肖興國

·實驗研究·

超分子鉑類藥物對消化道腫瘤作用分析

肖興國

目的 探討超分子鉑類藥物對消化道腫瘤的作用。方法 應用細胞培養(yǎng)法測定卡鉑和西茜鉑對肝癌、胃癌、結腸癌以及胚肺成纖維細胞胰腺癌的抑制作用及其半數(shù)抑制濃度(IC50)。結果 細胞培養(yǎng)結果發(fā)現(xiàn), 西茜鉑和卡鉑對肝癌、胃癌、結腸癌以及胚肺成纖維細胞胰腺癌均具有明顯抑制作用,且抑制作用呈濃度依賴性；而西茜鉑對肝癌、胃癌、結腸癌以及胚肺成纖維細胞胰腺癌的IC50值要顯著低于卡鉑(P＜0.05), 約為卡鉑IC50值的1/3～1/2, 同時卡鉑和西茜鉑對胚肺成纖維細胞胰腺癌的IC50值均超過240 ml/L。結論 超分子鉑類藥物具有明顯抑制消化道腫瘤的作用, 其抑制作用強于卡鉑的臨床效果。

消化道腫瘤；超分子鉑類藥物；抑制

自從順鉑被研發(fā)和應用以來, 人類在不斷的對鉑類及其配合物進行合成和研究, 同時對其抗腫瘤作用也進行了相應研究, 大約30多個鉑類配合物已經(jīng)進入臨床實驗階段。近幾年來, 通過對耐鉑類配合物抑制腫瘤細胞的作用機制進行研究, 研究者們設計出了多種鉑類非經(jīng)典結構藥物, 其結構已不再局限于卡鉑和順鉑兩種經(jīng)典結構, 如口服四價鉑類、多核配合物BBR3464以及存在空間位阻的ZD0473等［1］。本文探討超分子鉑類西茜鉑對消化道腫瘤作用, 通過應用細胞培養(yǎng)法比較卡鉑和西茜鉑對肝癌、胃癌、結腸癌以及胚肺成纖維細胞胰腺癌的抑制作用和IC50, 現(xiàn)將相關內(nèi)容報告如下。

1 材料與方法

1.1 材料 西茜鉑(CCP)購置于北京三思維爾高科技開發(fā)有限公司, 其濃度為20.0 mg/ml?？ㄣK(CBP)購置于山東齊魯制藥廠, 產(chǎn)品批號為0202007, 并采用5%的葡萄糖溶液進行溶解。RPM1640培養(yǎng)液和四氮唑蘭(MTT)購置于美國Sigma公司。人肝癌、胃癌、結腸癌以及胚肺成纖維細胞胰腺癌等細胞株均購置于上海中科院細胞庫。使用RPM1640培養(yǎng)液,在37℃和50 ml/L CO2條件的細胞培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng), 細胞傳代采用胰酶消化。

1.2 方法 將對數(shù)生長期的細胞使用0.25%胰酶消化并吹打成單個細胞, 并調(diào)整細胞密度, 使其中含有1×106/ml細胞,然后在96孔培養(yǎng)板中每個孔加入100 μl細胞懸液, 再培養(yǎng)4 h；將西茜鉑和卡鉑溶液分別稀釋成濃度為7.5、15.0、30.0、60.0、120.0、240.0和480.0 μg/ml的系列濃度, 每個濃度均設置空白對照孔以及每個濃度均設置3個復孔, 加入藥物后細胞放回CO2培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)64 h, 小心吸取上清液,并在每孔中加入200 μl濃度為5 g/L的四氮唑蘭(MTT)溶液, 然后放置于CO2培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng), 4 h后吸取上清液, 并用PBS液清洗2次, 隨后加入200 μl二甲基亞砜, 將其放置搖床上振蕩10 min, 最后使用酶標儀測定吸光度值, 檢測波長為570 nm, 參比波長為450 nm, 每個細胞株重復3次上述實驗。

1.3 統(tǒng)計學方法 所有數(shù)據(jù)均采用SPSS18.0統(tǒng)計學軟件進行分析。計量資料用均數(shù)±標準差( -x±s)表示, 采用t檢驗；計數(shù)資料用率表示, 采用χ2檢驗。P＜0.05表示差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

細胞培養(yǎng)結果發(fā)現(xiàn), 西茜鉑和卡鉑對肝癌、胃癌、結腸癌以及胚肺成纖維細胞胰腺癌均具有抑制作用, 且抑制作用呈濃度依賴性；而西茜鉑對肝癌、胃癌、結腸癌以及胚肺成纖維細胞胰腺癌的IC50值要顯著低于卡鉑(P＜0.05), 約為卡鉑IC50值的1/3～1/2, 同時卡鉑和西茜鉑對人胚肺成纖維細胞胰腺癌的IC50值均超過240 ml/L, 詳見表1。

表1 西茜鉑和卡鉑對消化系統(tǒng)腫瘤細胞的IC50比較( x-±s)

3 討論

消化系統(tǒng)腫瘤是我國最常見的一類腫瘤, 在化學藥物治療方面, 種類繁多, 其中鉑類藥物是目前臨床治療消化系統(tǒng)腫瘤較為常用的抗腫瘤類藥物［2］。在結腸癌藥物治療方面,一般采取伊立替康或奧沙利鉑聯(lián)合醛氫四氫葉酸和5-氟尿嘧啶進行化療, 另外再服用抗表皮生長因子受體抗體進行治療, 其臨床效果顯著提高［3,4］。在胃癌治療方面, 醛氫四氫葉酸和5-氟尿嘧啶聯(lián)合奧沙利鉑是最為常見的化療方案。胰腺癌臨床上依然采用鉑類藥物聯(lián)合鹽酸吉西他濱(健澤)進行治療。而肝癌和食管癌治療上缺少較為有效的治療藥物。因此, 臨床上對于消化系統(tǒng)腫瘤的治療還需進一步進行研究,需找一種治療消化系統(tǒng)腫瘤確實有效的藥物或方案。

目前鉑類抗癌藥物的研發(fā)較為活躍, 西茜鉑是一種超分子化合物, 超分子物質是指多種分子經(jīng)非共價鍵, 如氫鍵、緊密結合, 從而形成一種分子聚合體, 并具有新的識別、選擇、能量轉移和信息傳遞等性質和功能［5,6］。超分子物質主要是主體和客體藥物分子在一定條件下經(jīng)分子間非共價鍵形成一類穩(wěn)定的超分子物質, 其作用主要是改變藥物膜運輸,使藥物能有效地作用于靶點, 增加其與特異靶點的親和力,從而提高藥物生物利用度以及減少其毒副作用。西茜鉑是以卡鉑作為分子主體, 檸檬酸作為客體分子, 通過分子內(nèi)氫鍵,形成一種籠狀結構的聚合物。該超分子化合物能有效地阻止和保護卡鉑與水結合, 降低其水解速度, 增加其穩(wěn)定性和減少其毒副作用［7,8］。

本文通過細胞培養(yǎng)實驗, 發(fā)現(xiàn)超分子鉑類藥物西茜鉑對肝癌、胃癌、結腸癌以及胚肺成纖維細胞胰腺癌均具有抑制作用, 且抑制作用呈濃度依賴性, 說明超分子化合物具有明顯的抗消化系統(tǒng)腫瘤作用；另外, 西茜鉑對肝癌、胃癌、結腸癌以及胚肺成纖維細胞胰腺癌的IC50值要顯著低于卡鉑(P＜0.05), 約為卡鉑IC50值的1/3～1/2, 同時卡鉑和西茜鉑對胚肺成纖維細胞胰腺癌的IC50值均超過240 ml/L, 說明超分子鉑類藥物比卡鉑抗腫瘤作用強。

綜上所述, 超分子鉑類藥物具有明顯抑制消化道腫瘤的作用, 其抑制作用強于卡鉑的臨床效果。

［1］ 徐經(jīng)芳, 于德洪, 黃繼玲.替吉奧聯(lián)合奧沙利鉑治療消化道腫瘤32例療效觀察.中國老年保健醫(yī)學, 2013, 11(3): 50-51.

［2］ 韓興華, 黃朝輝.兩種含不同鉑類藥物方案治療消化道腫瘤的研究.中華疾病控制雜志, 2009, 13(2): 187-190.

［3］ 尹新華, 舒鵬麗, 馬琴.消化道腫瘤患者應用奧沙利鉑化療方案的護理體會.寧夏醫(yī)學雜志, 2010, 32(7): 673-674.

［4］ 魏國圣, 李必君, 李明權.奧沙利鉑、亞葉酸鈣、替加氟聯(lián)合方案治療消化道腫瘤的療效觀察.中國醫(yī)學創(chuàng)新, 2010, 7(6): 49-50.

［5］ 楊永枝, 彭秀麗.奧沙利鉑聯(lián)合替吉奧治療消化道腫瘤的毒副反應觀察及護理干預.腫瘤基礎與臨床, 2014, 27(2): 160-162.［6］ 馬群, 趙秀升, 康國慶, 等.奧沙利鉑聯(lián)合卡培他濱治療晚期消化道腫瘤.中國實用醫(yī)刊, 2009, 36(3): 89-90.

［7］ 王軍.兩種含不同鉑類藥物方案治療消化道腫瘤的研究.北方藥學, 2014, 11(4): 37.

［8］ 周愛勤.奧沙利鉑治療消化道腫瘤致周圍神經(jīng)毒性反應的護理體會.中國實用神經(jīng)疾病雜志, 2012, 15(18): 91-92.

10.14163/j.cnki.11-5547/r.2015.04.178

2014-09-27］

450007 鄭州大學附屬鄭州中心醫(yī)院消化內(nèi)科一病區(qū)