馬　倩，項　楠，李向培，厲小梅，汪國生，馬　艷，張　宏，王　瑋，陳　磊

(安徽醫(yī)科大學附屬安徽省立醫(yī)院風濕免疫科，合肥 230001)

干燥綜合征(Sj?gren syndrome，SS)是一種以主要累及外分泌腺體為特征的自身免疫性疾病，多見于女性，發(fā)病機制尚未明。干燥綜合征患者除常表現(xiàn)為口干、眼干外，還包括關節(jié)炎、周圍神經(jīng)病變和肺纖維化等表現(xiàn)。唾液腺和淚腺組織的導管及血管周圍有淋巴細胞浸潤是該病的病理特征[1]。依據(jù)是否合并存在其他結締組織病(connective tissue diseases，CTD)，如系統(tǒng)性紅斑狼瘡(systemic lupus erythematosus，SLE)、類風濕關節(jié)炎(Rheumatoid arthritis，RA)等，將其分為原發(fā)性干燥綜合征(primary Sj?gren’s syndrome，pSS)和繼發(fā)性干燥綜合征(secondary Sj?gren’s syndrome，sSS)[2]。診斷SS多依賴于臨床表現(xiàn)、血清抗體、有創(chuàng)性唇腺活檢和腮腺造影等。SS患者血清中可存在多種自身免疫性抗體，如抗SSA抗體(Anti-SSA autoantibody)、抗SSB抗體(Anti-SSB autoantibody)、抗核抗體(antinuclear antibody，ANA)、類風濕因子(rheumatoid factor，RF)，對SS診斷有一定價值，但敏感性及特異性并不理想[3]。因此，SS診斷仍需尋找更為敏感、特異的檢測方法。

1997年有研究報道，在SS模型-NFS/sld小鼠的唇腺組織中提取了一種器官特異性自身抗原，即α-胞襯蛋白，發(fā)現(xiàn)其在SS中有重要意義，并指出其抗體——抗α-胞襯蛋白抗體有助于診斷SS[4]。后相繼有研究報道，α-胞襯蛋白可能參與SS發(fā)病，其抗體抗α-胞襯蛋白抗體可能是SS標志之一，具有較高的敏感性、特異性。但也有不少研究持相反觀點，提出抗α-胞襯蛋白抗體在SS中的敏感性和特異性并不高，認為其對診斷SS的價值并不理想。目前，國內(nèi)外研究結果不一，本研究的目的是進一步探討抗α-胞襯蛋白抗體對診斷SS的敏感性及特異性，并結合其他相關免疫學指標，探討其在SS的臨床診斷價值。

對象與方法

對象及分組

選取2011年8月至2013年10月在安徽省立醫(yī)院確診的SS患者，參照SS國際診斷標準(2002年修訂)[2]，血清學陰性者均為唇腺活檢病理陽性。所有納入SS患者均納入SS組，且分為pSS組和sSS組。選取CTD患者納入CTD組，其中SLE符合1997年美國風濕病協(xié)會修訂的SLE分類標準，RA符合1987年美國風濕病協(xié)會修訂的RA分類標準，分為SLE組和RA組。選取關節(jié)痛、骨關節(jié)炎、口眼干燥癥、糖尿病等患者納入非CTD對照組，非CTD對照組患者均無自身免疫性疾病史。

方法

采用酶聯(lián)免疫吸附法定性檢測IgG型抗α-胞襯蛋白抗體，依據(jù)試劑盒(上?？菩?的檢測方法進行實驗。樣本被酶催化成為有色產(chǎn)物，通過全自動酶標儀檢測待檢血清和對照品在一定波長下的吸光度，可判斷待檢血清中抗α-Fodrin 抗體是否陽性。用酶標儀測定吸光光度值(optical density，OD)，計算樣本與弱陽性對照品的光吸收值比率，光吸收值比率=樣本OD值/弱陽性對照品OD值，其中光吸收值比率<1，為陰性；比率≥1，為陽性；0.9≤比率≤1.1，為臨界區(qū)域。ANA采用間接免疫熒光法檢測，可提取性核抗原(extractable nuclear antigen，ENA)利用歐盟斑點法檢測，RF利用免疫比濁檢測法。

統(tǒng)計學處理

應用SPSS 13.0軟件進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析。利用四格表計算各組各指標的敏感性、特異性。利用四格表配對資料χ2檢驗統(tǒng)計各指標在各組中的分布差異，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

結　　果

一般資料

2011年8月至2013年10月確診SS患者304例，其中實驗室數(shù)據(jù)完整的253例納入SS組。253例患者中，pSS 204例(pSS組)，男7例，女197例(男：女為1∶28)，年齡13～82歲，平均(48.9±13.6)歲。剩余49例為sSS患者(sSS組)，男2例，女47例(男：女為1∶23)，年齡22～84歲，平均(49.6±14.9)歲，其中繼發(fā)于SLE 26例，繼發(fā)于RA 23例。

CTD組60例，男1例，女59例，年齡14～73歲，平均(43.4±15.0)歲，其中SLE 38例(SLE組)，RA 22例(RA組)。非CTD對照組105例，男5例，女100例，年齡14～83歲，平均(49.0±15.8)歲。

病例組和非CTD對照組間性別、年齡差異均無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。

抗α-胞襯蛋白抗體陽性率

pSS組抗α-胞襯蛋白抗體陽性率最高，為52.0%；非CTD對照組陽性率最低，為15.2%(表1)。

抗α-胞襯蛋白抗體敏感性和特異性

抗α-胞襯蛋白抗體在SS組、pSS組、sSS組的敏感性、特異性均高于非CTD對照組，差異均有統(tǒng)計學意義(均P<0.05)；SS組和pSS組的敏感性、特異性均高于RA組和SLE組，差異均有統(tǒng)計學意義(均P<0.05)；sSS組特異性低于SS組和pSS組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)(表2)。

表1　各組抗α-胞襯蛋白抗體陽性率

SS：干燥綜合征；pSS：原發(fā)性SS；sSS：繼發(fā)性SS；RA：類風濕關節(jié)炎；SLE：系統(tǒng)性紅斑狼瘡；CTD：結締組織病

SS患者抗α-胞襯蛋白與其他自身抗體敏感性、特異性比較

253例SS患者，ANA和抗SSA抗體敏感性高于抗α-胞襯蛋白抗體，但特異性低于抗α-胞襯蛋白抗體，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；抗SSB抗體特異性高于抗α-胞襯蛋白抗體，但敏感性較低，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)(表3)。

自身抗體陰性SS患者抗α-胞襯蛋白抗體陽性表達

抗SSA抗體陰性SS患者的抗α-胞襯蛋白抗體陽性率為62.0%(49/79)；抗SSB抗體陰性SS患者的抗α-胞襯蛋白抗體陽性率為55.1%(97/176)。ANA陰性SS患者的抗α-胞襯蛋白抗體陽性率為57.9%(11/19)；ANA、抗SSA抗體、抗SSB抗體均陰性SS患者的抗α-胞襯蛋白抗體陽性率為62.5%(10/16)。

表2　各組抗α-胞襯蛋白抗體敏感性、特異性比較

SS：干燥綜合征；pSS：原發(fā)性SS；sSS：繼發(fā)性SS；RA：類風濕關節(jié)炎；SLE：系統(tǒng)性紅斑狼瘡；CTD：結締組織病；a與非CTD對照組比較，P<0.05；b與SS組、pSS組比較，P<0.05；c與非CTD對照組比較，P<0.05；d與SS組、pSS組比較，P<0.05

表3　SS患者自身抗體敏感性、特異性比較

SS：干燥綜合征；ANA：抗核抗體；*與抗α-胞襯蛋白抗體敏感性比較，P<0.05；#與抗α-胞襯蛋白抗體特異性比較，P<0.05

SS患者抗SSA、抗SSB與抗α-胞襯蛋白抗體聯(lián)合檢測結果

抗SSA抗體、抗SSB抗體、抗α-胞襯蛋白抗體均陽性者為42.5%(31/73)。

討　　論

SS的發(fā)病機制尚不明了，診斷SS較常用血清抗體如ANA、抗SSA、抗SSB、RF的特異性和敏感性均有限，而有創(chuàng)性檢查患者依從性較差。Haneji等[4]首先發(fā)現(xiàn)，SS模型小鼠唇腺中一種相對分子質(zhì)量為120 000的唇腺特異性自身抗原——α-胞襯蛋白，其可誘導正常小鼠產(chǎn)生SS相關癥狀，表明α-胞襯蛋白可能與SS發(fā)病相關[5]。有學者利用α-胞襯蛋白早期免疫NOD小鼠后產(chǎn)生抗α-胞襯蛋白抗體、頜下腺中存在浸潤的淋巴細胞，并證實靶向α-胞襯蛋白的治療可抑制SS發(fā)生[6]。Markus等[7]的研究指出，羥氯喹可改善SS患者口眼干燥癥狀，且對抗α-胞襯蛋白抗體陽性患者的治療效果更為顯著，提示抗α-胞襯蛋白抗體可能與SS疾病的活動度相關，參與炎性反應。Bendaoud等[8]發(fā)現(xiàn)，抗α-胞襯蛋白IgG型抗體可能與病情活動性相關，可作為疾病活動的標志性抗體。上述研究均提示，抗α-胞襯蛋白抗體對診斷SS的篩選有一定價值。

目前，國內(nèi)外多項研究對抗α-胞襯蛋白抗體看法不一。有研究發(fā)現(xiàn)，pSS、sSS患者抗α-胞襯蛋白抗體陽性率分別為95.3%、50%，而SLE、RA及健康人中未發(fā)現(xiàn)抗α-胞襯蛋白抗體，認為其對診斷SS敏感性和特異性較高，從而推測抗α-胞襯蛋白抗體可能是SS標志性抗體。也有學者檢測到，IgG型抗體的敏感性分別為為48%、10%，低于抗SSA、抗SSB的敏感性[9]。Nuran等[10]發(fā)現(xiàn)，pSS、sSS患者抗α-胞襯蛋白抗體、抗SSA和抗SSB抗體的敏感性與Michiel等[9]研究一致，認為抗α-胞襯蛋白抗體在診斷SS中的價值不大。我國趙巖等[11]研究報道，pSS、sSS患者的抗α-胞襯蛋白抗體的敏感性分別為59.7%、37.5%，特異性為79.4%，且抗α-胞襯蛋白抗體在SS和其他CTD中的敏感性差異無統(tǒng)計學意義。本研究發(fā)現(xiàn)，SS患者抗α-胞襯蛋白抗體的敏感性和特異性分別為51.4%、81.8%，該研究結果部分與趙巖等[11]的研究結果一致；但SS組、pSS組的敏感性、特異性均高于RA組、SLE組。本研究發(fā)現(xiàn)，與其他自身抗體比較，抗α-胞襯蛋白抗體敏感性低于ANA、抗SSA抗體，特異性低于抗SSB抗體。本研究結果提示，抗α-胞襯蛋白抗體在pSS與sSS中的陽性率未見明顯差異，但在SS中的陽性率高于RA、SLE及非CTD對照組，表明抗α-胞襯蛋白抗體對診斷SS有一定的臨床價值。另外，本研究還發(fā)現(xiàn)，非CTD對照組抗α-胞襯蛋白抗體也有15.2%的陽性率，提示單一出現(xiàn)抗α-胞襯蛋白抗體時，診斷SS需謹慎，應注意與其他疾病鑒別。

何菁等[12]采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測SS患者血清抗α-胞襯蛋白抗體，驗證了其為SS診斷較特異的抗體，并對其診斷其他抗體陰性的SS有參考意義。在另1項研究中，作者提出抗SSA或抗SSB抗體與抗α-胞襯蛋白聯(lián)合抗體檢測可顯著提高診斷pSS的敏感性，且抗SSB抗體、抗α-胞襯蛋白抗體特異性較高[13]。本研究發(fā)現(xiàn)，在ANA、抗SSA、抗SSB抗體均陰性的SS患者中，抗α-胞襯蛋白抗體陽性率為62.5%，對于上述血清抗體陰性的SS診斷有所幫助。也有研究報道，抗α-胞襯蛋白抗體可能在尚未確診的SS即可陽性，推斷其可能作為SS早期標志性抗體[14]。

本研究重點觀察了抗SSA、抗SSB陰性的SS患者的抗α-胞襯蛋白的陽性率，提示抗α-胞襯蛋白檢測可以作為抗SSA、抗SSB陰性的SS患者的補充血清學指標。目前，各研究報道結果不一致的原因可能與不同的檢測方法、SS診斷標準、病例選擇等相關。本研究納入大量病例，結果顯示在SS中的抗α-胞襯蛋白抗體的敏感性及特異性均高于RA、SLE及非CTD對照組，可作為SS診斷性抗體之一，但其敏感性及特異性仍有限，筆者認為抗α-胞襯蛋白抗體仍不可完全取代其他抗體在SS診斷中的意義，可作為SS診斷的聯(lián)合檢測指標。而在其他抗體陰性、臨床高度疑診為SS的患者，抗α-胞襯蛋白抗體陽性有一定的輔助診斷價值。

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