第四軍醫(yī)大學(xué)西京醫(yī)院輸血科 (西安 710032)

安群星 安 寧 尹 文△

·調(diào)查研究·

西安地區(qū)男性獻(xiàn)血員HLA抗體篩查分析*

第四軍醫(yī)大學(xué)西京醫(yī)院輸血科 (西安 710032)

安群星 安 寧 尹 文△

目的：對(duì)西安地區(qū)部分男性獻(xiàn)血員的HLA抗體進(jìn)行檢測(cè)并分析，為提高輸血的安全性提供實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。方法：隨機(jī)收集西安地區(qū)男性無(wú)償獻(xiàn)血者標(biāo)本224 份，采用ELISA技術(shù)對(duì)HLA-Ⅰ類(lèi)、HLA-Ⅱ類(lèi)抗體進(jìn)行檢測(cè)；并對(duì)有無(wú)輸血史獻(xiàn)血者HLA抗體產(chǎn)生的差異進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。結(jié)果：在224 例男性獻(xiàn)血者中，52例獻(xiàn)血者HLA 抗體陽(yáng)性(23%) 。有輸血史男性獻(xiàn)血員HLA抗體陽(yáng)性率(42 %)明顯高于無(wú)輸血史男性獻(xiàn)血員HLA抗體陽(yáng)性率(6.0%)，但是有無(wú)輸血史對(duì)于HLA抗體產(chǎn)生類(lèi)型沒(méi)有明顯差異。結(jié)論：輸血可以明顯刺激機(jī)體產(chǎn)生HLA抗體。將來(lái)自于具有輸血史獻(xiàn)血員的血液制品用于臨床時(shí)，會(huì)增加TRALI發(fā)生的幾率，導(dǎo)致患者病死率上升。因此對(duì)獻(xiàn)血員進(jìn)行HLA抗體檢測(cè)對(duì)安全輸血十分重要。

輸血相關(guān)性急性肺損傷(Transfusion-related acute lung injury，TRALI) 是輸血過(guò)程中常見(jiàn)的嚴(yán)重并發(fā)癥，而患者輸入血制品中的HLA抗體是引起其發(fā)生的主要原因之一[1]。據(jù)統(tǒng)計(jì)約有65%～90%的HLA抗體陽(yáng)性獻(xiàn)血員可導(dǎo)致TRALI的發(fā)生[2]。而異體血液制品輸入又是刺激機(jī)體產(chǎn)生HLA抗體主要因素之一。因此為探討HLA抗體與輸血的關(guān)系, 筆者對(duì)西安地區(qū)224例男性獻(xiàn)血員進(jìn)行HLA 抗體檢測(cè)和分析，現(xiàn)報(bào)告如下。

對(duì)象與方法

1 研究對(duì)象 隨機(jī)選擇2013年11月至2014年4月來(lái)我院獻(xiàn)血的男性獻(xiàn)血員224例，年齡19～57歲。

2 方 法

2.1 標(biāo)本采集：采集男性獻(xiàn)血員2ml全血(EDTA-Na2抗凝)，分離血清后-70℃保存，待檢。

2.2 抗體檢測(cè)：采用ELISA技術(shù)對(duì)HLA-Ⅰ類(lèi)、HLA-Ⅱ類(lèi)抗體進(jìn)行檢測(cè)，檢測(cè)試劑盒購(gòu)自北京思爾成生物技術(shù)有限公司，實(shí)驗(yàn)過(guò)程按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。

2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法：采用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件，有無(wú)輸血史男性獻(xiàn)血員HLA抗體發(fā)生率的比較行χ2檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié) 果

在224例男性獻(xiàn)血員中共檢出53份HLA抗體陽(yáng)性標(biāo)本，總陽(yáng)性率23%；無(wú)輸血史男性獻(xiàn)血員117例，HLA抗體陽(yáng)性標(biāo)本7份，陽(yáng)性率6.0%；有輸血史男性獻(xiàn)血員107例，HLA抗體陽(yáng)性標(biāo)本45份，陽(yáng)性率42 %，經(jīng)χ2分析，有無(wú)輸血史比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=4.053，P<0.05)，見(jiàn)表1。

表1 224例男獻(xiàn)血者HLA 抗體檢測(cè)結(jié)果

在HLA抗體陽(yáng)性的52例樣本中，單一HLA-Ⅰ類(lèi)抗體陽(yáng)性20例，其中有輸血史16例；單一HLA-Ⅱ類(lèi)抗體陽(yáng)性17例，其中有輸血史15例；HLA-Ⅰ和Ⅱ類(lèi)抗體雙陽(yáng)性15例，其中有輸血史14例,見(jiàn)表2。

表2 52例抗體陽(yáng)性標(biāo)本中HLA-Ⅰ和Ⅱ類(lèi)抗體檢測(cè)結(jié)果(%)

討 論

輸血相關(guān)性急性肺損傷(Transfusion-related acute lung injury，TRALI) 是在輸血過(guò)程中或輸血后6h內(nèi)發(fā)生的以急性非心源性肺水腫和低氧血癥為主要表現(xiàn)的臨床綜合征[1]。TRALI的發(fā)生與多種因素有關(guān)，如與供者的情況、輸注的血液制品類(lèi)型、患者本身的情況等都有密切關(guān)系[3]。但是根據(jù)發(fā)生機(jī)制，TRALI發(fā)生的本質(zhì)還是患者體內(nèi)因?yàn)檩斞l(fā)生了白細(xì)胞抗原( Human leukocyte antigen，HLA)抗體反應(yīng)[4]，最終導(dǎo)致TRALI的發(fā)生[5]。

輸血是刺激機(jī)體產(chǎn)生HLA抗體的原因之一[6]。據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，輸血后受血者血清中HLA抗體的陽(yáng)性率可達(dá)31%～ 63%。本組檢測(cè)結(jié)果中，無(wú)輸血史的男性獻(xiàn)血員的HLA抗體陽(yáng)性率為6.0%，有輸血史的男性獻(xiàn)血員的HLA抗體陽(yáng)性率為陽(yáng)性率42%；且經(jīng)χ2分析，有無(wú)輸血史對(duì)于獻(xiàn)血員HLA抗體產(chǎn)生存在著顯著差異，與文獻(xiàn)報(bào)道相符。

盡管有無(wú)輸血史對(duì)HLA抗體產(chǎn)生有著顯著差異，但是有研究認(rèn)為輸血對(duì)于HLA抗體類(lèi)型沒(méi)有明顯影響[7]。本組也對(duì)52例陽(yáng)性標(biāo)本產(chǎn)生的HLA抗體類(lèi)型進(jìn)行了比較。在52例抗體陽(yáng)性標(biāo)本中，HLA-Ⅰ類(lèi)抗體20例(38.5%)，HLA-Ⅱ類(lèi)抗體17例13.5%)，I類(lèi)、Ⅱ類(lèi)均陽(yáng)性15例(28.8%)。僅從結(jié)果判斷I類(lèi)抗體檢出率要高于II類(lèi)抗體檢出率。但是因?yàn)楸敬魏Y查例數(shù)過(guò)少，不宜做數(shù)據(jù)作統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，因此不能得出結(jié)論。今后將增加篩查例數(shù)，進(jìn)行進(jìn)一步驗(yàn)證。

輸血次數(shù)與輸入血制品類(lèi)型與HLA抗體的產(chǎn)生也有密切關(guān)系。有研究報(bào)道血漿、血小板等血漿成分豐富的血液制品致TRALI發(fā)生率最高[8]。同時(shí)根據(jù)免疫學(xué)原理，機(jī)體接受異體抗原刺激的機(jī)會(huì)亦越多，產(chǎn)生抗體的機(jī)會(huì)也會(huì)越多。馬悅等在研究中也發(fā)現(xiàn)HLA抗體檢出率隨著患者接受輸血次數(shù)的增加而增高[9]。因?yàn)楂I(xiàn)血員調(diào)查資料限制的原因，本文并未對(duì)有輸血史的獻(xiàn)血員進(jìn)行輸入血液制品的類(lèi)型以及輸血次數(shù)進(jìn)行分類(lèi)統(tǒng)計(jì)。

目前已有多項(xiàng)研究表明HLA抗體與TRALI的發(fā)生有著密切關(guān)系[1，10]。反復(fù)輸血，尤其是輸入未去除白細(xì)胞的全血或紅細(xì)胞制劑時(shí)會(huì)提高機(jī)體產(chǎn)生HLA抗體幾率，因此當(dāng)具有輸血史的人做為獻(xiàn)血員，其血液制品會(huì)增加輸血時(shí)TRALI發(fā)生的風(fēng)險(xiǎn)；而且當(dāng)這些人作為受者再次輸血時(shí)，也會(huì)增加TRALI發(fā)生率。因此為更好的預(yù)防TRALI的發(fā)生，臨床上首先應(yīng)該嚴(yán)格控制異體輸血指征，避免不必要的輸血或者積極應(yīng)用自體輸血是降低TRALI發(fā)生率和病死率的措施之一。此外，還應(yīng)該針對(duì)某些特殊患者，例如具有輸血史的患者、曾經(jīng)發(fā)生過(guò)的TRALI的患者等[11]。在輸血前進(jìn)行HLA抗體的檢測(cè)，以預(yù)防TRALI的發(fā)生。當(dāng)然，積極推行獻(xiàn)血者的免疫抗體篩查也是預(yù)防TRALI發(fā)生的重要措施。

[1] Goldman M，Webert KE，Arnold DM，etal．Proceedings of a consensus conference：Towards an understanding[J]. TRALI．Transfus Med Rev, 2005,19:2-31．

[2] Laura Porretti, Alessandra Cattaneo, Elena Coluccio,etal. Implementation and outcomes of a transfusion-related acute lung injury surveillance programme and study of HLA/HNA allo-immunisation in blood donors[J]. Blood Transfus, 2012, 11:0089.

[3] Silliman CC, Bjornsen AJ, Wyman TH,etal. Plasma and lipids from stored platelets cause acute lung injury in an animal model [J]. Transfusion, 2003, 43:633-40.

[4] Webert KE, Blajchman MA. Transfusion-related acute lung injury[J]. Curr Opin Hematol, 2005, 12:480-487.

[5] Triulzi DJ．Transfusion-related acute lung injury: An update[J]. American Society of Hematology, 2006: 497-501.

[6] 侯 軍，孫福廷，趙月凱．反復(fù)輸血患者HLA抗體檢測(cè)[J]．濰坊醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2007，29(5)：476．

[7] Kakaiya RM，Triulzi DJ，Wright DJ，etal．Prevalence of HLA antibodies in remotely transfused or alloexposed volunteer blood donors[J]. Transfusion, 2010, 50(6): 1328-1334．[8] Vlaar A, Hofstra J, Kulik W,etal．Supernatant of stored platelets causes lung inflammation and coagulopathy in a novel in vivo transfusion model[J]．Blood, 2010, 16(8): 1360-1368．

[9] 馬 悅，朱麗遵，王忠利. 106例反復(fù)輸血患者血清中抗HLA抗體檢測(cè)的結(jié)果分析[J]. 中國(guó)實(shí)驗(yàn)診斷學(xué), 2009, 13(12): 1788-1789.

[10] Chapman CE，Stainsby D，Jones H，etal．Ten years of hem vigilance repots of transfusion—related acute lung injury in the United Kingdoln and the impact of preferential use of male donor plasroa[J]．Transfusion，2009，49(3)：440-452．

[11] Nancy Dunbar MD, Margaret Cooke BS, Mohammad Diab MD. Transfusion related acute lung injury after transfusion of maternal blood: a case control study [J]. Spine (Phila Pa 1976), 2010, 35(23): E1322-E1327.

(收稿：2015-03-09)

Screening analysis of HLA antibodies from male donor population in Xi’an area

Department of Blood Transfusion, Xijing Hospital, Fourth Military Medical University (Xi’an 710032)

An Qunxing An Ning Yi Wen

Objective: To detect and analyze HLA antibody of men donates in Xi 'an, and provide experimental data for improving the security of blood transfusion. Method: Randomly collected serum specimens of 224 men donates, and tested HLA-Ⅰ, HLA -Ⅱ antibody using ELISA; Statistical analyze the differences on HLA antibodies between non-experience of transfusion and experience of transfusion donors. Results: For 224 men donates, HLA antibody of 52 donates were positive (23%). The rate of HLA antibody positive of experience of transfusion men donates 42%) was significantly higher than that of non- experience of transfusion men donates(6.0%). But there was no significantly difference on HLA antibodies types between non-experience of transfusion and experience of transfusion men donates. Conclusion: The transfusion could stimulate generation of HLA antibody, obviously. So the incidence of TRALI and the death rate of patient induced by TRALI may be increased, because transfusion with blood products from HLA antibody positive donors. So the investigation of frequency and distribution of HLA antibodies is very important for safe transfusion．

@HLA @HLA antibody Blood transfusion Acute lung injury Man

*軍隊(duì)十二五項(xiàng)目(AWS11J007-05)

@HLA @HLA抗體 輸血 急性肺損傷 男人

R551

A

10.3969/j.issn.1000-7377.2015.07.064

△ 通訊作者