陜西省人民醫(yī)院(西安710068)

梁 磊 李秀紅 鄒 敏△ 侯玉霞△#

雌激素對SD大鼠舌下神經(jīng)核電生理的影響*

陜西省人民醫(yī)院(西安710068)

梁 磊 李秀紅 鄒 敏△侯玉霞△#

目的：研究雌激素對SD大鼠舌下神經(jīng)核電生理的影響。探討雌激素保護上氣道穩(wěn)定性的機制，為OSAHS的臨床預防和治療提供理論依據(jù)。方法：選取成年7周齡雌性Sprague-Dawley大鼠30只, 隨機等量分為假手術(shù)組(SHAM組)，去卵巢組(OVX組)，去卵巢+雌二醇組(OVX+E2組)。通過卵巢切除與雌激素回補建立不同雌激素水平的SD大鼠模型，通過在體細胞外記錄技術(shù)檢測雌激素對舌下神經(jīng)核自發(fā)電活動的影響。結(jié)果：OVX組與SHAM組和OVX+E2組相比，舌下神經(jīng)核的自發(fā)放電頻率低(小)于其他兩組，且具有統(tǒng)計學差異(P < 0. 05)。結(jié)論：雌激素可以通過某種途徑來改變舌下神經(jīng)核的興奮性，進而改變頦舌肌及其他舌內(nèi)外肌的緊張性來影響上氣道的穩(wěn)定。

阻塞性睡眠呼吸暫停及低通氣綜合征(Obstructive sleep apnea syndrome hypopnea，OSAHS)是一種臨床常見的睡眠呼吸紊亂性疾病，以睡眠時上氣道反復塌陷阻塞引起呼吸暫停和通氣不足并伴有打鼾為特征[1]。男性發(fā)病率約為女性的2～4倍，絕經(jīng)后女性患病率較絕經(jīng)前明顯升高，提示雌激素對OSAHS的發(fā)病可能具有保護作用[2]。頦舌肌是重要的上氣道擴大肌，其收縮使舌前伸和壓低，被稱為上氣道的“安全肌”。本研究通過對不同雌激素水平大鼠舌下神經(jīng)核電生理特征的研究，探索雌激素影響影響上氣道穩(wěn)定性的可能機制。

材料與方法

1 實驗模型 選取SD大鼠30只，體重300g左右，由西安交通大學醫(yī)學院動物實驗中心提供(許可證號:SCXK(陜)2007-001)。將30只SD大鼠隨機等量分為假手術(shù)組(SHAM組)，去卵巢組(OVX組)，去卵巢+雌二醇(OVX+E2組)，大鼠去卵巢一周后，通過頸部皮下注射雌激素法建立不同水平的動物研究模型。

2 實驗方法 10%水合氯醛腹腔注射麻醉大鼠(0.4 ml/100g)，維持體溫在36.5℃。大鼠俯臥位，用耳桿將頭固定于腦立體定位儀上，核團定位：根據(jù)大鼠腦立體定位圖譜后囟后4.90±0.02mm、旁開0.10±0.02mm做標志, 鉆孔、去除邊緣骨碎屑，硬腦膜。將溫熱石蠟油滴入鉆孔內(nèi)，平齊骨面。測量囟后13.7mm骨面與前后囟水平高度差。玻璃微電極用直徑0.8mm的玻璃毛胚管固定在微電極拉制儀上，電極管內(nèi)注入2%的膀胺天藍。小心安放玻璃微電極，打開儀器，連接電極。再次調(diào)整定位坐標，根據(jù)監(jiān)聽器監(jiān)測的聲音變化,以及監(jiān)視器顯示基線突然變細的現(xiàn)象,判斷電極尖端進入空氣與石蠟油界面，記錄高度為0。用推進操縱器將微電極2-10um/s緩慢推送至進針至7000um左右深度。當電信號進入靜息狀態(tài)，繼續(xù)推進至出現(xiàn)電信號或者電位變化，再推進200um左右觀察放電情況并記錄。根據(jù)大概核團位置和舌下神經(jīng)核神經(jīng)元自發(fā)簇發(fā)放電的電生理特性尋找鑒別舌下神經(jīng)元。若出現(xiàn)簇發(fā)性自發(fā)放電至少觀察平穩(wěn)后放電5min,并保存。

結(jié) 果

OVX組舌下神經(jīng)核的自發(fā)放電頻率低于OVX+E2組和SHAM組，且具有統(tǒng)計學差異(P<0.05)，OVX+E2組與SHAM組無統(tǒng)計學差異(附圖)。

附圖 舌下神經(jīng)核細胞外自發(fā)放電記錄結(jié)果(A：舌下神經(jīng)核自發(fā)放電單個動作電位；B：舌下神經(jīng)核細胞外自發(fā)放電記錄結(jié)果)

討 論

舌下神經(jīng)核是參與呼吸運動的重要神經(jīng)核團，在維持OSAHS患者上呼吸道的通暢方面發(fā)揮著重要的作用[3]。舌下神經(jīng)元接收高級中樞及周圍神經(jīng)元和神經(jīng)遞質(zhì)的多方面調(diào)控，具有一定的自動節(jié)律性[3-5]。雌激素為一種類固醇激素，主要由卵巢合成，擴散到靶組織后與其特異性受體結(jié)合發(fā)揮其生物學效應[6]。其可通過與中樞神經(jīng)細胞的ERα、β結(jié)合，調(diào)節(jié)神經(jīng)元內(nèi)的蛋白質(zhì)的合成,影響細胞的分化、提高多種中樞神經(jīng)細胞的活性[7]。

本研究通過建立不同雌激素水平大鼠模型和在體細胞外放電記錄技術(shù)，初步探索雌激素對舌下神經(jīng)核的影響。實驗中我們記錄到波寬1.5ms左右的自發(fā)周期性簇發(fā)性放電活動，這種電形式是常見的神經(jīng)元胞體的一種放電模式，且與Peever等[5]記錄到的舌下運動神經(jīng)元放電模式一致。實驗結(jié)果顯示SD大鼠體內(nèi)雌激素水平降低，可使舌下神經(jīng)核的自發(fā)放電活動明顯減弱，而且通過雌激素回補能夠增強或維持舌下神經(jīng)核的放電活動，說明雌激素可以通過某種途徑來改變舌下神經(jīng)核的興奮性，進而改變頦舌肌及其他舌內(nèi)外肌的緊張性來影響上氣道的穩(wěn)定。但是我們對雌激素是通過哪種通路來改變舌下神經(jīng)核電活性的還并不了解，今后可以通過在體多通道同步記錄技術(shù)研究雌激素對舌下神經(jīng)核及周圍相關(guān)通路神經(jīng)元的影響，來全面了解雌激素對舌下神經(jīng)核影響機制。

[1] 中華醫(yī)學會呼吸病學分會睡眠呼吸疾病學組.阻塞性睡眠呼吸暫停低通氣綜合征診治指南(草案)[J].中華結(jié)核和呼吸雜志,2002，25(4):195-196.

[2] Bixler EO, Vgontzas AN, Lin HM,etal.Prevalence of sleep-disordered breathing in women:effects of gender[J]. Am J Respi Crit Care Med,2001, 163(3 Pt 1): 608-613.

[3] Awczuk A, Mosier KM. Neural Control of Tongue Movement With Respect To Respiration and Swallowing[J]. Critical Reviews in Oral Biology & Medicine，2001，12(1)：18-37.

[4] Peever JH，Necakov A，Duffin J. Nucleus raphe obscurus modulates hypoglossal output of neonatal rat in vitro transverse brain stem slices. Journal Of Applied Physiology,2001,90(1):269-279.

[5] 萬選才. 大鼠舌下神經(jīng)核分組的肌肉布局式定位及神經(jīng)調(diào)控回路[J]. 遼寧畜牧獸醫(yī). 1997(4): 42-43.

[6] Anderson DC. Sex-hormone-binding globulin[J].Clin Endocrinol (Oxf) 1974;3:69-96.

[7] Christian J. Gruber MD. Walter Tschugguel. Production and Actions of Estrogens[J]. N Engl J Med，2002，346：340-352.

(收稿：2015-04-08)

*國家自然基金青年項目(81000030)

睡眠呼吸暫停，阻塞性 @低通氣綜合征 舌下神經(jīng) 雌激素類 動物，實驗 大鼠

R562

A

10.3969/j.issn.1000-7377.2015.08.005

△西安交通大學口腔醫(yī)院正畸科

#通訊作者