程連賽，武永勝，馬志軍，常利

(1 香河縣人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，河北 香河 065400； 2 香河縣人民醫(yī)院心內(nèi)科； 3 河北醫(yī)科大學(xué)第三醫(yī)院康復(fù)科)

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擇期手術(shù)病人輸血前不規(guī)則抗體篩查結(jié)果及應(yīng)用價(jià)值

程連賽1，武永勝2，馬志軍1，常利3

(1 香河縣人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，河北 香河 065400； 2 香河縣人民醫(yī)院心內(nèi)科； 3 河北醫(yī)科大學(xué)第三醫(yī)院康復(fù)科)

目的 探討擇期手術(shù)病人輸血前不規(guī)則抗體篩查的臨床意義。方法 對香河縣人民醫(yī)院2011年1月—2014年7月13 416例擇期手術(shù)病人進(jìn)行輸血前不規(guī)則抗體篩查，抗體篩查陽性者用特異性鑒定譜細(xì)胞做進(jìn)一步鑒定。以2008年1月—2010年12月未進(jìn)行輸血前不規(guī)則抗體篩查的12 208例擇期手術(shù)病人作為對照組，比較兩組的輸血反應(yīng)發(fā)生率。結(jié)果 篩查組13 416例病人共檢出不規(guī)則抗體116例，檢出率為0.865%(116/13 416)，其中檢出特異性抗體101例，檢出率為0.753%；非特異性抗體15例，檢出率為0.112%。不規(guī)則抗體的檢出率與性別、輸血次數(shù)及妊娠史有關(guān)(χ2=10.28～69.21，P<0.05)。篩查組輸血反應(yīng)發(fā)生率明顯低于對照組，差異有極顯著意義(χ2=26.37，P<0.01)。結(jié)論 擇期手術(shù)病人有一定的不規(guī)則抗體檢出率,輸血前篩查有利于提高輸血的安全性。

外科手術(shù)；輸血；不規(guī)則抗體；篩查

隨著輸血技術(shù)的發(fā)展，在臨床上以ABO血型抗體引發(fā)的速發(fā)性溶血性輸血不良反應(yīng)發(fā)生率已顯著減少，而由于不規(guī)則抗體引起的非溶血性輸血反應(yīng)(NHTR)在臨床輸血反應(yīng)中所占的比重卻越來越大[1-2]。NHTR輕者影響病人病情和輸血療效，嚴(yán)重時(shí)還可能導(dǎo)致病人死亡。對受血者進(jìn)行不規(guī)則抗體輸血前篩查是發(fā)現(xiàn)有臨床意義的同種意外抗體以及避免NHTR發(fā)生的有效手段，是輸血質(zhì)量管理的重要內(nèi)容之一,目前在發(fā)達(dá)國家已經(jīng)普遍實(shí)施[3]。美國血庫協(xié)會(huì)規(guī)定，輸血病人應(yīng)檢測不規(guī)則抗體以減少可能發(fā)生的輸血反應(yīng)[4]。我國目前尚未將不規(guī)則抗體列為輸血前必檢項(xiàng)目。為提高輸血的安全性，自2011年起我院對擇期手術(shù)病人進(jìn)行輸血前不規(guī)則抗體篩查，有效地降低了NHTR的發(fā)生。現(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1一般資料

2011年1月—2014年7月，選擇香河縣人民醫(yī)院進(jìn)行輸血前不規(guī)則抗體篩查的擇期手術(shù)病人共13 416例為篩查組，其中男7 186例，女6 230例，年齡6～79歲，平均(45.23±18.06)歲；輸血1次6 845例，輸血2次2 816例，≥3次3 756例；有妊娠史者2 270例。以2008年1月-2010年12月未進(jìn)行輸血前不規(guī)則抗體篩查的12 208例擇期手術(shù)病人作為對照組，其中男6 554例，女5 654例，年齡6～80歲，平均(44.93±17.87)歲；輸血2次2 565例，≥3次3 429例；有妊娠史者2 068例。兩組年齡、性別、輸血史及妊娠史等方面比較差異無顯著意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2主要試劑與儀器

Ⅰ～Ⅲ號(hào)抗體篩查細(xì)胞、1～10號(hào)抗體鑒定譜細(xì)胞(上海血液生物醫(yī)藥有限公司)，微柱凝膠免疫檢測卡、卡離心機(jī)(DiaMed-ID Liss/coombs)，DG-230恒溫孵育器(西班牙戴安娜公司)，LR5-4.2低速離心機(jī)(北京雷勃爾離心機(jī)有限公司)，YPX-173醫(yī)用冷藏箱(廣州傲雪制冷設(shè)備有限公司)。

1.3檢測方法

篩查組病人于輸血前以EDTA-K2抗凝管采集靜脈血5 mL，室溫下以3 000 r/min離心5 min分離血漿待檢。采用微柱凝膠法進(jìn)行不規(guī)則抗體篩查和特異性鑒定。采用巰基試劑鑒定Ig類別。

1.3.1不規(guī)則抗體篩查及結(jié)果判定 在檢測卡標(biāo)記好的微柱孔中加入50 μL病人血漿，再分別加入Ⅰ～Ⅲ號(hào)抗體篩查細(xì)胞及自身細(xì)胞50 μL，將檢測卡放入37 ℃孵育器中孵育15 min,100 r/min離心10 min,判斷結(jié)果。紅細(xì)胞留在凝膠柱的上端，表示紅細(xì)胞與相應(yīng)的抗體發(fā)生凝集，判定為陽性；紅細(xì)胞通過凝膠的縫隙到達(dá)凝膠柱的底部，表示紅細(xì)胞未與相應(yīng)的抗體發(fā)生凝集，判定為陰性。

1.3.2譜細(xì)胞特異性鑒定 將Ⅰ～Ⅲ號(hào)抗體篩查細(xì)胞改為1～10號(hào)抗體鑒定譜細(xì)胞，受檢血漿為抗體篩查陽性病人的血漿。操作步驟和結(jié)果判斷同上。受檢血漿與譜細(xì)胞和自身細(xì)胞均凝集為非特異性抗體篩查陽性。受檢血漿與部分譜細(xì)胞凝集、與自身細(xì)胞和部分譜細(xì)胞不凝集為特異性抗體篩查陽性。根據(jù)反應(yīng)格局以及與相應(yīng)抗原反應(yīng)的陰陽性來判斷為何種抗體。

1.3.3不規(guī)則抗體Ig類別鑒定 采用巰基試劑(2-Me)鑒定Ig類別[5]。

1.4輸血不良反應(yīng)判定標(biāo)準(zhǔn)

參照文獻(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)[6-7]。輸血不良反應(yīng)發(fā)生情況包括發(fā)熱、過敏及溶血等。由專職護(hù)士負(fù)責(zé)觀察輸血中及輸血后發(fā)生的各種反應(yīng),并詳細(xì)記錄。由輸血相關(guān)科室醫(yī)師按照《臨床輸血技術(shù)規(guī)范》對發(fā)生于輸血過程中或輸血結(jié)束后24 h內(nèi)的輸血反應(yīng)予以診斷并列入統(tǒng)計(jì)資料。

1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析，計(jì)數(shù)資料比較采用χ2檢驗(yàn)，以P<0.05為差異有顯著性。

2 結(jié) 果

2.1擇期手術(shù)病人不規(guī)則抗體檢出率及分布

篩查組病人共檢出不規(guī)則抗體116例，檢出率為0.865%(116/13 416)，其中檢出特異性不規(guī)則抗體101例，檢出率為0.753%；檢出非特異性不規(guī)則抗體15例，檢出率為0.112%。見表1。

2.2不同人群不規(guī)則抗體檢出率比較

女性病人不規(guī)則抗體的檢出率顯著高于男性(χ2=10.28，P<0.05)；不規(guī)則抗體的產(chǎn)生與輸血及妊娠有關(guān)(χ2=69.21、32.90，P<0.05)。見表2。

表1 擇期手術(shù)病人不規(guī)則抗體檢出率及分布(n=13 416)

表2 不同人群不規(guī)則抗體檢出率比較

2.3篩查組與對照組NHTR發(fā)生率

不規(guī)則抗體引起的輸血反應(yīng)主要為NHTR，篩查組NHTR的發(fā)生率為0.119%(16/13 416),明顯低于對照組的0.459%(56/12 208)，兩組比較差異有顯著性(χ2=26.37，P<0.05)。

3 討 論

不規(guī)則抗體是指不符合ABO血型系統(tǒng)Land-steiner法則的抗體,即抗A、抗B以外的紅細(xì)胞血型同種抗體。不規(guī)則抗體的產(chǎn)生受多種因素的影響，因此，不規(guī)則抗體的分布具有多態(tài)性和復(fù)雜性的特點(diǎn)，不同地域不規(guī)則抗體的檢出率可能不同。調(diào)查顯示，本地區(qū)擇期手術(shù)病人不規(guī)則抗體檢出率為0.865%(116/13 416)，低于趙莉[8]報(bào)道的江蘇省徐州市2.15%的結(jié)果,但高于葉長欽等[9]報(bào)道的廣東地區(qū)0.16%的結(jié)果,與柯秋高等[10]報(bào)道的湖北省孝感市0.80%的結(jié)果基本一致。不規(guī)則抗體的發(fā)生頻率以RH系統(tǒng)為最多，也最有臨床意義，除了抗-D、抗-E以外，其他還有抗-C等，與相關(guān)的調(diào)查結(jié)果相似[11-12]。在Lewis系統(tǒng)中抗-Lea、抗-Leb等均為有臨床意義的IgM類抗體?？?M、抗-N和抗-P同屬M(fèi)NS系統(tǒng)中的抗-M、抗-S、抗-N、抗-P等是同種紅細(xì)胞冷抗體，一般認(rèn)為是IgM類，最適反應(yīng)溫度為4～20 ℃，一般在體內(nèi)不引起溶血反應(yīng)，但病人在低溫麻醉的狀態(tài)時(shí)，可激活補(bǔ)體，發(fā)生溶血反應(yīng)[13]。預(yù)輸血病人不規(guī)則抗體篩查陽性后，必須進(jìn)一步通過譜細(xì)胞實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步確證其特異性，再輸入無相應(yīng)抗原的血液，才能保證輸血的安全。

本研究結(jié)果顯示，性別、妊娠史、輸血次數(shù)均與檢出率有關(guān)，多次輸血及妊娠是不規(guī)則抗體產(chǎn)生的重要原因。女性在妊娠過程中，當(dāng)胎兒紅細(xì)胞有同種異性抗原時(shí)，可導(dǎo)致孕婦產(chǎn)生意外抗體；輸血次數(shù)多，接觸同種異型抗原的機(jī)會(huì)就多；女性檢出率高于男性可能是受妊娠因素的影響。對于有反復(fù)輸血史和妊娠史的受血者，意外抗體引發(fā)免疫性溶血反應(yīng)更為常見。對于這些受血者來說，再次輸入含有意外抗體的血液時(shí)，就會(huì)出現(xiàn)回憶反應(yīng)，破壞輸入的紅細(xì)胞，抗體可與同種異型抗原紅細(xì)胞結(jié)合，引發(fā)機(jī)體的免疫性溶血反應(yīng)。由于抗體是逐步升高，紅細(xì)胞是逐步破壞，發(fā)生血管外溶血臨床癥狀表現(xiàn)并不明顯，而且遲發(fā)性溶血性輸血反應(yīng)的進(jìn)程很慢，不會(huì)引起凝血系統(tǒng)明顯活化和觸發(fā)大量血管活性物質(zhì)釋放，因此，往往被臨床醫(yī)師所忽視，造成無效輸血，從而延誤病人的治療，同時(shí)造成血液資源的浪費(fèi)。

擇期手術(shù)病人輸血前進(jìn)行不規(guī)則抗體篩查有利于減少輸血反應(yīng)的發(fā)生率，提高臨床輸血的安全性。本研究結(jié)果顯示，擇期手術(shù)病人輸血前進(jìn)行了不規(guī)則抗體篩查后，NHTR發(fā)生率為0.119%，明顯低于未進(jìn)行不規(guī)則抗體篩查的對照組。另外，當(dāng)不規(guī)則抗體效價(jià)較低時(shí)，配血時(shí)往往難以發(fā)現(xiàn)，而容易導(dǎo)致輕度輸血反應(yīng)，意外抗體的篩查可對陽性血液找到匹配的血液，效價(jià)降低或消失后再采取輸血治療，從而提高輸血的療效。

綜上所述,輸血病人有一定的意外抗體檢出率,輸血前篩查有利于提高輸血的安全性。

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(本文編輯 厲建強(qiáng))

作者書寫統(tǒng)計(jì)學(xué)名詞及符號(hào)須知

IRREGULAR ANTIBODY SCREENING AND ITS APPLICATION BEFORE BLOOD TRANSFUSION IN PATIENTS UNDERGOING SELECTIVE OPERATION

CHENGLiansai,WUYongsheng,MAZhijun,CHANGLi

(Clinical Laboratory, Xianghe County People’s Hospital, Xianghe 065400, China)

ObjectiveTo explore the clinical significance of irregular antibody screening (IAS) before blood transfusion in patients scheduled for surgery.MethodsBetween January 2011 and July 2014, an IAS was conducted in 13 416 patients -hospitalized in Xianghe County People’s Hospital -scheduled for surgery before blood transfusion, those with positive results were further determined using specific identification of spectral cells. A control group was consisted of 12 208 patients-hospitalized between January 2008 and December 2010 -who did not receive IAS before blood transfusion for surgery. The transfusion reaction rate between the two groups was compared.ResultsOf the 13 416 cases in the IAS group, irregular antibodies were detected in 116 cases, the detection rate was 0.865% (116/13 416), of which, specific antibodies being 101 (0.753%), and non-specific antibodies 15 (0.112)%. The detection rates of irregular antibodies were associated with sex, the number of blood transfusion and a history of pregnancy (χ2=10.28-69.21,P<0.05). Blood transfusion reaction rate in the screening group was lower than that in the control group (χ2=26.37,P<0.05).ConclusionThere is a certain detection rate of irregular antibodies in patients sche-duled for selective operation, a screen of irregular antibodies before blood transfusion is conducive to increasing the safety of blood transfusion.

surgical procedures, operative; blood transfusion; irregular blood group antibody; screening

2015-05-15;

2015-08-18

程連賽(1975-)，男，管檢驗(yàn)師。

R457.1

A

1008-0341(2015)06-0703-03