劉 磊，周長榮，溫小軍＊

(貴州醫(yī)科大學(xué) 生物教研室，貴州 貴陽 550004)

地球上昆蟲有相當(dāng)多的一部分是農(nóng)業(yè)、林業(yè)和衛(wèi)生害蟲［1］。蚊蟲是傳播瘧疾、黃熱病、登革熱及腎綜合征出血熱等多種疾病的傳播者，嚴(yán)重威脅到人類健康［2］。目前，人們普遍使用各種化學(xué)殺蟲劑及化學(xué)驅(qū)避劑驅(qū)逐蚊蟲［3］，但長期大量的使用化學(xué)殺蟲劑及農(nóng)藥驅(qū)蚊，會使蚊蟲產(chǎn)生不同程度的抗藥性，同時也會對環(huán)境和人體健康產(chǎn)生一定的危害［4］。有學(xué)者發(fā)現(xiàn)植物揮發(fā)油中含有豐富的生物活性物質(zhì)，對蚊蟲具有一定的毒殺、驅(qū)避和熏蒸作用，這種物質(zhì)在環(huán)境中易降解、對人、畜無害、氣味宜人、揮發(fā)性也較好，且適合室內(nèi)及人體體外使用［5－7］。本研究通過對不同濃度和配比的八角茴香、樟樹葉和花椒植物揮發(fā)油的驅(qū)蚊效果進(jìn)行研究，為研制新型驅(qū)蚊防控劑提供基礎(chǔ)資料。

1 材料與方法

1.1 供試蚊蟲及植物

供試蚊蟲為健康(4±2)日齡的白紋伊蚊、致倦庫蚊成蚊，由貴陽醫(yī)學(xué)院生物教研室蚊房馴養(yǎng)，馴養(yǎng)溫度為(26±2)℃;相對濕度為(65±5)%，光照周期為14L ∶10D;供試植物有:樟樹，貴陽醫(yī)學(xué)院生長樟樹的新鮮樟樹葉;花椒，由貴州省貴陽市萬東橋下藥材市場供應(yīng)，取其果實;八角茴香，由貴州省貴陽市萬東橋下藥材市場供應(yīng)，取其果實;供試植物均由貴陽醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院龍慶德教授鑒定。

1.2 方法

1.2.1 揮發(fā)油的制備 花椒、八角茴香用粉碎機粉碎(過20 目篩)，新鮮樟樹葉洗凈后晾干，用剪刀進(jìn)行粉碎，約玉米粒大小;用電子天平稱取45 g，放入圓底燒瓶內(nèi)，按1∶8的比例用量筒量取360 mL蒸餾水浸泡;混勻，靜止30 min 左右震蕩一次，浸泡約3 h(新鮮植物浸泡后與為浸泡的提取揮發(fā)油量無明顯變化)。組裝揮發(fā)油提取裝置:用電子恒溫加熱套進(jìn)行加熱使之沸騰，并保持微沸3 h，至測定器中油量不再增加，停止加熱，放置片刻，開啟測定器下端的開關(guān)，將蒸餾水緩緩放出，至油層上端到達(dá)刻度0 線上面5 mm 處為止。放置3 min，再開啟活塞使油層降至其上端恰與刻度0 線平齊，放置2 min，讀取揮發(fā)油量。用99.8%乙醇，分別將3種植物揮發(fā)油濃度稀釋為:2%、5%、10%3 種濃度，4 ℃儲存?zhèn)溆茫?］。

1.2.2 驅(qū)避效果 按3 種植物揮發(fā)油稀釋好的不同濃度設(shè)計進(jìn)行實驗分組，先分為樟樹葉、花椒及八角茴香3 組，每組又按濃度分為空白組、實驗組(2%、5%、10%)4 組;選取攻擊實驗合格、體質(zhì)量(20±2)g 的小鼠分別固定于一長方形的鼠籠里，并全身噴灑蒸餾水或2%、5%、10%的植物揮發(fā)油0.72 mL，用吸蚊器分別吸取已保持饑餓狀態(tài)12 h的白紋伊蚊或致倦庫蚊各100 只，蚊蟲碰觸小白鼠的次數(shù)記為叮咬小鼠次數(shù)，時間約為3 h，查看不同時間段內(nèi)(18∶00 ～21∶00)蚊蟲叮咬小白鼠的數(shù)量，分別進(jìn)行3 次驅(qū)蚊試驗，使用影像設(shè)備進(jìn)行全程錄像，計算有效保護(hù)率，觀察驅(qū)避效果。分別從3 種驅(qū)蚊植物中選取驅(qū)蚊效果最佳的濃度，任意2種植物揮發(fā)油，按2∶1 或1∶2 比例進(jìn)行混配復(fù)方，按上法觀察驅(qū)避效果。

1.3 統(tǒng)計學(xué)處理

采用SPSS 19.0 軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差)表示，多組間比較采用單因素方差分析(One Way ANOVA)，兩兩比較時，若方差齊時，采用LSD 檢驗;若方差不齊時，采用Games－Howell 檢驗。P ＜0.05 為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

3 種植物揮發(fā)油對小鼠驅(qū)避白蚊伊蚊及致倦庫蚊叮咬有效保護(hù)率的濃度依次為10%＞5%＞2%，兩兩比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P ＜0.05)，在10%濃度對白蚊伊蚊、致倦庫蚊驅(qū)避效果最佳的分別是樟樹葉和花椒。見表1。不同混配復(fù)方植物揮發(fā)油對白紋伊蚊和致倦庫蚊均有明顯的有效保護(hù)率，不同混配復(fù)方有效保護(hù)率相當(dāng)(P ＞0.05)，但白紋伊蚊驅(qū)蚊和致倦庫蚊有效保護(hù)率最佳的是樟樹葉∶八角茴香1∶2 混配復(fù)方植物揮發(fā)油，有效保護(hù)率高于單方。見表2。

表1 3 種揮發(fā)油對小鼠驅(qū)避蚊蟲叮咬的有效保護(hù)率(%)Tab.1 The repellent activities of three kinds of essential oils against two species of mosquitoes in different concentrations

表2 不同混配復(fù)方植物揮發(fā)油對小鼠驅(qū)避蚊蟲叮咬的有效保護(hù)率Tab.2 The repellent activities of different mixed compound against two species of mosquitoes

3 討論

復(fù)方樟腦凝膠制劑對白紋伊蚊驅(qū)蚊效果有效且保護(hù)率時間較長，竹葉花椒果實揮發(fā)油對白紋伊蚊和致倦庫蚊都具有明顯的殺蟲活性，花椒揮發(fā)油不僅具有較強的殺蟲活性，而且還具有一定的抑菌活性［9－11］。有研究發(fā)現(xiàn)11 種植物揮發(fā)油均對蚊蟲具有較好的毒殺活性，并隨著濃度的升高，毒殺能力也逐漸增大，部分復(fù)方混劑具有增效的作用，花椒揮發(fā)油對玉米象、赤擬谷盜都具有較強的驅(qū)蟲、殺蟲活性［12－15］。

本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)單獨使用時均有不同程度的驅(qū)蚊效果，且驅(qū)蚊效果隨著濃度的升高而增加(P＜0.05)，與文獻(xiàn)報道一致［9］。有學(xué)者認(rèn)為驅(qū)避劑的有效保護(hù)率＞80%為有效，＜80%則視為失去保護(hù)作用［10］。本研究結(jié)果顯示3 種揮發(fā)油的3 種濃度中僅10%白蚊伊蚊和致倦庫蚊的有效保護(hù)率＞80%。所以本研究選取10%濃度植物揮發(fā)油，任意2 種植物揮發(fā)油在同濃度、不同比例下進(jìn)行混配復(fù)方的驅(qū)蚊效果測試，結(jié)果表明不同混配復(fù)方對白紋伊蚊和致倦庫蚊均有明顯的驅(qū)避效果，不同混配復(fù)方驅(qū)避效果相當(dāng)保護(hù)率均＞95%(P ＞0.05)，但白紋伊蚊驅(qū)蚊和致倦庫蚊驅(qū)蚊效果最佳的混配復(fù)方均為樟樹葉∶八角茴香為1∶2。本研究還發(fā)現(xiàn)雖然在10%濃度對白蚊伊蚊驅(qū)蚊、致倦庫蚊驅(qū)避效果最佳的分別是樟樹葉和花椒，但在2%和5%對白紋伊蚊及致倦庫蚊驅(qū)避效果較佳的揮發(fā)油都是樟樹葉，提示樟樹葉揮發(fā)油是一種具有開發(fā)潛力的蚊蟲驅(qū)避植物。對于揮發(fā)油的活性物質(zhì)組成和結(jié)構(gòu)、人體驅(qū)避實驗、持效期等有待進(jìn)一步研究。

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