摘要:目的 研究比較在臨床中應(yīng)用PCR檢查法與細(xì)菌培養(yǎng)法于陰道細(xì)菌檢查的檢驗(yàn)效果。方法 選擇自2012年2月~2013年9月收治在我院的120例需要做陰道細(xì)菌檢查的患者,在患者的陰道后穹窿處采集其陰道分泌物,然后分別采取PCR檢查法與細(xì)菌培養(yǎng)法進(jìn)行陰道細(xì)菌檢查,對(duì)兩組方法的檢驗(yàn)效果進(jìn)行對(duì)比。結(jié)果 細(xì)菌培養(yǎng)法的細(xì)菌檢出率為63.3%,而PCR檢查法的細(xì)菌檢出率為75.8%,兩組效果差異明顯(P>0.05),具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論 PCR檢查法對(duì)于陰道細(xì)菌的檢出率更高,更準(zhǔn)確,并且應(yīng)用儀器使操作簡單快捷,具有在臨床廣泛推廣的價(jià)值。
關(guān)鍵詞:PCR檢查法;細(xì)菌培養(yǎng)法;陰道細(xì)菌檢查;效果
陰道炎癥是臨床常見的婦科疾病之一,基于此病的發(fā)病緩慢,且癥狀不夠明顯,臨床患者對(duì)于此病的重視欠缺,但此疾病嚴(yán)重時(shí)可以導(dǎo)致腹部以及盆腔疾病等, 在極嚴(yán)重時(shí)甚至導(dǎo)致不孕 。因此針對(duì)此病及時(shí)且有效的檢查診斷,對(duì)于致病菌的明確及采取特異性治療至關(guān)重要。本文筆者選擇自2012年2月~2013年9月收治在我院的120例懷疑患有陰道炎的患者,在患者的陰道后穹窿處采集其陰道分泌物,然后分別采取PCR檢查法與細(xì)菌培養(yǎng)法進(jìn)行陰道細(xì)菌檢查,進(jìn)而比較兩種檢查方法的效果?,F(xiàn)匯報(bào)研究結(jié)果如下。
1 資料與方法
1.1一般資料 選擇自2012年2月~2013年9月收治在我院的120例需要做陰道細(xì)菌檢查的患者,進(jìn)入研究的患者全部為育齡期的婦女,年齡25~49歲,平均為(33.29±4.2)歲,且進(jìn)入研究的所有患者均存在外陰異味、瘙癢、白帶分泌增多以及慢性陰道炎等情況。
1.2方法 進(jìn)入研究的120例患者在其陰道后穹窿處采集其陰道分泌物,將分泌物放置于無菌鹽水中,然后分別采取PCR檢查法與細(xì)菌培養(yǎng)法進(jìn)行陰道細(xì)菌檢查,進(jìn)而比較兩種檢查方法的效果。
1.2.1細(xì)菌培養(yǎng)法 將置入生理鹽水中的陰道分泌物取出,后放入相應(yīng)的培養(yǎng)基中,置入含 CO2孵箱中進(jìn)行時(shí)長為48h的培養(yǎng)。 待菌落長成后將其培養(yǎng)面上露滴狀、灰色、光滑以及半透明樣的菌落群挑取出來進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化的鑒定,并按照嚴(yán)格的標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行執(zhí)行。
1.2.2PCR檢查法 首先取出1000μL混有無菌生理鹽水的患者陰道分泌物置于離心機(jī)的離心管中進(jìn)行離心,設(shè)置轉(zhuǎn)述為1200r/min,持續(xù)離心15min,離心完畢后將所得到的上清液全部移除。向所得到的陰道分泌物中加入一定量的組織裂解液,后置于60℃的水浴鍋中,于10~15min后取出再次放入離心管中進(jìn)行離心,轉(zhuǎn)數(shù)仍為1200r/min,持續(xù)10min,將所得到的上清液取出少許用來制作DNA模板,后進(jìn)行DNA的體外擴(kuò)增,并在對(duì)細(xì)菌進(jìn)行陰陽性對(duì)比的時(shí)候要選擇制作一個(gè)DNA模版作為陰性對(duì)照,在此陰性對(duì)照里除不加入模板DNA之外,其余操作皆相同。在進(jìn)行擴(kuò)增DNA模版時(shí),向模版中加入緩沖對(duì)、雙蒸餾水、引物以及模板等,之后放入PCR儀中進(jìn)行定時(shí)循環(huán)。
1.3評(píng)價(jià)方法 對(duì)兩種實(shí)驗(yàn)方法下細(xì)菌檢出的種類及檢出率進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析并進(jìn)行對(duì)比。
1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 文中所用資料數(shù)據(jù)應(yīng)用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件包對(duì)其進(jìn)行分析,有效率對(duì)比及計(jì)量資料采用χ2檢驗(yàn),配對(duì)樣本及計(jì)數(shù)資料采用t檢驗(yàn),P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
2 結(jié)果
進(jìn)入研究的120例患者經(jīng)過細(xì)菌培養(yǎng)法和PCR 檢驗(yàn)法兩種方法檢驗(yàn)后,實(shí)驗(yàn)結(jié)果得出數(shù)據(jù)顯示,PCR的方法得出的檢驗(yàn)結(jié)果中陽性者共 91 例 ,其中包括戛納桿菌62例,棒狀桿菌16例, 腸球菌 13例,另外, 陰性者共 19 例, 細(xì)菌檢出率總體為75.8%;應(yīng)用細(xì)菌培養(yǎng)法得出的檢驗(yàn)結(jié)果中包括陽性者 76例 , 其中有戛納桿菌 49 例,棒狀桿菌 16例,腸球菌 11 例,另外, 陰性者共44 例, 細(xì)菌的檢出率為 63.3%。 由此可以得出結(jié)論 ,在臨床中應(yīng)用PCR 檢查法較細(xì)菌培養(yǎng)法的檢出療效更好,其細(xì)菌檢出率更高且更加精確, 并且此法的臨床操作簡單易行,操作方法容易理解及實(shí)施,因此無論是在大中型醫(yī)院還是小型的社區(qū)醫(yī)院均可以投入實(shí)行,與之相反,細(xì)菌培養(yǎng)法的操作要求則較高且標(biāo)準(zhǔn)復(fù)雜, 難以在各類型醫(yī)院中廣泛開展。 經(jīng)過全面對(duì)比后, PCR 檢驗(yàn)法和細(xì)菌培養(yǎng)法兩種方法的細(xì)菌檢出率差異明(P<0.05),具有統(tǒng)計(jì)學(xué)的意義,見表1。
3 討論
在日常健康中,白帶的量及性狀能在一定程度上反映婦女的婦科健康情況,因此婦女的日常白帶分泌物增多時(shí)應(yīng)引起重視, 及時(shí)到醫(yī)院進(jìn)行婦科檢查。近年來,由于各種生活因素及生活習(xí)慣的影響,婦女的陰道類疾病呈逐年增長的趨勢(shì)[1]。諸如常見的陰道炎等疾病其致病因素主要為陰道內(nèi)的寄生菌群的失衡,破壞了正常情況下的菌群平衡狀態(tài),而各菌群平衡狀態(tài)的維持主要依靠陰道的各種分泌物,尤其是陰道上皮細(xì)胞以及陰道桿菌。當(dāng)各種因素導(dǎo)致陰道桿菌的大量死亡,陰道菌群的平衡狀態(tài)被打破,其中致病菌群在婦女的陰道內(nèi)大量的繁殖,在消耗大量糖原等營養(yǎng)物質(zhì)的同時(shí),使陰道上皮細(xì)胞失去原有的代謝能力從而使陰道內(nèi)發(fā)生酸堿平衡紊亂 ,隨之陰道上皮細(xì)胞的正常的屏障功能失去發(fā)生炎癥,導(dǎo)致陰道炎的發(fā)生。由于此疾病的起病緩慢,且最初的癥狀明顯,因此不易引起婦女們的重視,嚴(yán)重時(shí)會(huì)引起腹部及盆腔的相關(guān)疾病,甚至導(dǎo)致不孕的發(fā)生,因此目前臨床強(qiáng)調(diào)對(duì)于此疾病的有效及時(shí)的檢驗(yàn)與診斷顯得至關(guān)重要[2]。細(xì)菌培養(yǎng)法一直以來是臨床中被公認(rèn)的檢查婦女陰道菌群的黃金標(biāo)準(zhǔn),但由于此種方法的操作步驟相對(duì)于 PCR的檢驗(yàn)法較繁瑣,且不容易操作及實(shí)驗(yàn)室的相對(duì)要求較高,難以在大中小型醫(yī)院進(jìn)行全面的大范圍推廣。PCR 的檢驗(yàn)法是目前臨床中新出現(xiàn)的一種簡便便捷的檢驗(yàn)技術(shù),其菌體的檢出率較高,精準(zhǔn)度好且較易展開操作,因此近幾年在臨床中得到了較為廣泛的應(yīng)用。在本研究中,筆者選擇收治在我院的120例需要做陰道細(xì)菌檢查的患者,在患者的陰道后穹窿處采集其陰道分泌物,然后分別采取PCR檢查法與細(xì)菌培養(yǎng)法進(jìn)行陰道細(xì)菌檢查,對(duì)兩組方法的檢驗(yàn)效果進(jìn)行了對(duì)比,結(jié)果對(duì)上述說法進(jìn)行了進(jìn)一步的證實(shí)。
綜上所述,PCR檢查法對(duì)于陰道細(xì)菌的檢出率更高,更準(zhǔn)確,并且應(yīng)用儀器使操作簡單快捷,具有在臨床廣泛推廣的價(jià)值。
參考文獻(xiàn):
[1]王一葉.比較PCR檢驗(yàn)法和細(xì)菌培養(yǎng)法用于陰道細(xì)菌檢驗(yàn)的效果[J].中外醫(yī)療,2013,32(24):192-193.
[2]李華鋒,陳英姿.應(yīng)用PCR法與細(xì)菌培養(yǎng)法檢測(cè)陰道細(xì)菌的比較分析[J].中國保健營養(yǎng)(中旬刊),2012,(6):41-42.
編輯/成森