劉 明 (吉林省人民醫(yī)院口腔科，吉林 長春 130000)

根管治療的目的是將根管內(nèi)的微生物，尤其是致病菌徹底清除，根管充填材料的抗菌性評價(jià)是衡量根管充填效果的重要指標(biāo)，具有抗菌、抑菌性的根管充填材料能顯著提高根管治療的效果。因此我們合成了納米氫氧化鈣根管充填材料，前期研究已證實(shí)其具有良好的根尖封閉性能、組織相容性和生物活性等，本實(shí)驗(yàn)通過瓊脂擴(kuò)散法檢測納米氫氧化鈣根管充填材料對根管內(nèi)、尤其是感染根管內(nèi)變形鏈球菌的抗菌性，為其作為根管充填材料提供堅(jiān)實(shí)的理論依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)菌種:變形鏈球菌。

1.2 實(shí)驗(yàn)材料的制備

1.2.1 實(shí)驗(yàn)?zāi)＞叩闹苽?a.不銹鋼圈50個(gè)b.五柱定位器4個(gè) 經(jīng)高溫、高壓消毒。

1.2.2 制備4個(gè)時(shí)段的納米氫氧化鈣根管充填材料的圓柱體，即:28天、14天、7天前及即刻。圓柱體的要求為:高為4 mm、外徑為5 mm，各10個(gè)，放于恒溫箱中保持37℃?zhèn)溆谩?/p>

1.2.3 濾紙卷:10個(gè)，寬為4mm、長為38 mm，卷成外徑為5 mm，經(jīng)高溫、高壓消毒浸泡在蒸餾水中，放于恒溫箱中保持37℃?zhèn)溆谩?/p>

1.3 分組:試驗(yàn)組:納米氫氧化鈣根管充填材料;陰性對照組:浸有蒸餾水的、無菌濾紙。

1.4 實(shí)驗(yàn)步驟:①變形鏈球菌復(fù)蘇后，接種于沙氏培養(yǎng)皿，用高溫、高壓消毒后的五柱定位器在培養(yǎng)基上定位、并標(biāo)記;②將4個(gè)時(shí)段的納米氫氧化鈣根管充填材料柱體分別放入外周四孔、并做好標(biāo)記;將制備好的濾紙卷放入中心孔;10組;③將沙氏培養(yǎng)皿置于室溫中2 h后，再放入恒溫箱中37℃培養(yǎng)72 h;④觀察細(xì)菌的生長情況:將平板置于無反光、暗色的物體表面，用游標(biāo)卡尺精密測量抑菌區(qū)域大小(抑菌區(qū)域是指細(xì)菌生長的內(nèi)緣到材料的外緣之間的最短距離);每個(gè)標(biāo)本測量4個(gè)十字固定點(diǎn)的數(shù)值，精確度為0.01 mm，取10組的平均值;⑤結(jié)果判定:參照藥敏實(shí)驗(yàn)中抗菌、抑菌區(qū)域的測量標(biāo)準(zhǔn)，若抗菌、抑菌區(qū)域≧0.5 mm，即有抗菌、抑菌作用，若抑菌區(qū)域﹤0.5 mm，則無抗菌、抑菌作用，記錄為0［1］。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析:用SPSS 10.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，因數(shù)據(jù)變量為非正態(tài)分布，采用多個(gè)樣本比較的秩和檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

納米氫氧化鈣根管充填材料對變形鏈球菌的抗菌區(qū)域(mm) 見表1。

表1 納米氫氧化鈣根管充填材料對變形鏈球菌的抗菌區(qū)域(mm)

3 討論

臨床上常用的根管充填材料的主要成分是氫氧化鈣和丁香油氧化鋅，丁香油氧化鋅糊劑在根管充填后會有短暫的炎性反應(yīng)，引起不適、疼痛、腫脹、使患者不易接受［2］;氫氧化鈣糊劑因具有強(qiáng)堿性，能有效地清除感染根管內(nèi)的病原菌;又因具備良好的組織生物相容性和可吸收性，能誘導(dǎo)牙體組織進(jìn)行礦化、修復(fù)，但穩(wěn)定性差［3］，因此我們合成了納米氫氧化鈣材料根管充填材料，使其不僅具有氫氧化鈣的抗菌、抑菌作用，又兼具了納米材料的表面能作用，提高材料與病原菌的接觸面積、提高材料的韌性和穩(wěn)定性。根管治療的目的是清除、抑制感染根管內(nèi)的病源菌，嚴(yán)密封閉根管，改變殘留病原菌的生存條件和增殖能力。因此，在根管充填時(shí)使用具有抗菌、抑菌性強(qiáng)的根管充填材料，能更好地消除根管內(nèi)殘留的病原菌，根管充填材料的抗菌性、抑菌性是影響根管充填效果的至關(guān)重要指標(biāo)。

本實(shí)驗(yàn)采用瓊脂擴(kuò)散法檢測納米氫氧化鈣根管充填材料對變形鏈球菌的抗菌、抑菌性［2］。瓊脂擴(kuò)散法是檢測藥物敏感實(shí)驗(yàn)的常規(guī)方法，已被廣泛應(yīng)用，最大的優(yōu)點(diǎn)是可以直接觀察到與所檢測的材料相接觸的微生物生長情況，能較客觀地表達(dá)納米氫氧化鈣根管充填材料的抗菌、抑菌能力。

感染根管中常檢測出的病原菌有變形鏈球菌、糞腸球菌、金黃色葡萄球菌、念珠菌等，其中變形鏈球菌檢出率較高，因此我們選擇變形鏈球菌菌種作為實(shí)驗(yàn)對象檢測納米氫氧化鈣根充材料的抗菌能力。在本實(shí)驗(yàn)中研究的4個(gè)時(shí)間段上，即刻制備的納米氫氧化鈣根管充填材料的抗菌性、抑菌性最強(qiáng)，隨著時(shí)間的遷移其抗菌性、抑菌性也逐漸減弱，但其仍具有抗菌、抑菌作用，這一特點(diǎn)完全符合根管充填材料的要求。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示納米氫氧化鈣根管充填材料的抗菌性、抑菌性既依賴于氫氧化鈣的pH值，又依賴于材料中的納米粒子所發(fā)揮的表面能作用。當(dāng)材料中pH值保持在一個(gè)較高的水平時(shí)，即有殺菌、抑菌的活性，即刻制備的納米氫氧化鈣根管充填材料的pH值高達(dá)12.2，即使2周后該材料的pH值下降為9.5，但仍具有抗菌、抑菌能力［4］。納米微粒具有較高的表面能，對微生物具有很強(qiáng)的吸附能力，而且能吸附與細(xì)菌代謝相關(guān)的酶，可以直接干擾細(xì)菌的代謝、控制細(xì)菌的生長，卻不破壞根管內(nèi)的微生態(tài)環(huán)境，納米微粒在抗菌性、抑菌性方面有獨(dú)特的作用。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示納米氫氧化鈣根管充填材料在即刻制備時(shí)段對變形鏈球菌具有最強(qiáng)的抗菌性、抑菌性，隨著時(shí)間的延長還具有緩慢持續(xù)的抗菌、抑菌作用，兼具了氫氧化鈣和納米材料的抗菌、抑菌性，二者協(xié)同作用，提高了抗菌、抑菌效果，納米氫氧化鈣根管充填材料適于作為根管充填材料。

［1］ 李怡源，陳 進(jìn)，胡 琛.兩種根管糊劑用于根管消毒的療效比較［J］.醫(yī)學(xué)理論與實(shí)踐，2014，27(15):2037.

［2］ 項(xiàng) 健.三種根管封閉劑抗菌性能的體外對比實(shí)驗(yàn)［J］.南通大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版)，2013，(5):409.

［3］ 郭佳杰，仇麗鴻.氫氧化鈣在根管消毒中的作用機(jī)制［J］.中國實(shí)用口腔科雜志，2013，6(9):560.

［4］ 丁 虹，孫明磊.氫氧化鈣碘仿糊劑在根管消毒中的應(yīng)用［J］.中國實(shí)用醫(yī)藥，2011，8(11):43.