何 軍，張 姝，許 琦，尹 科，張 捷，田洪倫，祝 靜，羅 潔

(貴州省第二人民醫(yī)院 檢驗(yàn)科，貴州 貴陽(yáng) 50004)

肺炎支原體(my-coplasma，pneumoniae，MP)感染小兒可引起肺炎支原體肺炎(mycoplasma pneumoniapneumonia，MPP)，在MPP 的發(fā)病過(guò)程中存在體液免疫、細(xì)胞免疫平衡紊亂，主要表現(xiàn)為T(mén)淋巴細(xì)胞免疫功能低下和B 淋巴細(xì)胞異常活化［1－2］。白細(xì)胞介素作為由多種細(xì)胞產(chǎn)生并作用于多種細(xì)胞的一類細(xì)胞因子，具有調(diào)節(jié)固有免疫和適應(yīng)性免疫的作用，參與免疫細(xì)胞分化發(fā)育、介導(dǎo)炎癥反應(yīng)等。本研究通過(guò)檢測(cè)支原體肺炎患兒血清中白細(xì)胞介素-9(IL-9)、白細(xì)胞介素-17(IL-17)水平來(lái)了解肺炎支原體感染對(duì)機(jī)體免疫功能的影響。

1 對(duì)象與方法

1.1 對(duì)象

收集2013 年8 月～12 月兒科門(mén)診初診因發(fā)熱咳嗽、血液肺炎支原體抗體陽(yáng)性的肺炎患兒60例納入實(shí)驗(yàn)組，其中男35 例，女25 例，年齡(6±2.8)歲。所有病例均符合《實(shí)用兒科學(xué)》中肺炎支原體肺炎診斷標(biāo)準(zhǔn)，排除哮喘、并發(fā)癥及免疫缺陷疾病患兒;入選患兒半年內(nèi)無(wú)免疫制劑使用史。對(duì)照組20 例，均為健康查體兒童，男12 例，女8 例，年齡(5±3.1)歲。兩組一般資料比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P ＞0.05)。

1.2 主要試劑和儀器

MYCO Ⅱ肺炎支原體抗體診斷試劑盒(被動(dòng)凝集法)為日本富士瑞必歐株式會(huì)社生產(chǎn)，試劑批號(hào)WP40418;IL-9、IL-17 試劑為上海瓦蘭生物科技有限公司生產(chǎn)，批號(hào)分別為WK-E10253 及WKE10092。北京普朗(DNM-9602)酶標(biāo)儀。

1.3 方法及檢驗(yàn)指標(biāo)

血樣本為采集清晨空腹靜脈血3 mL 于真空無(wú)抗凝采血管，經(jīng)37 ℃水浴30 min，3 000 r/min 離心15 min，取血清1.5 mL 于EP 管，－80 ℃冰箱保存待測(cè)。肺炎支原體抗體IgM 檢測(cè):按1∶80、1∶60、1∶320作倍比稀釋，以≥1∶80 稀釋倍數(shù)滴度為肺炎支原體抗體陽(yáng)性;根據(jù)最終稀釋倍數(shù)分1∶80 倍、1∶160倍及≥1∶320 倍組，用ELISA 法檢測(cè)每組血清IL-9、IL-17 水平，以門(mén)診正常健康體檢者血清樣本為對(duì)照。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

用SPSS 17.0 統(tǒng)計(jì)軟件處理數(shù)據(jù)。計(jì)量數(shù)據(jù)以均數(shù)加減標(biāo)準(zhǔn)差)表示，組間比較用方差分析，LSD 法。以P ＜0.05 表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

肺炎支原體抗體陽(yáng)性1∶80 倍和1∶160 倍患兒的IL-9 水平較正常對(duì)照降低(P ＜0.05);肺炎支原體抗體陽(yáng)性從1∶80 倍組、1∶160 倍組及≥1∶320倍組逐漸升高，1∶80 倍組與≥1∶320 倍組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P ＜0.05);IL-17 水平，肺炎支原體抗體陽(yáng)性各滴度組較正常對(duì)照降低(P ＜0.05)，且組間變化不大(P ＞0.05)。見(jiàn)表1。

表1 各肺炎支原體抗體滴度組與對(duì)照組IL-9、IL-17 水平，(ng/L)Tab.1 Serum level of IL-9 and IL-17 in the different groups

表1 各肺炎支原體抗體滴度組與對(duì)照組IL-9、IL-17 水平，(ng/L)Tab.1 Serum level of IL-9 and IL-17 in the different groups

與正常對(duì)照比較，(1)P ＜0.05;與≥1∶320 比較，(2)P ＜0.05

細(xì)胞因子1∶80肺1炎∶1支60原 體抗體≥滴1∶度320正常對(duì)照IL-9 14.82±5.11(1)(2)16.37±6.0(1)18.94±5.86 21.09±4.23 IL-17 4.88±2.90(1) 4.71±2.38(1) 5.77±1.94(1)8.58±1.37

3 討論

MP 是一種介于病毒和細(xì)菌之間的最小原核生物，無(wú)細(xì)胞壁，能自行繁殖，主要經(jīng)呼吸道傳染，MP 感染兒童機(jī)體后，血行播散釋放毒物造成機(jī)體細(xì)胞損傷，MP 抗原還可刺激B 細(xì)胞產(chǎn)生免疫復(fù)合物而致機(jī)體免疫損傷而引起機(jī)體免疫功能變化。

IL-9 由CD4+T 細(xì)胞產(chǎn)生的新型Th9 細(xì)胞分泌，調(diào)節(jié)T 細(xì)胞和B 細(xì)胞參與應(yīng)答，有學(xué)者認(rèn)為IL-9 可作為T(mén)h17 的衍生因子對(duì)炎性疾病有促進(jìn)作用［3］。Th17 細(xì)胞是近年發(fā)現(xiàn)的細(xì)胞亞群，IL-23 是維持Th17 存活的重要因子，Th17 能否能擴(kuò)增和存活受IL-23 的影響［4］，Th17 主要分泌的IL-17 可發(fā)揮抗細(xì)菌、抗真菌、抗寄生蟲(chóng)等作用［5］，在抗感染免疫中的作用越來(lái)越受到重視［6］。本研究結(jié)果顯示，在肺炎支原體肺炎患兒肺炎支原體抗體不同滴度組，血清IL-9、IL-17 水平較正常對(duì)照低，提示肺炎支原體感染可能導(dǎo)致機(jī)體血清IL-9 和IL-17水平降低。IL-9 和IL-17 同是前炎癥因子，在感染炎癥時(shí)二者本應(yīng)表現(xiàn)升高，但在肺炎支原體肺炎患兒反而較正常對(duì)照組降低，IL-17 降低與王冬梅等［7］報(bào)道存在差異，也與國(guó)外學(xué)者利用小鼠動(dòng)物模型，研究的結(jié)果存在差異［8］，這是否與入組研究對(duì)象的采集時(shí)間、排除標(biāo)準(zhǔn)及研究方法等有關(guān)，尚需進(jìn)一步研究。本研究發(fā)現(xiàn)IL-9 水平在肺炎支原體抗體高滴度時(shí)較低滴度時(shí)增高，作為前炎癥因子，可能隨肺炎支原體感染機(jī)體強(qiáng)度有關(guān)。本研究顯示的IL-9 升高，IL-17 變化不大，可能在肺炎支原體肺炎患兒中IL-9 無(wú)關(guān)Th17 細(xì)胞分化［9］，但此機(jī)制尚需進(jìn)一步驗(yàn)證。

IL-9、IL-17 在肺炎支原體肺炎患兒血清中水平改變明顯，肺炎支原體肺炎患兒感染肺炎支原體時(shí)機(jī)體IL-9、IL-17 水平降低，隨著肺炎支原體抗體稀釋滴度倍數(shù)陽(yáng)性增大，IL-9 水平逐漸升高。證明肺炎支原體感染患兒，機(jī)體IL-17 可能未參與機(jī)體免疫清除肺炎支原體的作用，而IL-9 隨感染程度加深，逐漸發(fā)揮免疫清除肺炎支原體的作用，為進(jìn)一步認(rèn)識(shí)肺炎支原體感染對(duì)兒童機(jī)體免疫功能的影響提供了理論依據(jù)。

［1］王娟，段全紀(jì)，張迎春.地塞米松對(duì)支原體肺炎肺外并發(fā)癥患兒免疫指標(biāo)的影響［J］.貴陽(yáng)醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2012(1):60－63.

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