梁文彬
(梅州市中醫(yī)醫(yī)院檢驗科,廣東 梅 州514011)
由于尿液標本容易采集,所以尿液檢驗已廣泛應用于臨床疾病的輔助診斷、疾病進展監(jiān)測、治療效果或并發(fā)癥的監(jiān)測,以及對無癥狀人群進行的先天性或遺傳性疾病的篩查[1,2]。隨著尿液分析儀及尿沉渣儀的發(fā)明使用,使尿液檢測更加方便、快捷,準確,可標準化,改變了傳統(tǒng)單一顯微鏡鏡檢方法提高了工作效率[3-5]。但通過對1000例尿液樣本的白細胞分析發(fā)現(xiàn),三種檢測方法應聯(lián)合使用,才能更好地提高結果的準確性。
1.1儀器與試劑 桂林優(yōu)利特200B尿液分析儀,UF-500全自動尿沉渣儀及配套試劑和質(zhì)控物;奧林巴斯雙目顯微鏡及玻片。
1.2 標本來源 收集2014年5月份共1000例住院病人留取的晨尿各30ml,其中男性385例,女性615例,年齡:8~85歲。晨尿:早晨5~6時排空小便后,隔段時間再次留取的中段尿。
1.3 方法
1.3.1 用一次性尿杯收集上述住院病人留取的晨液30ml,避免污染,混勻后分別取10ml分為三管。
1.3.2 第一管尿液標本由尿液分析儀檢測,把試紙條浸入尿液中1~2s后取出,浸入濾紙吸收多余的尿液,然后放入優(yōu)利特200B尿液分析儀自動檢測。
1.3.3 第二管尿液標本放入UF-500全自動尿沉渣儀試管架中,全自動檢測尿沉渣。
1.3.4 第三管尿液標本,放入離心機經(jīng)1500r/min離心沉淀5min后,棄去上清液,把剩余的200μl混勻后取其中20μl涂片顯微鏡鏡檢,計數(shù)10個高倍鏡視野的白細胞數(shù),統(tǒng)計平均每個高倍視野值。
1.3.5 以上方法都是在相同條件下,并在儀器運轉(zhuǎn)正常,質(zhì)量控制結果在控的前提下,嚴格遵守標準操作規(guī)程,由熟練的檢驗人員進行聯(lián)合檢測。
1.4 結果判定標準 白細胞值:(1)優(yōu)利特200B尿液分析儀報告:陰性:(<15/μl),陽性:(≥15/μl)。 (2)UF-500全自動尿沉渣儀報告:陰性:(<15/μl),陽性:;(3)顯微鏡鏡檢報告:陰性:0~5/HP,陽性: >5/HP[7]。
2.1 表1顯示尿液分析儀,尿沉渣儀,顯微鏡人工鏡檢測陰性率分別為:78.5%、74.5%、76.8%,尿液分析儀陰性率最高,尿沉渣儀陰性率最低。見表1。
表1 三種方法檢測白細胞陰性率
2.2 表2尿液分析儀假陽性率為4.4%,假陰性率為8.6%,與鏡檢符合率為87%,尿沉渣儀假陽性率為3.3%,假陰性率為1.7%,與鏡檢符合率為95%。白細胞檢測尿沉渣儀各種指標都優(yōu)于尿液分析儀。見表2。
尿液分析儀試帶法檢查尿液白細胞的原理:尿中中性粒細胞含酯酶能水解吲哚化合物,其產(chǎn)物與重氮鹽反應生成紫色物質(zhì),其顏色與酯酶活性成正比,借此原理估計尿中白細胞的數(shù)量[8]。此法只能測中性粒細胞,尿液中污染甲醛或含有高濃度膽紅素或使用某些藥物時,會產(chǎn)生假陽性;尿蛋白>3g/L;不新鮮尿液或酸堿度的變化對白細胞破壞崩解可造成尿液分析儀結果陽性,而顯微鏡鏡檢為陰性[9]。
表2 尿液分析儀和尿沉渣儀白細胞測定結果與顯微鏡鏡檢符合率及假陰性率和假陽性率
尿沉渣分析儀應用了流式細胞和電阻抗原理:根據(jù)每個尿液標本的直方圖和散射圖來區(qū)分細胞及其形態(tài)。它為尿沉渣的檢測提供自動化的檢測手段,能客觀的分析尿沉渣的各種有形成分,快速檢測尿液標本,并對有形成份進行定量檢測。其影響因素有:(1)小圓上皮細胞及小管型,酵母菌,連體孢子,精子及磷狀上皮細胞等都能夠干擾白細胞的計數(shù)。(2)白細胞形態(tài)在尿液不同的酸堿度及滲透壓,形態(tài)變化較大,破壞及死亡的白細胞形態(tài)體積及顆粒密度變化較大,容易計錯。(3)當尿液中白細胞成團聚集在一起時,儀器則視為非白細胞,不會對其計數(shù)[10]。
鏡檢是利用顯微鏡技術對尿沉渣進行檢查,在尿中能夠看到的有形成份有各種細胞、管型及結晶等,對這些有形成份的識別、鑒定及計數(shù),對泌尿系統(tǒng)的鑒別診斷,病情觀察,判斷預后等有重要意義[11,12]。但是白細胞在不同因素下容易變形破碎,造成無法識別。所以此法雖然直觀,但比較繁瑣,不能標準化,誤差率較高。
可見,三種方法檢測尿中白細胞原理及影響因素不同,單獨任何一種或兩種聯(lián)合檢測,都不能保證結果的準確性。
尿沉渣定量檢測自動化程度高,易標準化,重復性又好,能夠精確地測量到白細胞的準確數(shù)量,并能夠依靠數(shù)量上的微弱變化,更好的指導臨床的治療用藥。但易受各種因素的影響,會出現(xiàn)假陽性和假陰性[13,14]。尿液分析儀檢測方式自動化程度高,易標準化,又簡便、快捷、檢測項目多,標本用量少,重復性又好,但其是一種半定量的檢測方法,不能精確的測定白細胞的數(shù)量,易受各種因素的影響,假陽性和假陰性都偏高[15]。尿沉渣鏡檢作為最傳統(tǒng)的檢查方法缺點很多,優(yōu)點不突出,但不可或缺,在所有教科書都將它作為尿沉渣檢查的金標準。在相當長的時間里,它與尿液分析儀聯(lián)合使用,優(yōu)點明顯,因為尿液分析儀檢查白細胞受其原理的影響,假陰性率較高,易漏檢,兩者聯(lián)合,避免了尿液分析儀的漏檢現(xiàn)象,但有一定的局限性,不能定量計數(shù)且速度慢[15,16]。
尿沉渣分析儀可同時定量檢測多種項目,優(yōu)點突出,現(xiàn)今很多醫(yī)院在檢查尿常規(guī)時,使用尿沉渣分析儀與尿液分析儀聯(lián)合檢測,提高了效率,基本上放棄了顯微鏡人工鏡檢。但是尿中白細胞受多種因素的影響,要保證檢測結果的準確性,顯微鏡鏡檢不可忽視。如今各醫(yī)院標本檢測量都非常大,不可能對檢測結果都一一進行顯微鏡鏡檢,從而降低檢測的速度,不能發(fā)揮先進儀器的作用。筆者認為,尿沉渣儀跟尿液分析儀聯(lián)合測定白細胞,根據(jù)尿沉渣儀假陰性率低,與顯微鏡鏡檢符合率高的特點,對尿沉渣儀跟尿液分析儀測定陰性,可考慮不用顯微鏡鏡檢,如兩者不符,須進行顯微鏡鏡檢。尿沉渣儀跟尿液分析儀屬快速過篩試驗,有其的優(yōu)越性,但上表統(tǒng)計可見,受各種因素的影響,其假陽性,假陰性并不少見,跟傳統(tǒng)的顯微鏡鏡檢符合率也不能達到百分之百,只有三者聯(lián)合檢測才能提高結果的準確性。
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