摘要：目的 建立了氣相色譜法用來(lái)測(cè)定利福布汀原料藥中二氯甲烷、四氫呋喃、正己烷等3種有機(jī)溶劑的殘留量。方法 以N，N-二甲基甲酰胺為溶劑；采用頂空進(jìn)樣的方式；利用DB624毛細(xì)管色譜柱進(jìn)行分離。結(jié)果 二氯甲烷、四氫呋喃、正己烷以及溶劑峰彼此均能很好的分離，具有較好的線性（相關(guān)系數(shù)分別為0.9997、0.9999和0.9998）；平均回收率分別為102.4%，95.7%，103.9%，RSD分別為1.6%，0.8%，3.0%（n=6）。結(jié)論 該法準(zhǔn)確可靠，適用性比較強(qiáng)。

關(guān)鍵詞：頂空毛細(xì)管色譜法；利福布汀；殘留溶劑

Determination of Residual Organic Solvents in Rifabutin by headspace Capillary Gas Chromatography

SHAO Xin-chun，JIN Peng，LIN Min

（Taizhou Polar Testing Technology Co.， LTD， Taizhou 318000，Zhejiang，China）

Abstract：Objective To establish a method for the determination of three residual organic solvents in rifabutin.Methods The determination was carried out with headspace and DB624 capillary column ；N，N-Dimethylformamide was used as the solvent.Results Dichloromethane，tetrahydrofurn，hexane and the solvent were completely separated .The linearity in the detecting is good（r=0.999 7、 0.999 9、0.999 8）.The average recovery was 102.4%、95.7%and 103.9%with RSD of 1.6%、0.8%and3.0%（n=6），respectively.Conclusion The method can be applied in the determination of the three residual organic solvents in rifabutin.

Key words：Headspace capillary GC；Rifabutin；Residual organic solvents

利福布汀為一個(gè)含有螺哌嗪基的利福霉素衍生物，具廣譜抗菌活性。在國(guó)外已被批準(zhǔn)用于預(yù)防和治療HIV感染者鳥(niǎo)分枝桿菌-胞內(nèi)分枝桿菌復(fù)合體的廣泛播散性感染，也用于多重耐藥結(jié)核病的治療。利福布汀在合成和提純的過(guò)程中需要用到二氯甲烷、四氫呋喃和正己烷；根據(jù)《中國(guó)藥典》和人用藥品注冊(cè)國(guó)際協(xié)調(diào)會(huì)（ICH）指南的要求，應(yīng)對(duì)原料藥中殘留的有機(jī)溶劑進(jìn)行嚴(yán)格的控制以提高藥品的安全性，而目前國(guó)內(nèi)尚未見(jiàn)有關(guān)利福布汀中殘留溶劑的報(bào)道，本文建立了頂空毛細(xì)管氣相色譜法測(cè)定利福布汀中二氯甲烷、四氫呋喃、正己烷的殘留量，改方法準(zhǔn)確度高，重復(fù)性好[1]。

1資料與方法

氣相色譜儀（安捷倫7890B），頂空進(jìn)樣儀（安捷倫G1888），毛細(xì)管色譜柱（DB-624 30 m×0.53 mm×3 μm）天平（賽多利斯BS210S）；利福布汀原料藥（浙江精進(jìn)藥業(yè)有限公司，批號(hào)20121001、20121201，20121202、20121203），N，N-二甲基甲酰胺（色譜純，Tedia，批號(hào)609256），二氯甲烷（分析純，批號(hào)20080112），四氫呋喃（分析純，批號(hào)070828），正己烷（分析純，批號(hào)20061115）。

1.2方法

1.2.1色譜條件 色譜柱為DB-624，長(zhǎng)30 m×內(nèi)徑0.53 mm×膜厚3 μm；進(jìn)樣口溫度為140℃，分流進(jìn)樣，分流比為1∶10；檢測(cè)器為FID，溫度為 250℃，柱溫為程序升溫模式，45℃保持10 min，然后以10℃/分鐘的速率升溫至200℃并保持8 min。

1.2.2頂空條件 頂空平衡溫度105℃，平衡時(shí)間30min，傳輸管溫度110℃，進(jìn)樣體積1 ml。

1.2.3溶液的制備

1.2.3.1儲(chǔ)備液 二氯甲烷：精密稱取0.25 g二氯甲烷，用N，N-二甲基甲酰胺溶解并稀釋至50 ml，搖勻。

正己烷：精密稱取0.4 g正己烷，用N，N-二甲基甲酰胺溶解并稀釋至50 ml，搖勻，再取此溶液5 ml置于25 ml的容量瓶中，用N，N-二甲基甲酰胺稀釋至刻度，搖勻。

四氫呋喃：精密稱取0.05 g四氫呋喃，用N，N-二甲基甲酰胺溶解并稀釋至50 ml，搖勻。

1.2.3.2混合對(duì)照溶液 準(zhǔn)確移取5 ml二氯甲烷儲(chǔ)備液、5 ml正己烷儲(chǔ)備液、5 ml四氫呋喃儲(chǔ)備液至一100 ml容量瓶中，用N，N-二甲基甲酰胺稀釋至刻度，搖勻；取5 ml此溶液置于頂空瓶中。

1.2.3.3供試溶液 精密稱取0.1 g供試樣品（批號(hào)20121001）置于頂空瓶中，再加入5 ml N，N-二甲基甲酰胺進(jìn)行溶劑恩溶解。

1.2.4系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn) 首先按2.1項(xiàng)的條件，進(jìn)樣N，N-二甲基甲酰胺作為空白溶液，再進(jìn)樣混合對(duì)照溶液和供試溶液，色譜圖見(jiàn)圖1，專屬性結(jié)果見(jiàn)表1，連續(xù)進(jìn)樣6次混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，二氯甲烷、正己烷、四氫呋喃的峰面積的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD分別為0.9%、0.6%和0.9%。

1.2.5線性范圍試驗(yàn) 準(zhǔn)確移取各儲(chǔ)備液1.0，3.0，4.0，5.0，6.0，10 ml至100 ml 容量瓶中， 用N，N-二甲基甲酰胺稀釋至刻度，搖勻，制得了相當(dāng)于混合對(duì)照溶液的20%，60%，80%，100%，120%，200%的線性系列溶液。按2.1項(xiàng)的條件進(jìn)樣，以線性溶液的濃度為橫坐標(biāo)，以相應(yīng)被測(cè)物的峰面積為縱坐標(biāo)，進(jìn)行線性回歸，得到的回歸方程分別為：二氯甲烷Y=366.5X-0.699，r=0.9997；四氫呋喃Y=1918X-0.6，r=0.9999；正己烷Y=14886.8X-0.54，r=0.9998。

1.2.6重復(fù)性試驗(yàn) 連續(xù)重復(fù)進(jìn)樣供試溶液6次，以系統(tǒng)適應(yīng)性項(xiàng)下的對(duì)照溶液為參考，分別計(jì)算供試樣品中各溶劑的殘留量結(jié)果二氯甲烷為467PPM（RSD=1.2%）、四氫呋喃154PPM（RSD=0.8%）、正己烷88PPM（RSD=2.2%）。

1.2.7回收率試驗(yàn) 分別精密稱取0.1g供試樣品置于9個(gè)頂空瓶中，每分別加入5 ml線性范圍項(xiàng)下的20%，100%，200%線性測(cè)試溶液各3次。按2.1項(xiàng)下的條件進(jìn)樣各溶液，計(jì)算各溶劑的回收率，結(jié)果二氯甲烷、四氫呋喃、正己烷的回收率分別為102.4%、95.7%、103.9%，RSD分別為1.6%、0.8%、3.0%。

2樣品測(cè)定結(jié)果

精密稱取三個(gè)批號(hào)（20121201，20121202，20121203）的原料藥各0.1 g置于頂空瓶中，采用本方法進(jìn)行檢測(cè)，見(jiàn)表2，根據(jù)人用藥物注冊(cè)技術(shù)要求國(guó)際協(xié)調(diào)會(huì)（ICH）中Q3C的規(guī)定，二氯甲烷、正己烷、四氫呋喃均為二類溶劑，所測(cè)三批樣品均符合要求。

參考文獻(xiàn)：

[1]國(guó)家藥典委員會(huì).中國(guó)藥典2010版，二部[M].中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2012：附錄61-65.

編輯/肖慧