蘇秀麗，金建軍，邢魯奇

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胃復(fù)春聯(lián)合維甲酸治療胃癌癌前病變的療效及對Rb、C-erbB-2表達的影響

蘇秀麗，金建軍，邢魯奇

目的 觀察胃復(fù)春聯(lián)合維甲酸治療胃癌癌前病變的療效及對Rb、C-erbB-2表達的影響，探討二者干預(yù)胃癌癌前病變進展的可能機制，為胃癌的二級預(yù)防提供理論依據(jù)。方法 通過胃鏡活檢、病理檢查確診獲取異型增生(dysplasia，Dys)伴或不伴胃黏膜腸化(intestinal metaplasia，IM)122例，隨機分為治療組63例，對照組59例。治療組用藥為維甲酸、胃復(fù)春；對照組用藥為奧美拉唑、硫糖鋁。服藥3月后再次由胃鏡活檢獲取病理標本，采用免疫組化法檢測治療前后Rb、C-erbB-2表達情況。結(jié)果 服藥3個月后，治療組有效率68.25%，對照組37.29%相比較有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；能上調(diào)Rb表達強度(U=2.543,P<0.05)，下調(diào)C-erbB-2的表達(U=3.032，P<0.05)，與對照組相比，差別有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，臨床觀察胃復(fù)春聯(lián)合維甲酸無明顯毒、副作用。結(jié)論 胃復(fù)春聯(lián)合維甲酸可促進胃黏膜異型增生的逆轉(zhuǎn)，降低癌變風險，可能的作用機制之一是上調(diào)抑癌基因Rb的表達、下調(diào)癌基因C-erbB-2的表達，可用作胃癌的預(yù)防治療。

胃復(fù)春；維甲酸；胃癌癌前病變；抑癌基因Rb；癌基因C-erbB-2

目前較為肯定的胃癌前病變是指胃黏膜上皮細胞異型增生及腸型化生。研究證明，部分癌前病變可以逆轉(zhuǎn)[1-2]，成為胃癌預(yù)防研究的重點。本文研究中成藥胃復(fù)春聯(lián)合西藥維甲酸對胃黏膜異型增生及腸型化生的療效及對抑癌基因Rb和癌基因C-erbB-2表達的影響，探討這兩種藥物對胃癌癌前病變的治療價值。

1 資料與方法

1.1 一般資料 患者來自2011年9月至2014年1月河南科技大學(xué)第一附屬醫(yī)院消化道門診，胃鏡檢查為慢性胃炎，病理證實為胃黏膜慢性炎伴異型增生伴或不伴腸上皮化生共122例。慢性胃炎診斷標準及病理診斷標準符合慢性胃炎的中西醫(yī)結(jié)合診治方案及附錄I慢性胃炎的病理診斷標準和分類[3]，依照就診患者單日入治療組，雙日入對照組，隨機分為治療組63例(輕度異型增生15例，中度異型增生36例，重度異型增生12例，異性增生合并腸化生32例)，及對照組59例(輕度異型增生14例，中度異型增生35例，重度異型增生10例，異型增生合并腸化生31例)。兩組性別、年齡及臨床癥狀等一般資料均具有可比性(P>0.05)。

1.2 排除標準 ①合并惡性腫瘤者；②消化性潰瘍者；③合并其他慢性疾病需長期服藥者；④年齡低于14歲、超過65歲者；⑤禁忌服藥的妊娠哺乳期婦女、過敏體質(zhì)及需用藥物過敏者；⑥合并精神神經(jīng)癥狀及其他服藥依從性差、資料不全、無法判斷療效者；⑦治療前1周服用制酸劑及黏膜保護劑。

1.3 活檢部位 取材部位為距幽門2.5 cm的胃竇部3、6、9點及胃角4個部位取材4塊，標本足夠大，達黏膜肌層,對可能或肯定存在的病灶另取標本，分開裝瓶，病理申請?zhí)峁┎∈?、取材部位。標本?0%中性緩沖福爾馬林溶液固定，石蠟包埋，注明姓名，按次序編號，常溫保存。

1.4 治療方法 治療組口服胃復(fù)春片3片/次，3次/d；維甲酸片10 mg/次，3次/d，療程為3個月；奧美拉唑20 mg/次，2次/d，硫糖鋁0.75 g/次，3次/d，療程為4周。對照組口服奧美拉唑20 mg/次，2次/d，硫糖鋁0.75 g/次，3次/d，療程為4周。所用藥物均為固定廠家藥品，治療過程中停服其他藥物。治療前后采用問卷調(diào)查，詳細記錄患者病史、臨床癥狀及一般情況，行放大內(nèi)鏡檢查及病理活檢，并化驗血常規(guī)及肝腎功能。治療期間定期隨訪臨床變化及不良反應(yīng)。

1.5 療效判定標準 參照中國中西醫(yī)結(jié)合學(xué)會消化系統(tǒng)專業(yè)委員會慢性胃炎療效判定標準[3]。腸化或異型增生減輕達兩個級度以上(含兩個級度)為顯效，腸化或異型增生減輕達一個級度為有效，無明顯改變或改變未達到一個級度為無效(注：輕、中、重度異型增生依次為相差一個級度)。

1.6Rb、C-rebB-2表達檢測

1.6.1 試劑 采用MaxVisionTM快捷免疫組化法，檢測基因Rb、C-erbB-2表達產(chǎn)物，試劑盒均購于福州邁新生物技術(shù)公司。

1.6.2 結(jié)果判定 以試劑盒提供陽性片作陽性對照，用PBS置換一抗作為空白對照。細胞內(nèi)棕褐色顆粒為Rb蛋白陽性著色，定位于胞核，少數(shù)見于胞漿，僅胞漿著色為非特異性，Rb陽性判斷標準參照Mark Kelley[4]實驗室標準，采用半定量積分法分級，計數(shù)隨機10個高倍視野，計數(shù)100個細胞中的陽性細胞百分率及顯色深淺。依據(jù)著色深淺評分：①基本未著色0分，淺色為1分，中度著色為2分，深色為強陽性，計3分。②按陽性細胞百分率分為:染色細胞數(shù)0～5%計0分，6%～25%計1分，26%～75%計2分，>75%為3分。兩項相加最終結(jié)果評定:0～1分陰性(-)，2～3分弱陽性(+)，4～5分中度陽性(++)，>5分強陽性(+++)。C-erbB-2陽性著色為棕黃色，定位于胞膜，結(jié)果判定參照美國Hercept Test評價標準[5]：陽性細胞數(shù)<10%、僅有胞漿著色者為陰性，陽性細胞數(shù)>10%，顯色弱且不連續(xù)為陽性(+)，陽性細胞數(shù)>10%，連續(xù)胞膜染色，強度中等為(++)，陽性細胞數(shù)>10%，胞膜連續(xù)著色呈強陽性為(+++)。

1.7 統(tǒng)計學(xué)處理 所得結(jié)果采用SPSS 17.0軟件包統(tǒng)計分析，等級資料用秩和檢驗統(tǒng)計處理。

2 結(jié)果

2.1 治療前后內(nèi)鏡檢查及病理活檢結(jié)果 治療組病理結(jié)果有效率為68.25%，與對照組37.29%相比，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)，見表1。

表1 兩組治療后病理療效的比較 例(%)

注：兩組比較U=4.241,P<0.01。

2.2 治療前后Rb及CerbB-2的表達 結(jié)果見表2、表3。Rb表達定位于細胞核，胞質(zhì)著色無意義，Rb表達陽性率治療組治療前為74.60%與治療后88.89%相比，差異明顯(χ2=4.308，P=0.038)，表達強度明顯上調(diào)(U=2.543，P=0.012)；對照組治療前后Rb表達陽性率無明顯變化，分別為74.58%和76.27%，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(χ2= 0.046，P>0.05)，表達強度亦變化不明顯(U=0.319，P>0.05)。C-erbB-2表達定位于胞膜，治療組治療前后陽性率分別是34.92%、12.70%，差別有統(tǒng)計學(xué)意義P<0.05，提示C-erbB-2表達在治療后表達下調(diào)，表達強度也明顯下降(U=3.032，P<0.05)。對照組陽性率及表達強度治療前后無明顯差異(P>0.05)。治療后與對照組相比，治療組Rb表達明顯增強(P<0.05)，C-erbB-2表達明顯減弱(P<0.05)。

表2 治療前后Rb表達強度變化 例

注：治療前治療組與對照組相比U=0.237，P=0.692；治療后治療組與對照組相比U=2.201，P=0.03。

表3 治療前后C-erbB-2表達強度變化 例

注：治療前治療組與對照組相比U=0.159，P=0.874；治療后治療組與對照組相比U=-2.527，P=0.013。

2.3 藥物不良反應(yīng) 治療期間治療組、對照組均無明顯不適，不影響繼續(xù)治療。服藥前后，兩組患者心電圖、血尿常規(guī)及肝腎功能均無異常。

3 討論

胃癌是環(huán)境因素與遺傳因素共同作用的結(jié)果，胃黏膜在癌變之前，存在較長期的癌前病變。本研究結(jié)果表明，胃復(fù)春聯(lián)合維甲酸能有效改善胃癌前病變病理表現(xiàn)，有效率優(yōu)于對照組，提示聯(lián)合應(yīng)用胃復(fù)春聯(lián)合維甲酸對胃癌癌前病變有較好的治療作用。研究還發(fā)現(xiàn)治療后胃黏膜腸化生鏡檢及病理均無明顯改變，建議病人長期隨訪，原因需進一步探討。

細胞周期的調(diào)節(jié)與腫瘤發(fā)生密切相關(guān)。Rb基因是最早發(fā)現(xiàn)的抑癌基因，位于G1/S調(diào)控點的中心，低磷酸化的Rb蛋白與轉(zhuǎn)錄因子E-2F結(jié)合成復(fù)合物，使E-2F失去轉(zhuǎn)錄激活功能，調(diào)控細胞分裂增殖。Rb基因突變見于約一半以上人類腫瘤[6]，轉(zhuǎn)錄因子E-2F的活性明顯增強，導(dǎo)致細胞分裂增殖活躍，促使腫瘤的發(fā)生[7]。Rb在胃癌癌前病變中的表達率為74.60%。胃復(fù)春、維甲酸治療后，抑癌基因Rb表達較前增加。原癌基因C-erbB-2是細胞基因組的正常成分，其表達產(chǎn)物具有酪氨酸蛋白激酶活性，調(diào)控細胞增殖及分化，正常情況下處于失活狀態(tài)，可因點突變、獲得啟動子增強子、基因擴增與重排等被活化, 表現(xiàn)為基因的擴增和產(chǎn)物的高表達,具有致癌變活性。研究發(fā)現(xiàn)，在胃癌前病變中，C-erbB-2呈高表達[9-11]，本研究結(jié)果示，中、重度異型增生C-erbB-2表達明顯增加，與文獻報道一致，提示C-erbB-2活性增加參與了胃癌癌變過程，經(jīng)胃復(fù)春合并維甲酸治療表達明顯下降。提示該兩種藥物能降低基因C-erbB-2的表達。

胃復(fù)春(SFDA)被國家食品藥品監(jiān)督管理局批準用于治療胃癌前病變，組成包括三七、香茶菜、紅參、枳殼等多味中藥，多味中藥互相協(xié)同，有行氣活血、 清熱解毒、 散瘀消腫、抑菌消炎來改善病變血循環(huán)、促進黏膜再生、恢復(fù)正常功能的功效，其健脾補血成分尚能增強單核巨噬細胞系統(tǒng)吞噬功能，提高機體免疫功能、清除自由基，發(fā)揮標本兼治的作用[12]。維甲酸是腫瘤細胞的誘導(dǎo)分化劑，借助于維甲酸受體調(diào)控基因的表達，改變腫瘤細胞表型及分化，同時調(diào)節(jié)細胞凋亡基因，如P53、Bcl-2基因的表達，誘導(dǎo)細胞在G1/S節(jié)點前凋亡，滅活某些癌基因和細胞因子的表達[13]。胃復(fù)春聯(lián)合維甲酸用于治療胃癌前病變，把傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)的扶正祛邪與西醫(yī)治療的針對性強、起效快、療效確切相結(jié)合，具有雙向調(diào)節(jié)和多靶點作用的特點，為腫瘤的化學(xué)預(yù)防開辟了新途徑。

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Weifuchun Tablets Combination with Retinoic Acid in Treatment of Gastric Precancerous Lesions and its Effect on Expression ofRbGene andC-erbB-2 Gene

SU Xiu-li,JIN Jian-jun,XING Lu-qi

(First Affiliated Hospital, Henan University of Science and Technology,Luoyang 471003,China)

ObjectiveTo investigate the effect of the Weifuchun tablets with combination Retinoic Acid tablet on gastric precancerous lesions and its regulative effect on the expression of theRbgene and theC-erbB-2 gene.MethodsOne hundred and twenty-two patients with gastroscopy and pathology confirmed dysplasia(DYS) with or without intestinal metaplasia(IM)were classified randomly into treatment group and control group .The treatment group consisting of 63 patients was treated with a Weifuchun tablets，Retinoic Acid tablet,Omeprazole tablet and Sucralfate tablet.The other 59 patients were treated with Sucralfate tablet and Omeprazole tablet as control.RbandC-erbB-2 protein were detected by the immunohistochemical method before and after the treatment.ResultsCompared with the control group 37.29% of effective power, the treatment group 68.25% was significantly improved after three months of treatment(P<0.05). The abnormal expression of the Rb Gene and the C-erbB-2 Gene was found in both groups and effectly regulated by Weifuchun tablets and Retinoic Acid tablet.ConclusionThe combination of Weifuchun tablets and Retinoic Acid tablet was effective in treating gastric dysplasia and intestinal metaplasia.It could reduce the risk of carcinogenesis of gastric precancerous lesions by reversing the gastric mucosa lesions and regulating the expression of tumor suppressor genesRb, oncogeneC-erbB-2. The combination of Weifuchun tablets and Retinoic Acid tablet could effectly be used in the treatment of precancerous lesions.

Weifuchun tablets；Retinoic Acid tablet；precancerous lesions of gastric carcinoma；tumor suppressor genesRb；oncogeneC-erbB-2

2015-01-20

河南科技大學(xué)第一附屬醫(yī)院，河南洛陽 471003

蘇秀麗(1972-)，女，河南扶溝人，主治醫(yī)師，從事消化內(nèi)科臨床工作。

金建軍，男，教授，主任醫(yī)師，E-mail：jinjjhn@yahoo.cn

R735.2

A

1672-688X(2015)02-0090-04