孫菊華徐濤

(1新疆阿圖什市疾病預(yù)防控制中心 新疆阿圖什 845350;2新疆喀什市疾病預(yù)防控制中心 新疆喀什 844000)

微生物檢驗(yàn)樣品采集應(yīng)注意的問(wèn)題

孫菊華1徐濤2

(1新疆阿圖什市疾病預(yù)防控制中心 新疆阿圖什 845350;2新疆喀什市疾病預(yù)防控制中心 新疆喀什 844000)

樣品的采集是微生物檢驗(yàn)的重要組成部分，用于檢驗(yàn)的樣品數(shù)量和狀況具有重要意義，這對(duì)取樣人員和制樣人員提出了很高的專業(yè)要求，既要保證樣品的代表性和一致性，又要保證整個(gè)微生物檢驗(yàn)過(guò)程在無(wú)菌操作的條件下進(jìn)行，微生物檢驗(yàn)樣品的采集大致分為取樣，包裝，密封，標(biāo)志樣品的運(yùn)輸，接收，保存幾個(gè)環(huán)節(jié)。

一、取樣

1.取樣的定義

取樣是指在一定質(zhì)量的或數(shù)量的產(chǎn)品中，取一個(gè)或多個(gè)代表性樣品，用于感官，微生物和理化檢驗(yàn)的全過(guò)程，首先在取樣之前應(yīng)確認(rèn)貨證是否相符，其次取樣工具要達(dá)到無(wú)菌的要求，對(duì)取樣工具和一些試劑材料應(yīng)提前準(zhǔn)備，滅菌如果使用不合適的采集工具，可能會(huì)破壞樣品的完整性，甚至使樣品采集毫無(wú)意義，應(yīng)根據(jù)不同的樣品特征和取樣環(huán)境，對(duì)取樣物品和試劑進(jìn)行事先準(zhǔn)備和滅菌等工作，另外要保證樣品能夠代表整批產(chǎn)品，其檢測(cè)結(jié)果應(yīng)具有統(tǒng)計(jì)學(xué)有效性，樣品到達(dá)實(shí)驗(yàn)時(shí)的狀況［1］。應(yīng)能反映出取樣時(shí)產(chǎn)品的真實(shí)情況。取樣的應(yīng)根據(jù)不同的產(chǎn)品類型，產(chǎn)品狀態(tài)等選擇不同的取樣原包裝，直到檢驗(yàn)前不要開(kāi)封，以防污染，對(duì)于桶裝或大容器包裝的液體食品，取樣前應(yīng)搖動(dòng)或用滅菌棒攪拌液體，盡量使其達(dá)到均質(zhì)，取樣時(shí)應(yīng)先將取樣用具浸入液體內(nèi)略加漂洗，然后再取所需量不應(yīng)超過(guò)其容量3/4，以便于檢驗(yàn)前將樣品搖勻，取完樣品后，應(yīng)用消毒溫度計(jì)插入液體內(nèi)測(cè)量食品溫度，并做記錄，盡可能不用水銀溫度計(jì)以防溫度計(jì)破碎后水銀污染食品，如如為非冷藏易腐食品，應(yīng)迅速將所取樣品冷卻至0-4℃，對(duì)于大塊的桶裝或大容器包裝冷凍食品，應(yīng)從幾個(gè)不同部位用滅菌工具取樣，使樣品具有充分的代表性，在將樣品實(shí)驗(yàn)室前，要始終保持處于冷凍狀態(tài)，樣品一旦融化，不同使其在凍，冷卻即可［2］。

2.生產(chǎn)過(guò)程中取樣;劃分檢驗(yàn)批次應(yīng)注意同批次品質(zhì)量的均一性;如用固定在儲(chǔ)液桶或流水作業(yè)線上取樣龍頭取樣時(shí)，應(yīng)事先將龍頭消毒，當(dāng)用自動(dòng)取樣器取不需要冷凍的粉狀或固體食品時(shí)，必須履行相應(yīng)的管理辦法，保證產(chǎn)品的代表性不被人破壞。

3.液體產(chǎn)品;通常情況，液態(tài)產(chǎn)品容易獲得代表性樣品，液態(tài)產(chǎn)品一般盛放在大罐中，取樣時(shí)刻連續(xù)或間歇攪拌，對(duì)于較小的容器，可在取樣前將液體上下顛倒，使其完全混勻，較大的樣品。

4.固體樣品，固體樣品常用的取樣工具有滅菌的解剖刀，軟木鉆和鉗子等，面粉或乃風(fēng)等易于混勻的食品，其成品質(zhì)量均勻穩(wěn)定可以抽取小樣品檢測(cè)，但散裝樣品就必須從多個(gè)點(diǎn)去取樣，且每個(gè)樣品都要單獨(dú)處理。

5.表面取樣;通過(guò)惰性載體可以將表面樣品上的微生物轉(zhuǎn)移到合適培養(yǎng)。其中進(jìn)行微生物檢驗(yàn)，這種惰性載體既不能引起微生物死亡，也不應(yīng)增值，這樣的載體包括清水，拭子，膠帶等，取樣后應(yīng)盡早將微生物長(zhǎng)期保存在載體上，既不死亡又不增值十分困難，所以應(yīng)盡早將微生物轉(zhuǎn)接適當(dāng)培養(yǎng)基中，轉(zhuǎn)移前耽誤時(shí)間越長(zhǎng)，品質(zhì)評(píng)價(jià)的可靠性就越差，表面取樣技術(shù)只能直接轉(zhuǎn)移菌體，不能再做系列稀釋。

二、包裝密封

為了保證樣品的完整性，裝有樣品包裝物應(yīng)進(jìn)行封口，以證實(shí)其可靠性，即以取樣地點(diǎn)至實(shí)驗(yàn)室，這段時(shí)間不發(fā)生變化，可采用自粘膠，然后蓋上專用的印章。

三、樣品的標(biāo)志

取樣過(guò)程中應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行及時(shí)，準(zhǔn)確的標(biāo)記，取樣結(jié)束應(yīng)由取樣人寫出完整的取樣報(bào)告，樣品應(yīng)盡可能在原有狀態(tài)下迅速運(yùn)送或發(fā)送實(shí)驗(yàn)，保存的樣品應(yīng)進(jìn)行必要清晰標(biāo)記，內(nèi)容包括，樣品名稱，樣品描述，樣品批號(hào)，取樣時(shí)間，取樣溫度，確保字跡不會(huì)擦掉或脫色。

四、樣品運(yùn)輸

取樣結(jié)束后應(yīng)盡快將樣品送往實(shí)驗(yàn)檢驗(yàn)，如不能及時(shí)運(yùn)送冷凍樣品應(yīng)存在-15℃以下的冷藏，冷藏和易腐食品存放在-15℃冰箱。冷藏和易腐食品存放-4℃冰箱或微生物檢驗(yàn)樣品應(yīng)在取樣后6小時(shí)內(nèi)送達(dá)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行檢驗(yàn)

五、樣品的接收

在接受樣品時(shí)，實(shí)驗(yàn)室應(yīng)與送樣人共同相互確認(rèn)樣品上內(nèi)容一般包括;品名。冷藏零售，批發(fā);無(wú)菌包裝等不同;抽樣數(shù)量不同(個(gè)數(shù)和質(zhì)量)抽樣日期.抽樣地點(diǎn)隨貨樣附帶的許可申請(qǐng)單編號(hào);生產(chǎn)或生產(chǎn)廠家名稱(進(jìn)口商品);抽樣者單位，姓名有無(wú)封印，其他搬運(yùn)儲(chǔ)存，檢驗(yàn)時(shí)注意事項(xiàng)。

六、樣品的保存

實(shí)驗(yàn)室接到樣品后應(yīng)在36小時(shí)內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)9貝類樣品頭通常要在6小時(shí)檢測(cè)，對(duì)不能(立即進(jìn)行檢測(cè)樣品，要采取適當(dāng)?shù)姆椒ū４?，使樣品在檢測(cè)結(jié)果能夠代表整個(gè)產(chǎn)品，實(shí)驗(yàn)室應(yīng)有足夠和適當(dāng)?shù)臉悠繁４嬖O(shè)施(如冰箱和冰柜等)保存的樣品應(yīng)進(jìn)行，必要和清晰的標(biāo)記，內(nèi)容包括，樣品名稱，樣品描述，樣品批號(hào)，企業(yè)名稱地址，取樣人，取樣時(shí)間取樣地點(diǎn)，取樣溫度，(必要時(shí))測(cè)試目的等，樣品在保存過(guò)程中應(yīng)保存密封性1、易腐樣品;要用保溫箱或采取必要的措施(使樣品處于低溫狀態(tài)(0℃-4℃)應(yīng)在取樣后盡快送實(shí)驗(yàn)室，并保存樣品送至實(shí)驗(yàn)時(shí)不變質(zhì)，容易腐的飛冷凍食品檢測(cè)前不應(yīng)冷凍保存(除非不能及時(shí)檢測(cè))一般不應(yīng)超過(guò)36h，因?yàn)楸４鏁r(shí)間過(guò)長(zhǎng)會(huì)造成樣品中嗜冷細(xì)菌的生長(zhǎng)和嗜溫菌的死亡2、冷凍樣品;要用保溫箱或采取必要的措施是樣品處于冷凍狀態(tài)，送至實(shí)驗(yàn)室前樣品(通常為-18℃)檢測(cè)前要始終保持冷凍狀態(tài)，防止樣品暴露在二氧化碳?xì)怏w中。

通過(guò)長(zhǎng)期的實(shí)踐工作檢驗(yàn)和科學(xué)的實(shí)驗(yàn)表明，用于微生物檢驗(yàn)樣品的采取主要遵循以下原則1必須保證樣品的采取過(guò)程的無(wú)菌操作2、取樣要講究，有代表性不同樣品，有不同要求特別是某些特殊樣品，3、樣品的運(yùn)輸，接收和保存要保持樣品原樣，不能影響質(zhì)量4、樣品的保障密封和標(biāo)志要明確以備查詢。

［1］劉珍.化驗(yàn)員讀本上冊(cè)［M］.北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2004：78.

［2］雷質(zhì)文.食源微生物用樣品的抽取的制備手冊(cè)［M］.北京：中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社，2010：43.

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