(xiàn)用藥規(guī)律的總結(jié)，為中藥的二次開發(fā)及古方和驗(yàn)方的開發(fā)研究尤其是中藥新藥的創(chuàng)制也具有重要的價(jià)值［13］。利用中醫(yī)傳承系統(tǒng)軟件網(wǎng)絡(luò)資源對(duì)藏獸醫(yī)經(jīng)驗(yàn)方進(jìn)行統(tǒng)計(jì)和處理，同時(shí)對(duì)相關(guān)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析和挖掘，總結(jié)藏獸藥的用藥規(guī)律，對(duì)藏獸藥的開發(fā)和傳承都有一定的指導(dǎo)意義。同時(shí)，能夠?yàn)椴孬F藥的現(xiàn)代藥理學(xué)研究提供新的思路和方法，為篩選更好的新型方劑和開拓新的應(yīng)用領(lǐng)域奠定基礎(chǔ)。

圖5 支持度為5，置信度為0.9的藥物網(wǎng)絡(luò)展示Fig.5 Network display of new prescriptions on condition that the relevancy is 5and confidence level is 0.9

表4 基于改進(jìn)的互信息法的藥物間關(guān)聯(lián)度分析Table 4 Correlation coefficient between herbs based on revised mutual information method

3.2 藏獸醫(yī)經(jīng)驗(yàn)方組方的特點(diǎn)

本研究對(duì)檢索到的630個(gè)藏獸醫(yī)驗(yàn)方組方藥物進(jìn)行四氣五味和歸經(jīng)等分析，同時(shí)以纖毛婆婆納為例進(jìn)行新藥方篩選，在結(jié)果處理過程中發(fā)現(xiàn)收集到的驗(yàn)方組方有以下特征：

3.2.1 藥物組成數(shù)量 收集到的630個(gè)藏獸醫(yī)驗(yàn)方中，藥物組成數(shù)量差別很大：最少的只使用1味藥物，如沙棘膏用沙棘果實(shí)制得；最多的方劑使用25味藥物，如方劑“五味子25味”和“獐芽菜25味”，分別使用五味子和獐芽菜等25味藥物組方。

3.2.2 藥物使用劑量 在藥物劑量方面，很多藥物包括毒性較大的藥物使用量比較大，如瑞香狼毒在治療牛羊疥癬時(shí)使用劑量為15g～30g［1］，考慮到個(gè)體差異因素很可能會(huì)引起動(dòng)物中毒事件，在使用中必須引起重視。

圖6 相關(guān)度為8，懲罰度為2的新處方藥物網(wǎng)絡(luò)展示Fig.6 Network display of new prescriptions drugs on condition that the relevancy is 8and penalty index is 2

3.2.3 藥物使用種類 藏區(qū)中草藥資源非常豐富，在藏獸藥的配方和使用中，其組方藥材的種類也較多使用了雪蓮花、紅景天和藏木香等大批高原地區(qū)稀有的藥材資源。此外，除了植物藥物外，也較多使用了動(dòng)物藥物和礦物藥物（如五靈脂和硇砂等）。王賽等［14］也通過對(duì)藏區(qū)特色植物綠蘿花進(jìn)行降血糖的研究，結(jié)果表明其降血糖效果顯著，并且能顯著提升造模小鼠血清胰島素的水平。馮慎遠(yuǎn)等［15］也利用藏藥五根散對(duì)缺血性神經(jīng)損傷大鼠模型進(jìn)行研究，結(jié)果表明五根散能夠降低缺血性大鼠新皮質(zhì)和海馬中內(nèi)皮素的含量從而保護(hù)腦組織。

3.3 藏獸醫(yī)經(jīng)驗(yàn)方的現(xiàn)代藥理學(xué)研究

本研究中收集的630個(gè)方劑，雖然都來自書面文件，但較少來自專題研究資料，很多驗(yàn)方未能在實(shí)踐中通過大量的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，而且部分藥物的學(xué)名、科屬和性味功能等信息還需要進(jìn)一步考證。因此，在后續(xù)的研究中，我們有必要對(duì)收集的驗(yàn)方方劑進(jìn)行進(jìn)一步考究，同時(shí)根據(jù)具體情況和處方來源，對(duì)組方藥材的配伍和用量等信息進(jìn)行核對(duì)，并通過現(xiàn)代藥理學(xué)方法進(jìn)一步研究其藥效學(xué)和藥動(dòng)學(xué)，以使其在藏區(qū)養(yǎng)殖業(yè)中更好地發(fā)揮作用，達(dá)到真正的防治疾病的目的。

3.4 候選新方劑的分析

本研究利用中醫(yī)傳承系統(tǒng)軟件篩選出2個(gè)新處方，分別與尕爾戈報(bào)道的“感冒散”和“龍膽十五味”組方有一定相似性［10］，為研究篩選的新方劑的藥理學(xué)作用提供了參考依據(jù)和研究思路。然而，新篩選藥方能否和報(bào)道的驗(yàn)方一樣發(fā)揮藥理學(xué)作用，還需要通過與相似度高的驗(yàn)方進(jìn)行藥理學(xué)比較分析，同時(shí)結(jié)合理論分析和臨床驗(yàn)證才能做出全面的評(píng)價(jià)，從而為藏獸醫(yī)的豐富和發(fā)展提供新的材料和思路。

致謝：軟件的安裝和數(shù)據(jù)處理過程得到中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院中藥研究所研究生申丹的幫助，在此表示感謝！

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