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        肺炎支原體肺炎患兒血清中IL-9、IL-17 水平

        2015-04-28 02:04:58田洪倫
        關(guān)鍵詞:滴度支原體機(jī)體

        何 軍,張 姝,許 琦,尹 科,張 捷,田洪倫,祝 靜,羅 潔

        (貴州省第二人民醫(yī)院 檢驗(yàn)科,貴州 貴陽(yáng) 50004)

        肺炎支原體(my-coplasma,pneumoniae,MP)感染小兒可引起肺炎支原體肺炎(mycoplasma pneumoniapneumonia,MPP),在MPP 的發(fā)病過(guò)程中存在體液免疫、細(xì)胞免疫平衡紊亂,主要表現(xiàn)為T(mén)淋巴細(xì)胞免疫功能低下和B 淋巴細(xì)胞異常活化[1-2]。白細(xì)胞介素作為由多種細(xì)胞產(chǎn)生并作用于多種細(xì)胞的一類細(xì)胞因子,具有調(diào)節(jié)固有免疫和適應(yīng)性免疫的作用,參與免疫細(xì)胞分化發(fā)育、介導(dǎo)炎癥反應(yīng)等。本研究通過(guò)檢測(cè)支原體肺炎患兒血清中白細(xì)胞介素-9(IL-9)、白細(xì)胞介素-17(IL-17)水平來(lái)了解肺炎支原體感染對(duì)機(jī)體免疫功能的影響。

        1 對(duì)象與方法

        1.1 對(duì)象

        收集2013 年8 月~12 月兒科門(mén)診初診因發(fā)熱咳嗽、血液肺炎支原體抗體陽(yáng)性的肺炎患兒60例納入實(shí)驗(yàn)組,其中男35 例,女25 例,年齡(6±2.8)歲。所有病例均符合《實(shí)用兒科學(xué)》中肺炎支原體肺炎診斷標(biāo)準(zhǔn),排除哮喘、并發(fā)癥及免疫缺陷疾病患兒;入選患兒半年內(nèi)無(wú)免疫制劑使用史。對(duì)照組20 例,均為健康查體兒童,男12 例,女8 例,年齡(5±3.1)歲。兩組一般資料比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P >0.05)。

        1.2 主要試劑和儀器

        MYCO Ⅱ肺炎支原體抗體診斷試劑盒(被動(dòng)凝集法)為日本富士瑞必歐株式會(huì)社生產(chǎn),試劑批號(hào)WP40418;IL-9、IL-17 試劑為上海瓦蘭生物科技有限公司生產(chǎn),批號(hào)分別為WK-E10253 及WKE10092。北京普朗(DNM-9602)酶標(biāo)儀。

        1.3 方法及檢驗(yàn)指標(biāo)

        血樣本為采集清晨空腹靜脈血3 mL 于真空無(wú)抗凝采血管,經(jīng)37 ℃水浴30 min,3 000 r/min 離心15 min,取血清1.5 mL 于EP 管,-80 ℃冰箱保存待測(cè)。肺炎支原體抗體IgM 檢測(cè):按1∶80、1∶60、1∶320作倍比稀釋,以≥1∶80 稀釋倍數(shù)滴度為肺炎支原體抗體陽(yáng)性;根據(jù)最終稀釋倍數(shù)分1∶80 倍、1∶160倍及≥1∶320 倍組,用ELISA 法檢測(cè)每組血清IL-9、IL-17 水平,以門(mén)診正常健康體檢者血清樣本為對(duì)照。

        1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

        用SPSS 17.0 統(tǒng)計(jì)軟件處理數(shù)據(jù)。計(jì)量數(shù)據(jù)以均數(shù)加減標(biāo)準(zhǔn)差)表示,組間比較用方差分析,LSD 法。以P <0.05 表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

        2 結(jié)果

        肺炎支原體抗體陽(yáng)性1∶80 倍和1∶160 倍患兒的IL-9 水平較正常對(duì)照降低(P <0.05);肺炎支原體抗體陽(yáng)性從1∶80 倍組、1∶160 倍組及≥1∶320倍組逐漸升高,1∶80 倍組與≥1∶320 倍組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P <0.05);IL-17 水平,肺炎支原體抗體陽(yáng)性各滴度組較正常對(duì)照降低(P <0.05),且組間變化不大(P >0.05)。見(jiàn)表1。

        表1 各肺炎支原體抗體滴度組與對(duì)照組IL-9、IL-17 水平,(ng/L)Tab.1 Serum level of IL-9 and IL-17 in the different groups

        表1 各肺炎支原體抗體滴度組與對(duì)照組IL-9、IL-17 水平,(ng/L)Tab.1 Serum level of IL-9 and IL-17 in the different groups

        與正常對(duì)照比較,(1)P <0.05;與≥1∶320 比較,(2)P <0.05

        細(xì)胞因子1∶80肺1炎∶1支60原 體抗體≥滴1∶度320正常對(duì)照IL-9 14.82±5.11(1)(2)16.37±6.0(1)18.94±5.86 21.09±4.23 IL-17 4.88±2.90(1) 4.71±2.38(1) 5.77±1.94(1)8.58±1.37

        3 討論

        MP 是一種介于病毒和細(xì)菌之間的最小原核生物,無(wú)細(xì)胞壁,能自行繁殖,主要經(jīng)呼吸道傳染,MP 感染兒童機(jī)體后,血行播散釋放毒物造成機(jī)體細(xì)胞損傷,MP 抗原還可刺激B 細(xì)胞產(chǎn)生免疫復(fù)合物而致機(jī)體免疫損傷而引起機(jī)體免疫功能變化。

        IL-9 由CD4+T 細(xì)胞產(chǎn)生的新型Th9 細(xì)胞分泌,調(diào)節(jié)T 細(xì)胞和B 細(xì)胞參與應(yīng)答,有學(xué)者認(rèn)為IL-9 可作為T(mén)h17 的衍生因子對(duì)炎性疾病有促進(jìn)作用[3]。Th17 細(xì)胞是近年發(fā)現(xiàn)的細(xì)胞亞群,IL-23 是維持Th17 存活的重要因子,Th17 能否能擴(kuò)增和存活受IL-23 的影響[4],Th17 主要分泌的IL-17 可發(fā)揮抗細(xì)菌、抗真菌、抗寄生蟲(chóng)等作用[5],在抗感染免疫中的作用越來(lái)越受到重視[6]。本研究結(jié)果顯示,在肺炎支原體肺炎患兒肺炎支原體抗體不同滴度組,血清IL-9、IL-17 水平較正常對(duì)照低,提示肺炎支原體感染可能導(dǎo)致機(jī)體血清IL-9 和IL-17水平降低。IL-9 和IL-17 同是前炎癥因子,在感染炎癥時(shí)二者本應(yīng)表現(xiàn)升高,但在肺炎支原體肺炎患兒反而較正常對(duì)照組降低,IL-17 降低與王冬梅等[7]報(bào)道存在差異,也與國(guó)外學(xué)者利用小鼠動(dòng)物模型,研究的結(jié)果存在差異[8],這是否與入組研究對(duì)象的采集時(shí)間、排除標(biāo)準(zhǔn)及研究方法等有關(guān),尚需進(jìn)一步研究。本研究發(fā)現(xiàn)IL-9 水平在肺炎支原體抗體高滴度時(shí)較低滴度時(shí)增高,作為前炎癥因子,可能隨肺炎支原體感染機(jī)體強(qiáng)度有關(guān)。本研究顯示的IL-9 升高,IL-17 變化不大,可能在肺炎支原體肺炎患兒中IL-9 無(wú)關(guān)Th17 細(xì)胞分化[9],但此機(jī)制尚需進(jìn)一步驗(yàn)證。

        IL-9、IL-17 在肺炎支原體肺炎患兒血清中水平改變明顯,肺炎支原體肺炎患兒感染肺炎支原體時(shí)機(jī)體IL-9、IL-17 水平降低,隨著肺炎支原體抗體稀釋滴度倍數(shù)陽(yáng)性增大,IL-9 水平逐漸升高。證明肺炎支原體感染患兒,機(jī)體IL-17 可能未參與機(jī)體免疫清除肺炎支原體的作用,而IL-9 隨感染程度加深,逐漸發(fā)揮免疫清除肺炎支原體的作用,為進(jìn)一步認(rèn)識(shí)肺炎支原體感染對(duì)兒童機(jī)體免疫功能的影響提供了理論依據(jù)。

        [1]王娟,段全紀(jì),張迎春.地塞米松對(duì)支原體肺炎肺外并發(fā)癥患兒免疫指標(biāo)的影響[J].貴陽(yáng)醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2012(1):60-63.

        [2]郭彥斌,尚莉麗,桂金貴,等.肺炎支原體肺炎患兒機(jī)體免疫功能變化[J].安徽醫(yī)學(xué),2014(7):913-915.

        [3]Elizabeth C.Nowak,Casey T,et al.IL-9 as a mediator of Th17-driven inflammatory disease[J].Exp.Med,2009:1653-1660.

        [4]Betteli E,Carrier Y,Gao W,et al.Reciprocal developmental pathways for the generation of pathogenic effector Th17 and regulatory T cells[J].Nature,2006(3):235-238.

        [5]張玉俠.效應(yīng)分子IL-17 的抗感染作用[J].國(guó)際免疫學(xué)雜志,2009(3):241-244.

        [6]Curtis MM,Way SS.Interleukin-17 in host defense against bacterial,mycobacterial and fungal pathogens[J].Immunology,2009(2):177-185.

        [7]王冬梅,姜采榮,王茹,等.肺炎支原體肺炎患兒血清中白介素-23/白介素-17 的表達(dá)[J].臨床兒科雜志,2013(10):933-936.

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        [9]Wassim E,Elizabeth M,Radshaw B,et al.IL-9 induces differentiation of Th17 cells and enhances function of FoxP3+ natural regulatory T cells[J].PNAS,2009:12885-12890.

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