包煥平
摘 要:隨著科技的迅速發(fā)展,化學(xué)發(fā)光免疫技術(shù)已被廣泛應(yīng)用到臨床醫(yī)學(xué)和基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)的各個(gè)領(lǐng)域,是繼熒光免疫、繼酶免疫以及發(fā)射免疫等測(cè)定后的一種免疫技術(shù)。在臨床檢驗(yàn)中應(yīng)用化學(xué)發(fā)光免疫技術(shù),為臨床檢驗(yàn)提供診斷依據(jù),提高檢驗(yàn)的準(zhǔn)確度。本文主要探討發(fā)光免疫技術(shù)的概況,并對(duì)臨床檢驗(yàn)中應(yīng)用化學(xué)發(fā)光免疫技術(shù)進(jìn)行分析。
關(guān)鍵詞:臨床檢驗(yàn);應(yīng)用;化學(xué)發(fā)光;免疫技術(shù)
化學(xué)發(fā)光免疫技術(shù)具有標(biāo)本用量較少、穩(wěn)定性較高、標(biāo)記物制備較容易、不污染環(huán)境、操作簡(jiǎn)便以及便于實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化等優(yōu)點(diǎn),主要將免疫分析與化學(xué)反光分析相結(jié)合,被廣泛應(yīng)用到臨床醫(yī)學(xué)和基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)中?;瘜W(xué)發(fā)光免疫技術(shù)是繼酶免疫、發(fā)射免疫以及熒光免疫測(cè)定之后的免疫技術(shù),在臨床檢驗(yàn)中經(jīng)常需要檢測(cè)和分析表征性物質(zhì),以判斷疾病以及身體病理特征。通過(guò)在臨床檢驗(yàn)中應(yīng)用化學(xué)發(fā)光免疫技術(shù),快速分析各種物質(zhì),能夠提高檢測(cè)的靈敏度與準(zhǔn)確度。
1 化學(xué)發(fā)光免疫技術(shù)的概況
化學(xué)發(fā)光免疫技術(shù)主要包括化學(xué)發(fā)光分析和免疫分析系統(tǒng),用于抗原、抗體、酶、激素、維生素以及脂肪酸等檢測(cè)分析技術(shù)?;瘜W(xué)發(fā)光分析是根據(jù)免疫反應(yīng)情況,待免疫反應(yīng)完之后加入酶或氧化劑等發(fā)光底物,發(fā)光底物經(jīng)過(guò)氧化會(huì)形成處于激發(fā)狀態(tài)的中間體,通過(guò)發(fā)射光子來(lái)釋放能量,以達(dá)到穩(wěn)定狀態(tài)。而免疫分析是在抗體或抗原之上利用標(biāo)記物進(jìn)行直接的標(biāo)記,標(biāo)記物為化學(xué)物質(zhì)或酶,待抗體或抗原發(fā)生反應(yīng)后,會(huì)產(chǎn)生帶有抗體免疫的復(fù)合物。
化學(xué)發(fā)光免疫技術(shù)的原理是以化學(xué)發(fā)光劑對(duì)抗體或抗原進(jìn)行直接標(biāo)記,待磁顆粒性、抗體或抗原發(fā)生反應(yīng)之后,在磁場(chǎng)的作用下,分離處于游離狀態(tài)和結(jié)合狀態(tài)的化學(xué)發(fā)光劑,將發(fā)光促進(jìn)劑加入到結(jié)合狀態(tài)的部分,使其進(jìn)行快速的發(fā)光反應(yīng),并以定性或定量的方式檢測(cè)處于結(jié)合狀態(tài)的發(fā)光強(qiáng)度?;瘜W(xué)發(fā)光免疫技術(shù)系統(tǒng)具有操作較為簡(jiǎn)單,結(jié)果較為準(zhǔn)確可靠,且自動(dòng)化程度較高以及試劑儲(chǔ)存的時(shí)間較長(zhǎng)等優(yōu)點(diǎn),可根據(jù)激發(fā)態(tài)分子能量的來(lái)源,將化學(xué)發(fā)光的過(guò)程分為生物發(fā)光、光照發(fā)光和化學(xué)發(fā)光。
2 化學(xué)發(fā)光免疫技術(shù)在臨床檢驗(yàn)中應(yīng)用的類別
化學(xué)發(fā)光免疫技術(shù)在臨床檢驗(yàn)中,主要分為酶催化化學(xué)發(fā)光的免疫分析、直接標(biāo)記發(fā)光物質(zhì)的免疫分析以及電化學(xué)發(fā)光的免疫分析。酶催化化學(xué)發(fā)光的免疫分析是通過(guò)抗體或抗原在標(biāo)本中發(fā)生反應(yīng)之時(shí),采用發(fā)光的酶作為標(biāo)記物。直接標(biāo)記發(fā)光物質(zhì)的免疫分析是采用吖啶酯對(duì)體或抗原進(jìn)行直接標(biāo)記,待抗體或抗原發(fā)生免疫反應(yīng)后會(huì)產(chǎn)生一種復(fù)合物,加入氫氧化鈉和帶有雙氧水的氧化劑后呈堿性,出現(xiàn)發(fā)光、分解等現(xiàn)象。而電化學(xué)發(fā)光的免疫分析過(guò)程包括化學(xué)反光和電化學(xué),將三丙胺作為電子供體,對(duì)抗體或抗原用三聯(lián)吡啶釕進(jìn)行標(biāo)記,在電場(chǎng)的作用下,通過(guò)電子轉(zhuǎn)移而產(chǎn)生發(fā)光反應(yīng)。
3 在臨床檢驗(yàn)中應(yīng)用化學(xué)發(fā)光免疫技術(shù)的分析
3.1 應(yīng)用化學(xué)發(fā)光免疫技術(shù)分析傳染性疾病
乙型肝炎病毒是血清學(xué)的標(biāo)志物,是治療和評(píng)價(jià)機(jī)體免疫功能的重要指標(biāo)。診斷乙型肝炎病毒中的抗體或抗原的表面部分是否受到感染,這樣的診斷為常規(guī)酶法,但常規(guī)酶法會(huì)使低病毒含量的攜帶者出現(xiàn)漏檢的情況?;瘜W(xué)發(fā)光免疫技術(shù)和以前的常規(guī)酶法相比,具有線性范圍寬和高靈敏度等特點(diǎn),在臨床檢驗(yàn)中應(yīng)用化學(xué)發(fā)光免疫技術(shù)對(duì)傳染性疾病進(jìn)行分析,如對(duì)于已感染免疫病毒的兒童,應(yīng)對(duì)其體內(nèi)的甲型肝炎病毒、乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒以及單純皰疹病毒以Bowser等進(jìn)行測(cè)定,檢測(cè)出的靈敏度較高。
3.2 應(yīng)用化學(xué)發(fā)光免疫技術(shù)分析腫瘤標(biāo)志物
腫瘤標(biāo)志物指腫瘤腫瘤在發(fā)生與增殖的過(guò)程中,通過(guò)腫瘤細(xì)胞進(jìn)行合成、釋放或者是機(jī)體與腫瘤細(xì)胞發(fā)生反應(yīng),產(chǎn)生酶、激素、白質(zhì)以及癌基因產(chǎn)物等物質(zhì)?;颊叩募?xì)胞、血液以及組織中都會(huì)有腫瘤標(biāo)志物,利用化學(xué)發(fā)光免疫技術(shù)能夠快速的尋找到難以發(fā)現(xiàn)的腫瘤標(biāo)志物。通過(guò)對(duì)患者進(jìn)行體外的輔助診斷以及術(shù)后監(jiān)測(cè),能夠緩解患者的病痛。采用Mac等診斷和監(jiān)測(cè)食管癌患者的病情,如對(duì)血清中的癌胚抗原濃度、鱗狀細(xì)胞癌的抗原濃度等進(jìn)行檢測(cè)。以Raslan和Shabin對(duì)健康孕婦德陰道液和胎膜早破中的人絨毛膜促線性激素和AFP標(biāo)志物進(jìn)行比較,AFP的特異性和敏感度較高。
3.3 應(yīng)用化學(xué)發(fā)光免疫技術(shù)分析心臟疾病
在臨床檢驗(yàn)中,經(jīng)常以同丁酶對(duì)心臟疾病患者進(jìn)行定量測(cè)定。心肌損傷的標(biāo)志物包括肌酸激酶、肌紅蛋白和肌鈣蛋白T,應(yīng)用化學(xué)發(fā)光免疫技術(shù)分析心臟疾病的標(biāo)記物,能夠提高檢測(cè)的準(zhǔn)確度。通過(guò)采用Dutra等將肌鈣蛋白T(cTnT)的受體分子制成免疫傳感器,應(yīng)用于早期心肌梗死的臨床檢測(cè),其方法較好,具有相關(guān)性,可以應(yīng)用到臨床中對(duì)標(biāo)本進(jìn)行檢測(cè)。
3.4 應(yīng)用化學(xué)發(fā)光免疫技術(shù)分析激素
激素是細(xì)胞和細(xì)胞間進(jìn)行信息傳遞的媒介,主要指散在內(nèi)分泌細(xì)胞中或內(nèi)分泌腺所分泌出來(lái)的高效能的活性物質(zhì)。在臨床檢測(cè)中應(yīng)用化學(xué)發(fā)光免疫技術(shù)分析和測(cè)定性激素、甲狀腺激素等激素,能夠?yàn)榕R床診斷和治療提供比較可靠、準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)室數(shù)據(jù),提高檢測(cè)的靈敏度和特異性。通過(guò)以Vutyavanich等對(duì)血清中的促黃體生成素、睪丸素、促卵泡生成素以及催乳素等進(jìn)行檢測(cè),以Karlsson對(duì)患者甲狀旁腺進(jìn)行檢測(cè),以Gayk和Schmidt對(duì)骨代謝標(biāo)志物中的降鈣素進(jìn)行測(cè)量,并和放射免疫法相比,其精密度和準(zhǔn)確度較高。
3.5 應(yīng)用化學(xué)發(fā)光免疫技術(shù)分析其他物質(zhì)
在臨床檢驗(yàn)中,應(yīng)用化學(xué)發(fā)光免疫技術(shù)還可以分析細(xì)菌、維生素、免疫球蛋白、細(xì)胞因子、酶以及基因等。通過(guò)Dasgupta等對(duì)血清中高辛含量進(jìn)行檢測(cè),以Quan等對(duì)食物中含有的鹽曲霉毒素B1進(jìn)行檢測(cè)。
綜上所述,化學(xué)發(fā)光免疫技術(shù)具有不污染環(huán)境、操作簡(jiǎn)便以及便于實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化等優(yōu)點(diǎn),被廣泛應(yīng)用到臨床醫(yī)學(xué)和基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)中。在臨床檢驗(yàn)中應(yīng)用化學(xué)發(fā)光免疫技術(shù),能夠?yàn)榕R床檢驗(yàn)提供數(shù)據(jù)依據(jù),提高檢測(cè)的精密度和準(zhǔn)確度。
參考文獻(xiàn)
[1] 施麗娟.發(fā)光免疫分析技術(shù)及在臨床檢驗(yàn)中的應(yīng)用[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床,2012,6(4):57-58.
[2] 劉愛國(guó).學(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù)在臨床檢驗(yàn)中的應(yīng)用分析[J].內(nèi)蒙古中醫(yī)藥,2013,7(14):89-90.
[3] 胡錦霞.學(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù)及其在臨床檢驗(yàn)中的應(yīng)用[J].中國(guó)保健營(yíng)養(yǎng),2013,5(1):61-62.