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        竹節(jié)參總皂苷對Triton WR-1339誘發(fā)的高脂血癥小鼠降血脂作用研究

        2015-04-26 06:58:45賈銀芝楊中林
        亞太傳統(tǒng)醫(yī)藥 2015年12期
        關(guān)鍵詞:小鼠劑量血清

        賈銀芝,楊中林

        (中國藥科大學(xué) 天然藥物活性物質(zhì)與功能國家重點實驗室,江蘇 南京 210009)

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        竹節(jié)參總皂苷對Triton WR-1339誘發(fā)的高脂血癥小鼠降血脂作用研究

        賈銀芝,楊中林*

        (中國藥科大學(xué) 天然藥物活性物質(zhì)與功能國家重點實驗室,江蘇 南京 210009)

        目的:研究竹節(jié)參總皂苷的降血脂作用。方法:采用Triton WR-1339誘發(fā)急性高脂血癥小鼠模型,將66只雄性小鼠隨機(jī)分為空白組、模型組、非諾貝特組、竹節(jié)參總皂苷低劑量組、竹節(jié)參總皂苷中劑量組、竹節(jié)參總皂苷高劑量組,每組11只。觀察竹節(jié)參總皂苷對各組小鼠血清中總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)水平的影響。結(jié)果:與模型組比較,非諾貝特組可顯著降低小鼠血清TC、TG、LDL-C水平(P<0.01);竹節(jié)參總皂苷低劑量組(100mg/kg)可降低小鼠血清TC水平(P<0.05),顯著降低小鼠血清TG水平(P<0.01);竹節(jié)參總皂苷中劑量組(200mg/kg)可顯著降低小鼠血清TC、TG水平(P<0.01),降低小鼠血清LDL-C水平(P<0.05);竹節(jié)參總皂苷高劑量組(400mg/kg)可顯著降低小鼠血清TC、TG、LDL-C水平(P<0.01)。結(jié)論:竹節(jié)參總皂苷具有一定的降血脂作用,且呈劑量依賴性。

        高脂血癥;小鼠;竹節(jié)參總皂苷;Triton WR-1339

        近年來,心腦血管疾病已成為威脅人類健康的主要殺手,高脂血癥是引起心腦血管疾病的主要因素[1]。開發(fā)安全、有效且多靶點作用的降血脂藥物已成為全球研究熱點,中草藥安全、價廉、來源廣,可以發(fā)揮多途徑、多靶點作用,在降血脂方面具有得天獨厚的優(yōu)勢[2]。

        1 實驗材料

        1.1 試劑與試藥

        竹節(jié)參總皂苷(實驗室試樣品,批號:20131204);非諾貝特膠囊(法國利博福尼制藥公司,批號:21264);總膽固醇測定試劑盒(北京北化康泰臨床試劑有限公司);甘油三酯測定試劑盒(北京北化康泰臨床試劑有限公司);低密度脂蛋白膽固醇測定試劑盒(南京建成生物工程研究所);Triton WR-1339(美國 Sigma-Aldrich 公司)。

        1.2 儀器

        電子分析天平(北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司);80-2型低速離心機(jī)(江蘇金壇市金城國盛實驗儀器廠);HH-6數(shù)顯恒溫水浴鍋(國華電器有限公司);KQ-250E型超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有限公司);Epoch型酶標(biāo)儀(美國BioTek)。

        1.3 動物

        KM小鼠66只,SPF級,雄性,體重18~22g,購自上海杰思捷實驗動物有限公司。

        2 實驗方法

        2.1 實驗樣品液配制

        2.1.1 造模劑配制 將Triton WR-1339溶于生理鹽水配成濃度為40mg/mL的藥劑,給藥體積為10mL/kg,給藥劑量為400mg/kg。

        2.1.2 非諾貝特混懸液配制 精密稱取非諾貝特膠囊內(nèi)容物150mg,置于100mL鹽水瓶中,加100mL0.5%CMC-Na溶液,超聲處理,即得濃度為1.5mg/mL的非諾貝特混懸液,于4℃保存。

        2.1.3 竹節(jié)參總皂苷藥液配制 竹節(jié)參總皂苷低劑量組:精密稱取0.5g竹節(jié)參總皂苷粉末于100mL鹽水瓶中,加100mL0.5%CMC-Na溶液,超聲處理,即得濃度為5mg/mL的竹節(jié)參總皂苷藥液,于4℃保存。

        竹節(jié)參總皂苷中劑量組:精密稱取1g竹節(jié)參總皂苷粉末于100mL鹽水瓶中,加100mL0.5%CMC-Na溶液,超聲處理,即得濃度為10mg/mL的竹節(jié)參總皂苷藥液,于4℃保存。

        竹節(jié)參總皂苷高劑量組:精密稱取2g竹節(jié)參總皂苷粉末于100mL鹽水瓶中,加100mL0.5%CMC-Na溶液,超聲處理,即得濃度為20mg/mL的竹節(jié)參總皂苷藥液,于4℃保存。

        2.2 給藥造模

        昆明種雄性小鼠66只,適應(yīng)性飼養(yǎng)3天。將小鼠隨機(jī)分為空白組、模型組、非諾貝特組、竹節(jié)參總皂苷低劑量組、竹節(jié)參總皂苷中劑量組、竹節(jié)參總皂苷高劑量組,每組11只。空白組和模型組小鼠每天灌胃給予0.5%CMC-Na溶液(給藥體積均為20mL/kg);給藥組小鼠每天灌胃給予藥物,給藥劑量分別為:非諾貝特組30mg/kg,竹節(jié)參總皂苷低劑量組100mg/kg,竹節(jié)參總皂苷中劑量組200mg/kg,竹節(jié)參總皂苷高劑量組400mg/kg,給藥體積均為20mL/kg,連續(xù)給藥7天。

        末次給藥前16h,空白組小鼠腹腔注射生理鹽水(給藥體積為10mL/kg),其余各組小鼠腹腔注射Triton WR-1339,給藥劑量為400mg/kg,給藥體積為10mL/kg。末次給藥1h后,眼眶取血,靜置1h,離心分離血清,測定血清中TC、TG、LDL-C水平。

        2.3 統(tǒng)計學(xué)分析

        3 實驗結(jié)果

        實驗結(jié)果表明,與空白組比較,模型組血清TC、TG、LDL-C水平明顯升高,且差異具有顯著統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01),顯示急性高脂血癥小鼠模型成功;與模型組比較,非諾貝特組可顯著降低小鼠血清TC、TG、LDL-C水平(P<0.01);竹節(jié)參總皂苷低劑量組(100mg/kg)可降低小鼠血清TC水平(P<0.05),顯著降低小鼠血清TG水平(P<0.01);竹節(jié)參總皂苷中劑量組(200mg/kg)可顯著降低小鼠血清TC、TG水平(P<0.01),降低小鼠血清LDL-C水平(P<0.05);竹節(jié)參總皂苷高劑量組(400mg/kg)可顯著降低小鼠血清TC、TG、LDL-C水平(P<0.01)。各組小鼠血清中TC、TG、LDL-C水平測定結(jié)果見表1。

        表1 各組小鼠血清TC、TG、LDL-C測定結(jié)果

        組別TCTGLDL-C空白組(n=11)3.94±0.554.02±1.071.04±0.37模型組(n=11)10.08±1.41△△57.91±7.75△△4.44±1.18△△非諾貝特組(n=11)4.32±0.56**32.12±7.50**1.99±0.56**竹節(jié)參總皂苷低劑量組(n=11)8.50±1.97*40.53±10.79**4.37±0.75竹節(jié)參總皂苷中劑量組(n=11)5.88±2.55**38.71±7.67**3.22±1.35*竹節(jié)參總皂苷高劑量組(n=11)5.06±1.85**33.65±9.02**2.07±0.67**

        注:與空白組比較,△P<0.05,△△P<0.01;與模型組比較,*P<0.05,**P<0.01。

        4 討論

        本實驗采用腹腔注射Triton WR-1339誘發(fā)高脂血癥小鼠模型,該模型屬于內(nèi)源性升高血脂,原理為Triton WR-1339可抑制極低密度脂蛋白(VLDL)與其他脂蛋白交換而富集在血漿中,同時抑制脂蛋白脂肪酶(LPL)活性,造成血清TC、TG值升高[6]。實驗結(jié)果顯示,與空白組比較,模型組可顯著提高小鼠血清TC、TG、LDL-C水平(P<0.01),表明急性高脂血癥模型成功。

        本實驗采用陽性藥為非諾貝特(貝特類降脂藥),該類藥物是目前降TG最有效藥物之一,是一類人工合成的過氧化物酶體增生激活受體α(PPARα)配體,通過激活PPAR-α,誘導(dǎo)LPL表達(dá),增強(qiáng)LPL活性,促進(jìn)血漿中富含TG脂蛋白的TG水解,從而降低TG;同時也具有降低TC、LDL-C作用[7]。

        根據(jù)實驗結(jié)果得出結(jié)論,竹節(jié)參總皂苷可顯著降低急性高脂血癥小鼠血清中TC、TG、LDL-C水平,表明其具有一定的降血脂作用,且呈劑量依賴性,高劑量組降脂作用與陽性藥非諾貝特相當(dāng)。長期服用貝特類藥物會引起消化不良、肌毒性等不良反應(yīng)[8],關(guān)于竹節(jié)參總皂苷的不良反應(yīng)未見報道。因此,將竹節(jié)參總皂苷開發(fā)成安全有效的降脂藥物具有極大潛力和發(fā)展空間。

        [1] JAIN KS,KATHIRAVAN MK,SOMANI RS,et al. The biology and chemistry of hyperlipidemia[J]. Bioorg Med Chem,2007,15(14): 4674-4699.

        [2] 王海勇,王林. 降血脂藥物的研究進(jìn)展[J]. 國外醫(yī)學(xué)·藥學(xué)分冊,2004,31(3): 160-166.

        [3] 歐陽麗娜,向大位,吳雪,等. 竹節(jié)參化學(xué)成分及藥理活性研究進(jìn)展[J]. 中草藥,2010,41(6): 1023-1027.

        [4] 左銳,袁丁. 竹節(jié)參化學(xué)成分和藥理活性研究進(jìn)展[J]. 時珍國醫(yī)國藥,2005,16(9): 838-839.

        [5] 翟羽佳,陳邦添,李善兵,等. Triton WR-1339誘發(fā)小鼠高脂血癥模型的研究[J]. 中國藥理學(xué)通報,2011,27(8): 1178-1179.

        [6] LEVINE S,SALTZMAN A.A procedure for inducing sustained hyperlipemia in rats by administration of a surfactant[J].J Pharmacol Toxicol Methods,2007,55(2): 224-226.

        [7] 劉玲,趙水平.貝特類調(diào)脂藥物的研究及應(yīng)用進(jìn)展[J].中國新藥與臨床雜志,2000,19(5): 349-352.

        [8] 郭丹杰,徐成斌.貝特類調(diào)脂藥物在降脂領(lǐng)域的地位及認(rèn)識[J].臨床藥物治療雜志,2008,6(2): 1-3.

        (責(zé)任編輯:李嵐春)

        Hypolipidemic Action of Total Saponins of Panax Japonicus on Triton WR-1339 induced Hyperlipidemic Mice

        Jia Yinzhi,Yang Zhonglin*

        (State Key laboratory of Natural Products and Functions,China Pharmaceutical University,Nanjing 210009,China)

        Objective:To observe the hypolipidemic effect of total saponins of Panax japonicus (TSPJ). Methods:Animal models of hyperlipidemia induced by Triton WR-1339 (400mg/kg) were established. The serum levels were respectively measured,including total cholesterol (TC),triglyceride (TG) and low-density lipoprotein cholesterol (LDL-C). Results:Contrast to the model group,fenofibrate significantly lowered the serum TC,TG,LDL-C levels (P<0.01),and TSPJ (100mg/kg) significantly lowered the serum TC levels (P<0.05) and TG levels (P<0.01),and TSPJ (200mg/kg) significantly lowered the serum TC,TG levels (P<0.01) and LDL-C levels (P<0.05),and TSPJ (400mg/kg) significantly lowered the serum TC,TG,LDL-C levels (P<0.01). Conclusion:TSPJ show notable antihyperlipidemia effect in serum in mice,which are in dose-dependent manner.

        Total Saponins of Panax Japonicus; Triton WR-1339; Hyperlipidemia;Mice

        2014-02-06

        江蘇高校優(yōu)勢學(xué)科建設(shè)工程資助項目

        賈銀芝(1990-),女,中國藥科大學(xué)碩士研究生,研究方向為中藥新藥研究。E-mail:yinzhizhi.hi@163.com

        楊中林(1950-),女,中國藥科大學(xué)中藥學(xué)院教授,博士生導(dǎo)師,研究方向為中藥新藥研究。 E-mail:yzl1950@126.com

        R285.5;R589.2

        A

        1673-2197(2015)12-0009-03

        10.11954/ytctyy.201512004

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