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血清自身抗體和抗核抗體檢測(cè)在自身免疫性肝病診斷中的價(jià)值

歐陽(yáng)艷君

(遼寧省盤(pán)錦市遼河油田總醫(yī)院 消化內(nèi)科, 遼寧 盤(pán)錦, 124010)

關(guān)鍵詞:自身免疫性肝病; 自身免疫性肝炎; 原發(fā)性膽汁性肝硬化; 原發(fā)性硬化性膽管炎

自身免疫性肝病(ALD)是因過(guò)度自身免疫反應(yīng)造成的一類(lèi)肝臟疾病，發(fā)病機(jī)制尚不明確，臨床主要包括自身免疫性肝炎(AIH)、原發(fā)性膽汁性肝硬化(PBC)及原發(fā)性硬化性膽管炎(PSC)，前者主要表現(xiàn)為肝細(xì)胞受累壞死，后二者主要為肝外膽管細(xì)胞受累[1], 3種疾病均可進(jìn)展為肝硬化，甚至肝癌[2]。因此合適的自身抗體檢查，及時(shí)并準(zhǔn)確診斷該類(lèi)疾病，對(duì)患者的治療及預(yù)后有重要意義。本研究檢測(cè)自身免疫性肝病患者的部分自身相關(guān)抗體，包括抗平滑肌抗體(ASMA)、抗核抗體(ANA)、抗線(xiàn)粒體抗體(AMA)，探討3者在ALD診斷中的價(jià)值，現(xiàn)報(bào)告如下。

1資料與方法

選取2013年4月-2015年4月在遼寧省盤(pán)錦市遼河油田總醫(yī)院住院的經(jīng)病理檢查確診的ALD患者132例設(shè)為ALD組，均符合2011年中華醫(yī)學(xué)會(huì)風(fēng)濕病學(xué)分會(huì)制定的診斷標(biāo)準(zhǔn)[3]。排除標(biāo)準(zhǔn)[4]: ① 合并丙型肝炎病毒(HCV)、戊型肝炎病毒(HEV)、艾滋病病毒(HIV)等病毒感染者; ② 合并自身免疫性疾病如類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)等患者; ③ 近期內(nèi)接受過(guò)透析治療、輸血、服用抗凝藥等患者。其中男58例，女74例，年齡18～66歲，平均(36.6±10.4)歲；AIH患者49例，PBC患者55例，PSC患者28例。同時(shí)選取50例未累及肝臟的其他自身免疫病的患者作為非ALD組，50例同期健康體檢者為對(duì)照組，男女各半，年齡16～70歲，平均(38.4±12.1)歲。3組年齡、性別等一般資料可比(P>0.05)。

3組均于入院后抽取靜脈血分離血清，以1∶100稀釋?zhuān)捎瞄g接免疫熒光法檢測(cè)血清ANA、ASMA、AMA。嚴(yán)格根據(jù)肝臟馬賽克間接免疫熒光法檢測(cè)試劑盒(德國(guó)歐盟公司)操作說(shuō)明書(shū)，以HEP-2細(xì)胞及大鼠肝、腎和胃組織的冰凍切片作抗原。室溫下，抗原與血清共孵育30 min，加入異硫氰酸熒光素(FITC)標(biāo)記的第二抗體，室溫孵育30 min，清洗，甘油封片，熒光顯微鏡觀察結(jié)果。

使用EURO LineScan軟件(德國(guó)歐蒙公司)自動(dòng)判讀標(biāo)本的陰陽(yáng)性和著色強(qiáng)度，結(jié)果由2位不知情資深醫(yī)師共同分析。

2結(jié)果

2.13組抗ANA、ASMA、AMA陽(yáng)性檢出率比較

ALD組ANA陽(yáng)性數(shù)92例，陽(yáng)性率69.70%(92/132); ASMA陽(yáng)性數(shù)36例，陽(yáng)性率為19.70%(26/132)；AMA陽(yáng)性數(shù)59例，陽(yáng)性率為44.70%(59/132)。非ALD組ANA陽(yáng)性16例，陽(yáng)性率為32.00%(16/50)；對(duì)照組ANA陽(yáng)性2例，陽(yáng)性率為4.00%(2/50)；非ALD組及對(duì)照組ASMA、AMA的陽(yáng)性檢出率均為0%。ALD組ANA陽(yáng)性率顯著高于非ALD組與對(duì)照組(P<0.01)。

2.2ALD組3種患者ANA、ASMA、AMA陽(yáng)性

檢出率比較

AIH患者ANA陽(yáng)性表達(dá)率為81.63%(40/49)，以胞漿顆粒型為主，少部分具有核點(diǎn)型、核顆粒型等；PBC患者ANA陽(yáng)性率83.64%(46/55)，可見(jiàn)核膜型、核仁型、均質(zhì)型、胞漿纖維型及混合型等；PSC患者ANA陽(yáng)性率較低，為21.43%(6/28)。核型多為核顆粒、核均質(zhì)型。AIH、PBC患者ANA陽(yáng)性率差異顯著(P<0.01)，且二者均顯著高于PSC患者(P<0.01)。PSC患者ANA陽(yáng)性率與非ALD組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

AIH、PBC、PSC患者ASMA陽(yáng)性檢出率分別為53.06%(26/49)、18.18%(10/55)、0%; AMA陽(yáng)性檢出率分別為16.33%(8/49)、92.73%(51/55)及0%。AIH患者ASMA陽(yáng)性檢出率顯著高于PBC患者(P<0.01)、AMA陽(yáng)性檢出率顯著低于后者(P<0.01)。

2.3ANA與ASMA、AMA聯(lián)合檢測(cè)診斷的

靈敏性與特異性

ANA與ASMA聯(lián)合檢測(cè)對(duì)AIH的檢出率最高；ANA與AMA聯(lián)合檢測(cè)對(duì)PBC的檢出率最高。以非ALD組為參照, ANA與ASMA單獨(dú)和聯(lián)合應(yīng)用對(duì)AIH診斷的靈敏度分別為80.40%、66.26%、89.42%; 特異性分別為90.22%、78.30%、92.22%。ANA與AMA單獨(dú)和聯(lián)合應(yīng)用對(duì)PBC診斷的靈敏度分別為83.64%、58.18%、92.73%，特異性分別為89.53%、95.06%、96.25%。

3討論

ALD是由自身免疫反應(yīng)引起的病理機(jī)制不明性肝臟綜合征，主要包括AIH、PBC、PSC及這3種肝病并發(fā)的重疊綜合征。ALD自身抗體檢測(cè)及肝組織特征檢查對(duì)其鑒別診斷、治療以及發(fā)病機(jī)制的研究中具有重要作用[5-6]。AIH在中、青年女性人群中發(fā)病率較高[7]，病情易進(jìn)展為肝硬化，死亡率極高，因此早期診斷和阻斷病情進(jìn)展十分重要。國(guó)際自身免疫性肝炎小組[8]根據(jù)AIH患者血清中自身抗體種類(lèi)，將其分為3種亞型，其中ANA、ASMA陽(yáng)性為主要特征I型，抗肝腎微?？贵wI型抗體、抗肝細(xì)胞溶質(zhì)抗原Ⅰ型抗體陽(yáng)性為主要特征的Ⅱ型，以及血清中抗可溶性肝抗原/肝胰抗原抗體陽(yáng)性的Ⅲ型。

ANA可見(jiàn)于多種結(jié)締組織疾病和其他自身免疫性疾病，對(duì)AIH的診斷不具有特異性。ASMA靶抗原分為肌動(dòng)蛋白和非肌動(dòng)蛋白，對(duì)I型AIH的診斷有重要意義。研究[9]表明，血清抗體檢查同時(shí)出現(xiàn)高滴度ASMA與ANA，AIH診斷率達(dá)100%。本研究中，AIH患者ASMA、ANA的檢出率分別為53.06%、81.63%明顯高于非ALD組患者，且二者聯(lián)合檢測(cè)AIH診斷率提高至89.42%, 特異性為92.22%，表明ANA聯(lián)合ASMA檢測(cè)可準(zhǔn)確診斷AIH，與李曄[10]的研究結(jié)果一致。

PBC是一種慢性肝內(nèi)膽汁淤積性疾病，中老年女性人群中發(fā)病率較高，確診時(shí)多數(shù)患者已到晚期。有研究[11]報(bào)道PBC多種自身抗體檢測(cè)中，ANA陽(yáng)性率最高，核型主要以胞漿顆粒為主，其次為核點(diǎn)型。本研究PBC患者ANA陽(yáng)性率83.64%, 顯著高于非ALD組，可見(jiàn)核膜型、核仁型、均質(zhì)型、胞漿纖維型及混合型等，與上述研究一致。美國(guó)肝病學(xué)會(huì)PBC診斷指導(dǎo)認(rèn)為AMA陽(yáng)性是PBC重要的免疫學(xué)診斷指標(biāo)，研究[12]表明95.00%以上的PBC患者AMA檢測(cè)為陽(yáng)性。本研究PBC患者AMA陽(yáng)性率92.73%，略低于該值，可能是因?yàn)闃?biāo)本量過(guò)小造成的。而本研究ANA與AMA聯(lián)合檢測(cè)對(duì)PBC診斷的靈敏度提高至92.73%，特異性為96.25%，表明ANA聯(lián)合AMA檢測(cè)可準(zhǔn)確診斷AIH，與李曄[13]的結(jié)果一致。

PSC主要以膽汁淤積綜合征為主，ANA陽(yáng)性率較低，其他抗體檢測(cè)的陽(yáng)性率也不高，并且特異性不強(qiáng)[14]。本研究中，PSC患者ANA陽(yáng)性率為21.43%，與非ALD組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；ASMA、AMA的陽(yáng)性率為0%。結(jié)果提示自身抗體檢測(cè)無(wú)法作為PSC診斷的可靠依據(jù)。這一結(jié)果的原因，一方面可能由于納入的PSC病例數(shù)太少，另一方面可能是本研究所選擇的自身抗體指標(biāo)有限，因此對(duì)PSC還有待進(jìn)一步研究。

參考文獻(xiàn)

[1]胡朝軍, 楊國(guó)香. 原發(fā)性膽汁性肝硬化患者血清自身免疫性肝病相關(guān)自身抗體譜的檢測(cè)及臨床意義[J]. 中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志, 2010, 33(2): 115.

[2]陳陽(yáng), 陳京, 張尉華. 自身免疫性肝病的臨床與病理特點(diǎn)[J]. 中國(guó)老年學(xué)雜志, 2013, 33(24): 6307.

[3]中華醫(yī)學(xué)會(huì)風(fēng)濕病學(xué)分會(huì). 自身免疫性肝病診斷和治療指南[J]. 中華風(fēng)濕病學(xué)雜志, 2011, 15(8): 556.

[4]張宏宇, 朱珍, 徐昕, 等. 自身免疫性肝病患者血清中自身抗體的動(dòng)態(tài)變化及相關(guān)性分析[J]. 重慶醫(yī)學(xué), 2014, (16): 2032.

[5]Czaja A J. Autoantibodies as Prognostic Markers in Autoimmune Liver Disease[J]. Dig Dis Sci, 2010, 55(8):2144.

[6]賈繼東. 自身抗體檢查在自身免疫性肝病診斷中的應(yīng)用[J]. 中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志, 2014, 33(1): 120.

[7]Manns M P, Czaja A J, Gorham J D, et al. Diagnosis and management of autoimmune hepatitis[J]. Hepatology, 2010, 51(6): 2193.

[8]楊力, 程浩. 重疊綜合征:國(guó)際自身免疫性肝炎小組(IAIHG)就爭(zhēng)議問(wèn)題的立場(chǎng)聲明[J]. 臨床肝膽病雜志, 2011, 27(6): 605.

[9]Joshi S, Cauch-Dudek K, Wanless I R, et al. Primary biliary cirrhosis with additional features of autoimmune hepatitis: response to therapy with ursodeoxycholic acid[J]. Hepatology, 2002, 35(2): 409.

[10]李曄, 劉兵兵, 劉旭, 等. ANA和自身免疫性肝病相關(guān)抗體檢測(cè)在自身免疫性肝病診斷中的價(jià)值[J]. 中外醫(yī)學(xué)研究, 2013, 11(34): 64.

[11]張利方, 閻有功. 自身免疫性肝病相關(guān)自身抗體研究進(jìn)展[J]. 微循環(huán)學(xué)雜志, 2009, 19(2): 55.

[12]Twaddell W S, Lefkowitch J, Berk P D. Evolution from primary biliary cirrhosis to primary biliary cirrhosis/autoimmune hepatitis overlap syndrome[J]. Semin Liver Dis, 2008, 28(1): 128.

[13]張麗, 白石山. 原發(fā)性膽汁性肝硬化患者自身抗體譜檢測(cè)分析[J]. 內(nèi)蒙古醫(yī)學(xué)雜志, 2013, 45(11): 1314.

[14]譚立明, 彭衛(wèi)華, 李華, 等. 原發(fā)性硬化性膽管炎自身抗體檢測(cè)的臨床意義[J]. 免疫學(xué)雜志, 2011, 27(12): 1099.

[15]Evangelos C, Vibhakorn S, David P, et al. Pathogenesis of primary sclerosing cholangitis[J]. Best Pract Res Clin Gastroenterol, 2011, 25(6): 727.

基金項(xiàng)目:中國(guó)高校醫(yī)學(xué)期刊臨床專(zhuān)項(xiàng)資金(11520899)

收稿日期:2015-05-10

中圖分類(lèi)號(hào):R 575

文獻(xiàn)標(biāo)志碼:A

文章編號(hào):1672-2353(2015)23-191-02DOI: 10.7619/jcmp.201523075