黃小華牟衛(wèi)東▲蘇倫

1.重慶市云陽(yáng)縣中醫(yī)院檢驗(yàn)科，重慶404500；2.重慶市云陽(yáng)縣人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，重慶404500

2011～2014年醫(yī)院病原菌分布及耐藥性分析

黃小華1牟衛(wèi)東1▲蘇倫2

1.重慶市云陽(yáng)縣中醫(yī)院檢驗(yàn)科，重慶404500；2.重慶市云陽(yáng)縣人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，重慶404500

目的分析引起醫(yī)院感染的病原菌分布特征及耐藥性，為臨床合理應(yīng)用抗生素提供參考依據(jù)。方法對(duì)2011～2014年本地區(qū)醫(yī)院臨床標(biāo)本培養(yǎng)出的病原菌及藥敏結(jié)果進(jìn)行分析。結(jié)果7270株病原菌以大腸埃希菌、銅綠假單胞菌、肺炎克雷伯菌、鮑曼不動(dòng)桿菌、金黃色葡萄球菌、肺炎鏈球菌、凝固酶陰性葡萄球菌、腸球菌、念珠菌為主，其中革蘭氏陰性菌占62.01%，革蘭氏陽(yáng)性菌占29.00%，念珠菌占8.99%。未發(fā)現(xiàn)對(duì)萬(wàn)古霉素耐藥的葡萄球菌，其余抗菌藥物均有不同程度的耐藥。結(jié)論細(xì)菌耐藥性較為嚴(yán)重，應(yīng)加強(qiáng)抗生素的管理，合理應(yīng)用抗菌藥物，控制耐藥性的發(fā)生。

病原菌；分布；耐藥性

近年來(lái)，隨著抗菌藥物的廣泛應(yīng)用，細(xì)菌的耐藥性日益嚴(yán)峻，嚴(yán)重影響了臨床抗感染治療。為減少耐藥細(xì)菌的產(chǎn)生，了解本地區(qū)臨床病原菌的分布及耐藥性，指導(dǎo)臨床合理用藥。本文對(duì)醫(yī)院2011年1月～2014年12月臨床標(biāo)本培養(yǎng)出的病原菌及藥敏結(jié)果進(jìn)行分析。

1 材料與方法

1.1 菌株來(lái)源

2011年1月～2014年12月醫(yī)院臨床各科室送檢的25 069份各類標(biāo)本中分離出7270株病原菌，剔除同一患者相同部位的同種細(xì)菌。

1.2 試劑及抗菌藥物

細(xì)菌鑒定試劑及抗菌藥物為德林公司產(chǎn)品。

1.3 細(xì)菌鑒定及藥敏試驗(yàn)

按《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》進(jìn)行分離，培養(yǎng)，獲得純菌種后，進(jìn)行革蘭氏染色、氧化酶、觸酶等結(jié)果，采用德林半自動(dòng)微生物分析系統(tǒng)進(jìn)行細(xì)菌鑒定和藥敏試驗(yàn)。質(zhì)控菌株用大腸埃希氏菌ATCC25922、銅綠假單胞菌ATCC27853、金黃色葡萄球菌ATCC25923、糞腸球菌ATCC29212，不計(jì)重復(fù)菌株的耐藥性。

2 結(jié)果

2.1 病原菌種類

2011年1月～2014年12月臨床送檢標(biāo)本25069份共分離出病原菌7270株，標(biāo)本陽(yáng)性檢出率為29.00%，以大腸埃希菌、銅綠假單胞菌、肺炎克雷伯菌、鮑曼不動(dòng)桿菌、金黃色葡萄球菌、肺炎鏈球菌、凝固酶陰性葡萄球菌、腸球菌、念珠菌為主，其中革蘭氏陰性菌4508株，占62.01%，革蘭氏陽(yáng)性菌2108株，占29.00%，念珠菌654株，占8.99%。各種病原菌的構(gòu)成比見(jiàn)表1。

表1 2011～2014年病原菌構(gòu)成比

2.2 病原菌分布特征

7270株病原菌標(biāo)本來(lái)源見(jiàn)表2。其中內(nèi)科分離到病原菌4726株（65.01%），外科872株（11.99%），ICU 581株（7.99%），其他科室1091株（15.01%）。

表2 分離菌株的主要標(biāo)本來(lái)源

2.3 革蘭氏陰性桿菌對(duì)抗菌藥物的耐藥性

分離出的大腸埃希氏菌、銅綠假單胞菌、肺炎克雷伯菌對(duì)抗菌藥物的耐藥性見(jiàn)表3。

2.4 革蘭氏陽(yáng)性球菌對(duì)抗菌藥物的耐藥性

凝固酶陰性葡萄球菌、金黃色葡萄球菌、腸球菌對(duì)抗菌藥物的耐藥性見(jiàn)表4。

2.5 真菌對(duì)抗菌藥物的耐藥性

從患者標(biāo)本中分離出念珠菌654株，對(duì)二性霉素B、氟胞嘧啶、氟康唑、伊曲康唑、伏立康唑均敏感。對(duì)抗菌藥物的耐藥性見(jiàn)表5。

表3 革蘭氏陰性桿菌對(duì)抗菌藥物的耐藥率（%）

表4 革蘭氏陽(yáng)性球菌對(duì)抗菌藥物的耐藥率（%）

表5 真菌對(duì)抗菌藥物的耐藥率（%）

3 討論

目前，細(xì)菌耐藥性已成為抗感染治療領(lǐng)域面臨的重大問(wèn)題，由于抗菌藥物的濫用，細(xì)菌耐藥性的形勢(shì)更為嚴(yán)峻[1]。本地區(qū)醫(yī)院2011～2014年25 069份臨床標(biāo)本中，共分離出7270株病原菌，檢出陽(yáng)性率為29.00%，與相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道的陽(yáng)性率相近[2-3]。分離菌株中以大腸埃希菌、銅綠假單胞菌、肺炎克雷伯菌、鮑曼不動(dòng)桿菌、金黃色葡萄球菌、肺炎鏈球菌、凝固酶陰性葡萄球菌、腸球菌、念珠菌為主。腸桿菌科細(xì)菌以大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌為代表，是引起醫(yī)院感染的常見(jiàn)細(xì)菌，對(duì)碳青霉烯類亞胺培南有較高的敏感性。大腸埃希菌的主要耐藥機(jī)制之一是細(xì)菌產(chǎn)ESBLs，使細(xì)菌對(duì)β-內(nèi)酰胺類抗生素耐藥。有外國(guó)早期文獻(xiàn)資料顯示，細(xì)菌產(chǎn)生的ESBLs主要為CTX-M-14基因型[4]，其在大腸埃希菌產(chǎn)ESBLs株中占63.4%。由于CTX-M-14酶以頭孢噻肟為水解底物，但不能水解頭孢他定。近年來(lái)，隨著水解頭孢他定的CTX-M-15酶的出現(xiàn)，耐頭孢他定的腸桿菌科細(xì)菌逐漸增多，而CTX-M-15酶也成為全球最常見(jiàn)的ESBL型[5-6]。大腸埃希菌耐藥機(jī)制也與gyrA和parC基因突變有關(guān)[7]。

非發(fā)酵革蘭氏陰性菌，主要為銅綠假單胞菌和鮑曼不動(dòng)桿菌。銅綠假單胞菌對(duì)碳青霉烯類抗生素亞胺培南較為敏感。而鮑曼不動(dòng)桿菌較為耐藥，且對(duì)大部分抗生素呈較高水平耐藥，對(duì)復(fù)方磺胺甲唑較為敏感。鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)抗菌藥物耐藥機(jī)制較為復(fù)雜，有研究發(fā)現(xiàn)其外膜通透性僅為大腸埃希菌的1%～3%，抗菌藥物不易滲入菌體[8]。另外鮑曼不動(dòng)桿菌耐藥菌株可產(chǎn)多種β-內(nèi)酰胺酶[8]，對(duì)亞胺培南和美羅培南的耐藥性主要是可產(chǎn)生碳青霉烯酶，尤其是B類和D類金屬酶是造成碳青霉烯類抗菌藥物耐藥的主要原因[8-10]。

分離的革蘭氏陽(yáng)性菌株以葡萄球菌為主，隨著抗生素在臨床的大量應(yīng)用，葡萄球菌在臨床的感染率及耐藥性已逐年增加[11]。MASA檢出率為16.43%，其對(duì)β-內(nèi)酰胺酶類抗菌藥的耐藥主要是由于macA基因編碼的PBP2a蛋白（青霉素結(jié)合蛋白）代替原來(lái)的青霉素結(jié)合蛋白PBP2，造成β-內(nèi)酰胺類抗菌藥物結(jié)合靶位的缺失而形成耐藥[12]。凝固酶陰性葡萄球菌因缺乏凝固酶等致病物質(zhì)而表現(xiàn)為條件致病菌，其致病機(jī)制主要與細(xì)菌細(xì)胞壁外的黏液物質(zhì)和溶血素有關(guān)，前者在細(xì)菌黏附、抗吞噬和抵抗宿主的免疫防御功能中起重要的作用[13-14]。其對(duì)β-內(nèi)酰胺類抗生素的耐藥機(jī)制主要是在于細(xì)菌細(xì)胞中的青霉素結(jié)合蛋白（PBP）發(fā)生突變，產(chǎn)生新的PBP2a，與目前臨床上應(yīng)用β-內(nèi)酰胺類抗生素的親和力極低，從而對(duì)全部目前臨床上應(yīng)用的β-內(nèi)酰胺類抗生素產(chǎn)生耐藥，且β-內(nèi)酰胺酶能使含有BTEAβ-內(nèi)酰胺環(huán)的抗生素因水解而失效[15-16]。對(duì)喹諾酮類抗生素的耐藥為DNA旋轉(zhuǎn)酶的基因變異等[17]。對(duì)氨基糖苷類抗生素耐藥的機(jī)制為產(chǎn)生鈍化酶。對(duì)萬(wàn)古霉素、呋喃妥因均高度敏感，青霉素曾作為肺炎鏈球菌的一線藥物，耐藥率也逐年增加。肺炎鏈球菌不產(chǎn)生β-內(nèi)酰胺酶，其對(duì)青霉素和頭孢菌素的耐藥性非質(zhì)粒介導(dǎo)，耐藥的發(fā)生與肺炎鏈球菌某些高分子量青霉素結(jié)合蛋白（PBPS）基因突變有關(guān)[18]。

細(xì)菌耐藥性問(wèn)題是抗感染治療的主要威脅，合理應(yīng)用抗菌藥物以降低細(xì)菌耐藥性。臨床醫(yī)生應(yīng)高度重視臨床微生物檢查，參考本地區(qū)細(xì)菌耐藥情況合理用藥，減少耐藥菌的傳播[19]。

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Analysis of hospital pathogenic bacteria distribution and drug resistance from 2011 to 2014

HUANG Xiao-hua1MOUWei-dong1▲SU Lun2
1.Department of Clinical Laboratory,Traditional Chinese Medicine Hospital of Yunyang County in Chongqing City, Chognqing 404500,China;2.Department of Clinical Laboratory,People′s Hospital of Yunyang County in Chongqing City,Chongqing 404500,China

Objective To analyze the distributed characteristics of pathogens causing nosocomial infections and drug resistance in order to provide reference for rational use of antibiotics in clinic.M ethods From 2011 to 2014,pathogens cultured by clinical specimens in regional hospitals and outcomes of drug sensitivity were analyzed.Results Among 7270 strains of pathogens,Escherichia coli,Pseudomonas aeruginosa,Klebsiella pneumoniae,Acinetobacter baumannii, Staphylococcus aureus,Streptococcus pneumoniae,coagulase-negative Staphylococci,Enterococcus,and Candida was the majority.The Gram-negative bacteria,Gram-positive bacteria,and Candida accounted for 62.01%,29.00%,and 8.99%in turn.No Staphylococcus was found on resistance of vancomycin,and the rest antimicrobial drugs had drug resistance in varying degrees.Conclusion Bacterial resistance is severely existed.Management on antibiotics should be strengthened and antibiotics should be rationally used aiming at controlling the occurrence of drug resistance.

Pathogenic bacteria;Distribution;Drug resistance

R446.5

A

1674-4721（2015）04（c）-0141-04

2015-02-13本文編輯：郭靜娟）

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