王薇薇 ， 陳鑫 ，韓亞琴，練向陽 ， 丁建平

(1、東臺(tái)市中醫(yī)院檢驗(yàn)科，江蘇 東 臺(tái)224200；2、南通大學(xué)附屬東臺(tái)醫(yī)院檢驗(yàn)科，江蘇 東 臺(tái) 2 24200)

梅毒是由梅毒螺旋體(Treponema pallidum，TP)感染人體所引起的一種慢性傳染性疾病，可累及多系統(tǒng)多臟器，產(chǎn)生多種多樣的癥狀與體征，也可呈潛伏狀態(tài)，還可通過胎盤傳給下一代，故危害極大[1]。梅毒的臨床診斷依靠流行病學(xué)史、臨床癥狀和體征以及實(shí)驗(yàn)室檢查三方面信息。其中，實(shí)驗(yàn)室檢查具有重要意義，它不僅是診斷梅毒必不可少的依據(jù)，也可用于療效觀察、判愈、判定復(fù)發(fā)或再感染?？焖傺獫{反應(yīng)素試驗(yàn)(RPR)和梅毒螺旋體抗體檢測(cè)是本院檢驗(yàn)科開展的兩種梅毒實(shí)驗(yàn)室檢查項(xiàng)目。現(xiàn)將這兩種檢測(cè)方法的結(jié)果加以比較，分析其臨床意義。

1 材料與方法

1.1 標(biāo)本來源 159例梅毒確診患者均為東臺(tái)市中醫(yī)院2013年1-12月門診和住院患者，其中男73例，女86例，年齡1d~80歲。所有患者的臨床診斷及分期均依據(jù)衛(wèi)生部于2007年修訂的《梅毒診斷標(biāo)準(zhǔn)(WS273-2007)》。

1.2 試劑與儀器 RPR試劑盒由上?？迫A生物工程股份有限公司提供，梅毒螺旋體抗體檢測(cè)試劑由蘇州新波生物技術(shù)有限公司提供，梅毒螺旋體明膠凝集試驗(yàn)(TPPA)試劑盒由日本富士瑞必歐株式會(huì)社提供。EFFICUTA全自動(dòng)樣本前處理系統(tǒng)及Anytest-2000型時(shí)間分辨熒光免疫分析儀均為蘇州新波生物技術(shù)有限公司的產(chǎn)品。

1.3 檢測(cè)方法 RPR通過對(duì)血清的倍比稀釋，采用顆粒凝集試驗(yàn)檢測(cè)其反應(yīng)素滴度；梅毒螺旋體抗體檢測(cè)采用雙抗原夾心時(shí)間分辨熒光免疫法(TRFIA)測(cè)定患者血清中梅毒螺旋體抗體的含量。對(duì)于RPR陰性，梅毒螺旋體抗體檢測(cè)陽性但與臨床體征不符的可疑患者用TPPA確診；對(duì)于RPR≥1:8，梅毒螺旋體抗體含量≤5.0的患者，稀釋血清重新檢測(cè)，防止鉤狀效應(yīng)的發(fā)生[2]。所有檢測(cè)均嚴(yán)格按照試劑盒配備的說明書操作，試劑均在有效期內(nèi)使用，室內(nèi)質(zhì)控在控，儀器運(yùn)行良好。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 應(yīng)用PEMS 3.0醫(yī)學(xué)統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，多組均數(shù)的比較采用F檢驗(yàn)，兩組均數(shù)的比較采用t檢驗(yàn)，P＜0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 3組RPR滴度不同梅毒患者梅毒抗體含量的比較 按RPR滴度的不同將梅毒患者分為RPR陰性、RPR＜1:8和RPR≥1:83組，3組患者梅毒螺旋體抗體含量差異顯著(F=11.31，P＜0.01)。具體結(jié)果見表1。

表1 3組RPR滴度不同梅毒患者梅毒抗體含量的比較

2.2 先天性梅毒與后天性梅毒患者抗體含量的比較 159例梅毒患者中先天性梅毒患者41例，其中RPR陰性20例，陽性21例，其梅毒螺旋體抗體含量相互比較，差異顯著(t=2.37，P＜0.05)；后天性梅毒患者118例，其中RPR陰性38例，陽性80例，其梅毒螺旋體抗體含量相互比較，差異顯著 (t=5.25，P＜0.01)。RPR陰性的先天性梅毒患者與后天性梅毒患者相比，抗體含量無顯著性差異(t=0.99，P＞0.05)；RPR陽性的先天性梅毒患者與后天性梅毒患者相比，抗體含量也同樣無顯著性差異 (t=0.64，P＞0.05)。 具體結(jié)果見表 2。

表2 41例先天性梅毒患者與118例后天性梅毒患者抗體含量的比較

3 討論

隨著我國經(jīng)濟(jì)的迅速發(fā)展和大量人口的流動(dòng),近年來梅毒的發(fā)病率呈上升趨勢(shì)。2004-2008年江蘇省梅毒報(bào)告病例數(shù)年均增長(zhǎng)率在30%左右[3]，而全國平均每年以52.7%的增長(zhǎng)率增長(zhǎng)[4]。本院連續(xù)三年檢測(cè)到的梅毒患者例數(shù)逐年增加，尤其是先天性梅毒病例數(shù)增長(zhǎng)較快。因此，梅毒的早發(fā)現(xiàn)早治療，對(duì)控制梅毒的蔓延有重要意義。

當(dāng)人體感染梅毒螺旋體后4～10周左右，血清中可產(chǎn)生一定數(shù)量的抗類脂質(zhì)抗原的非特異性反應(yīng)素和抗梅毒螺旋體抗原的特異性抗體。根據(jù)檢測(cè)所用抗原不同，梅毒血清學(xué)試驗(yàn)分為兩大類：一類為非梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)，包括快速血漿反應(yīng)素試驗(yàn)(RPR)，主要應(yīng)用于梅毒的篩查和療效觀察[5]。另一類血清學(xué)試驗(yàn)為梅毒特異性抗體檢測(cè)，美國疾病控制和預(yù)防中心(CDC)建議把該方法作為梅毒首選初篩試驗(yàn)[6]。以往酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)因其具有較高的檢測(cè)敏感性和特異性[7]，且操作簡(jiǎn)便快速，在臨床上應(yīng)用較多[8,9]。隨著實(shí)驗(yàn)室自動(dòng)化檢測(cè)技術(shù)的發(fā)展，以鑭系元素銪為標(biāo)記物的時(shí)間分辨熒光免疫技術(shù)(TRFIA)在臨床上得以開展。該方法與梅毒螺旋體明膠凝集試驗(yàn) (TPPA)相比，敏感性和特異性無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，還可根據(jù)熒光強(qiáng)度和相對(duì)熒光比值計(jì)算出待測(cè)抗體的濃度[10]，實(shí)現(xiàn)了梅毒螺旋體抗體的量化檢測(cè)。

本資料結(jié)果提示，體液免疫在清除梅毒螺旋體方面起到至關(guān)重要的作用。隨著梅毒螺旋體特異性抗體濃度的增加，RPR滴度會(huì)隨之下降甚至消失，說明高濃度的特異性抗體對(duì)梅毒螺旋體有一定的清除作用。RPR＜1:8但非陰性的梅毒患者約占研究總例數(shù)33.33%(53/159)，大多為隱性感染，臨床癥狀和體征不明顯。這部分患者的抗體濃度雖然高于組的患者 (t=2.44，P＜0.05)，但其含量還不能完全清除患者體內(nèi)的梅毒螺旋體。如果不接受徹底治療，仍有可能作為傳染源感染他人。

本資料中先天性梅毒患兒較多，占25.79%(41/159)，多數(shù)是在鄉(xiāng)鎮(zhèn)醫(yī)院生產(chǎn)或體檢時(shí)查出，來本院確診或住院治療。結(jié)果提示RPR陰轉(zhuǎn)只與特異性抗體含量有關(guān)，與先天性梅毒還是后天性梅毒無關(guān)。無論是何種梅毒患者，當(dāng)其體內(nèi)梅毒特異性抗體含量達(dá)到一定水平時(shí)，對(duì)梅毒螺旋體都具有清除作用。先天性梅毒患兒其抗體主要來源于母體，因此對(duì)梅毒孕婦的早期治療非常重要。有研究表明對(duì)梅毒孕婦的抗梅毒治療不僅可以減少先天性梅毒的發(fā)生率，而且還可以減低早產(chǎn)兒及低出生體重兒的發(fā)生率，減輕先天性梅毒患兒的病情、改善先天性梅毒患兒的預(yù)后[11]。

本資料中的梅毒孕婦大多來自東臺(tái)周邊的偏遠(yuǎn)鄉(xiāng)村或城市務(wù)工人員，產(chǎn)前檢查意識(shí)淡薄，對(duì)胎傳梅毒的危害性認(rèn)識(shí)不夠，再加上部分醫(yī)務(wù)人員對(duì)梅毒母嬰傳播相關(guān)知識(shí)掌握薄弱[12]，導(dǎo)致先天性梅毒患兒數(shù)量較多。因此要減少先天性梅毒的發(fā)生，一方面要加強(qiáng)孕產(chǎn)婦的健康教育，做好產(chǎn)前檢查，做到早發(fā)現(xiàn)早治療；另一方面要加強(qiáng)部分地區(qū)醫(yī)務(wù)人員關(guān)于預(yù)防梅毒母嬰傳播相關(guān)知識(shí)的培訓(xùn)，切實(shí)做好對(duì)梅毒孕婦的檢查和治療工作。

綜上所述，梅毒螺旋體抗體具有保護(hù)性，隨著抗體含量的增加，RPR滴度會(huì)隨之下降甚至消失。因此，無論是先天性梅毒患者還是后天性梅毒患者，只要做到早發(fā)現(xiàn)早治療，使其體內(nèi)獲得高含量的抗體，均可增強(qiáng)其對(duì)梅毒螺旋體的清除能力。

[1]張學(xué)軍,陸洪光,高興華,等.皮膚性病學(xué)[M].第 8 版.北京:人民衛(wèi)生出版社,2013:179-186.

[2]陸正賢,李松華.ELISA檢測(cè)梅毒的鉤狀效應(yīng)與RPR檢測(cè)梅毒的相互關(guān)系[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床,2011,8(4):478-479.

[3]傅更鋒,還錫萍,丁萍,等.江蘇省2004-2008年梅毒流行病學(xué)分析及防治策略研究[J].南京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版),2009,29(10):1399-1402.

[4]馬紅霞,周運(yùn)恒,楊藺,等.不同的梅毒血清學(xué)試驗(yàn)方法檢測(cè)1808例血清標(biāo)本結(jié)果分析[J].第二軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào),2011,32(12):1350-1352.

[5]吳勁松.RPR與TPPA檢測(cè)對(duì)梅毒診斷及療效的價(jià)值分析[J].中華醫(yī)院感染學(xué)雜志,2011,21(12):416-417.

[6]Centers for Disease Control and Prevention(CDC).Discordant results from reverse sequence syphilis screening-five laboratories,United States,2006-2010[J].MMWR Morb Mortal Wkly Rep,2011,60:133-137．

[7]Castro R,Prieto ES,Santo I,et al.Evaluation of an enzyme immunoassay technique for detection of antibodies against Treponema pallidum[J].Clin Microbiol,2003,41(1):250-253．

[8]田華.4394 例新生兒 HIV、HCV、HBV、TP 檢測(cè)結(jié)果分析[J].實(shí)驗(yàn)與檢驗(yàn)醫(yī)學(xué),2013,31(5):480-481.

[9]肖中華.1594例孕產(chǎn)婦梅毒與HIV抗體篩查結(jié)果的分析[J].實(shí)驗(yàn)與檢驗(yàn)醫(yī)學(xué),2013,31(5):502-505.

[10]孫瑩,徐明,吳穎之,等.化學(xué)發(fā)光法和時(shí)間分辨熒光法與TRUST檢測(cè)結(jié)果比較[J].中國皮膚性病學(xué)雜志,2010,24(8):735-736.

[11]尹虹,蘇衛(wèi).梅毒孕婦的抗梅毒治療對(duì)先天性梅毒患兒病情與預(yù)后的影響[J].浙江醫(yī)學(xué),2010,32(6):856-857.

[12]喬亞萍,方利文,王臨虹,等.醫(yī)務(wù)人員預(yù)防梅毒母嬰傳播知識(shí)掌握情況分析[J].中國婦幼健康研究,2013,24(4):500-502.