諶曉燕，張銀輝

（襄陽(yáng)市中醫(yī)醫(yī)院檢驗(yàn)科，湖北 441000）

兩種乙型肝炎病毒前S1抗原試劑盒檢測(cè)結(jié)果的可比性

諶曉燕，張銀輝

（襄陽(yáng)市中醫(yī)醫(yī)院檢驗(yàn)科，湖北 441000）

目的評(píng)價(jià)兩種乙型肝炎病毒（HBV）前S1抗原試劑盒檢測(cè)結(jié)果的可比性。方法對(duì)860例襄陽(yáng)市中醫(yī)醫(yī)院住院、門(mén)診患者HBsAg陽(yáng)性者同時(shí)用兩個(gè)公司的酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定（ELISA）試劑盒進(jìn)行前S1抗原的檢測(cè)，用另一公司的熒光定量PCR試劑盒檢測(cè)HBV－DNA。結(jié)果在860例確認(rèn)HBsAg陽(yáng)性患者中，復(fù)星長(zhǎng)征試劑盒檢測(cè)的陽(yáng)性例數(shù)為357例，陽(yáng)性率為41.5%；英科新創(chuàng)試劑盒檢測(cè)的陽(yáng)性例數(shù)為787例，陽(yáng)性率為91.5%；HBV－DNA檢測(cè)的陽(yáng)性例數(shù)為323例，陽(yáng)性率為38.0%。若以HBV－DNA作為參考方法，復(fù)星長(zhǎng)征試劑盒假陽(yáng)性數(shù)為52例，假陽(yáng)性率為3.5%；英科新創(chuàng)試劑盒假陽(yáng)性數(shù)為464例，假陽(yáng)性率為53.5%。結(jié)論兩種HBV前S1抗原試劑盒檢測(cè)結(jié)果的可比性較差，在臨床檢驗(yàn)中選用試劑盒需慎重。

乙型肝炎病毒前S1抗原； 酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定； 試劑盒； 可比性

乙型病毒性肝炎是由乙型肝炎病毒（HBV）引起的、以肝臟炎性病變?yōu)橹?，是一種由于肝細(xì)胞大量凋亡和壞死而出現(xiàn)肝功能?chē)?yán)重?fù)p害的臨床綜合征，并可引起多器官損害的一種疾病。乙型肝炎是我國(guó)當(dāng)前流行最為廣泛，危害性最嚴(yán)重的一種傳染性疾病。我國(guó)是HBV感染人數(shù)最多的國(guó)家之一，約10%的人口感染HBV，每年約有1%的乙型肝炎患者發(fā)生重癥肝炎［1］。乙型病毒性肝炎無(wú)一定的流行期，一年四季均可發(fā)病，但多屬散發(fā)，乙型肝炎的傳染性就跟乙肝患者體內(nèi)的病毒復(fù)制情況有很大的關(guān)系。乙型肝炎前S1抗原可以反映HBV在體內(nèi)復(fù)制情況以及傳染性的強(qiáng)弱，是乙型肝炎患者診斷、治療和預(yù)后評(píng)估的一個(gè)重要標(biāo)志［2］，是一項(xiàng)較為方便、經(jīng)濟(jì)的檢測(cè)指標(biāo)。為了進(jìn)一步探討HBV前S1抗原在臨床中的檢驗(yàn)中的準(zhǔn)確性，筆者對(duì)兩種HBV前S1抗原試劑盒進(jìn)行了比較。

1 資料與方法

1.1 一般資料 860例HBsAg陽(yáng)性患者均為湖北省襄陽(yáng)市中醫(yī)醫(yī)院2013年1月至2013年6月的門(mén)診、住院患者，標(biāo)本均為患者空腹抽取的4～6mL靜脈血。

1.2 方法 所有檢測(cè)者均空腹抽靜脈血5mL，分離血清，血清標(biāo)本如在24h內(nèi)檢測(cè)則置于4℃冰箱，否則置于－30℃冰箱內(nèi)保存待檢測(cè)，避免反復(fù)凍融。對(duì)所有標(biāo)本分別用復(fù)星長(zhǎng)征醫(yī)學(xué)科學(xué)有限公司和英科新創(chuàng)（廈門(mén)）科技有限公司的酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定（ELISA）試劑盒檢測(cè)前S1抗原；HBV－DNA檢測(cè)采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)，試劑盒為廣州達(dá)安公司產(chǎn)品。各項(xiàng)檢測(cè)均嚴(yán)格按照試劑盒及儀器使用說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作。使用的檢測(cè)儀器為深圳愛(ài)康電子有限公司生產(chǎn)的Uranus AE－100全自動(dòng)酶免分析儀和羅氏公司生產(chǎn)的實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)儀Lightcycler 480。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS13.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，陽(yáng)性率的比較采用χ2檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

在860例確認(rèn)HBsAg陽(yáng)性患者中，上海復(fù)星長(zhǎng)征醫(yī)學(xué)科學(xué)有限公司試劑盒檢測(cè)前S1抗原其陽(yáng)性數(shù)為357例，陽(yáng)性率為41.5%；英科新創(chuàng)（廈門(mén)）科技有限公司試劑盒檢測(cè)前S1抗原陽(yáng)性數(shù)為787例，陽(yáng)性率為91.5%；HBV－DNA陽(yáng)性數(shù)為323例，陽(yáng)性率為38.0%；英科新創(chuàng)試劑盒陽(yáng)性率高于復(fù)興長(zhǎng)征試劑盒，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見(jiàn)表1。

3 討 論

HBV蛋白的編碼區(qū)分：s區(qū)、c區(qū)、P區(qū)、x區(qū)，其中HBV的衣殼蛋白包括S蛋白和前S蛋白，后者又分為前Sl蛋白和前S2蛋白，前S1蛋白是HBV外膜蛋白，在病毒侵入肝細(xì)胞過(guò)程中起重要作用，含有肝細(xì)胞膜受體，最重要的介導(dǎo)部位是前S1蛋白的氨基酸（AA）21～47片段，變異的病毒只要這一區(qū)段完好就有傳染性。含有前S1的蛋白主要存在于Dane顆粒和管型顆粒上［3］，在HBV感染肝細(xì)胞和機(jī)體免疫應(yīng)答的過(guò)程中起重要作用［4－5］，提示機(jī)體內(nèi)含有HBV就有前S1抗原，可見(jiàn)前S1抗原在臨床上是多么重要的。前S1抗原在HBV血清標(biāo)志物中越來(lái)越受到臨床醫(yī)生的重視，因?yàn)樗鼘?duì)乙型肝炎患者診斷、治療和預(yù)后評(píng)估有著非常重要的價(jià)值。

復(fù)星長(zhǎng)征試劑盒采用ELISA雙抗體夾心一步法檢測(cè)樣本的HBV前S1蛋白；英科新創(chuàng)試劑盒采用夾心法原理，在微孔板預(yù)包被抗HBV前S1蛋白單克隆抗體，與血清中HBV前S1抗原反應(yīng)，再加入辣跟過(guò)氧化酶標(biāo)記的 HBV表面抗體（抗HBs－HRP抗體），形成免疫復(fù)合物檢測(cè)樣本的HBV前S1蛋白，原理基本一樣。英科新創(chuàng)試劑盒陽(yáng)性率明顯高于復(fù)星長(zhǎng)征試劑盒。HBV血清標(biāo)志物全陰性的健康人血清前S1抗原均陰性，說(shuō)明前S1抗原的假陽(yáng)性率不高。有報(bào)道血清中的病毒已經(jīng)測(cè)不到了，而肝細(xì)胞內(nèi)仍有病毒存在時(shí)，檢測(cè)前S1抗原陽(yáng)性［7－8］。有研究報(bào)道前Sl抗原與HBA－DNA檢測(cè)陽(yáng)性高度吻合［6－7，9］。若以HBV－DNA陽(yáng)性作為參照的話(huà)，復(fù)星長(zhǎng)征試劑盒假陽(yáng)性率為3.5%；英科新創(chuàng)試劑盒假陽(yáng)性率為53.5%?？梢?jiàn)英科新創(chuàng)試劑盒是不符合在臨床中使用的，它的陽(yáng)性率高達(dá)91.5%，與乙型肝炎表面抗原陽(yáng)性率100.0%相差無(wú)幾。

因此可以看出兩種HBV前S1抗原試劑盒檢測(cè)結(jié)果的可比性較差，說(shuō)明目前市場(chǎng)上的一些試劑在檢測(cè)性能（敏感度、特異性和精密度等）方面還存在一些不足，以至于在各個(gè)廠(chǎng)家試劑中陽(yáng)性率參差不齊，同一標(biāo)本之間不存在可比性，應(yīng)加以改進(jìn)和提高。臨床實(shí)驗(yàn)室選用試劑盒需慎重。

［1］ 李蘭娟，陳瑜.重型肝炎發(fā)病機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究進(jìn)展［J］.中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2005，28（7）：755－757.

［2］ 徐友文，李飛.血清前S＿1抗原檢測(cè)對(duì)判斷乙肝病毒復(fù)制的意義［J］.亞太傳統(tǒng)醫(yī)藥，2010，6（4）：88－89.

［3］Dash S，Rao KVS，Panda SK.Receptor for pre－Sl（21－47）component of hepatitis B virus on the liver cell：Role in virus cell interaction［J］.J Mad Virol，2010，37（2）：116－121.

［4］ 程兆晶，劉曉清.樹(shù)突細(xì)胞對(duì)乙型肝炎慢性化作用機(jī)制的研究進(jìn)展［J］.中華醫(yī)學(xué)雜志，2013，93（15）：1192－1194.

［5］ 張艷麗，劉鳳，李明慧，等.慢性乙型肝炎干擾素治療前后樹(shù)突狀細(xì)胞的變化及其與療效相關(guān)性研究［J］.中華實(shí)驗(yàn)和臨床病毒學(xué)雜志，2012，26（2）：120－122.

［6］江秀娟，李亞琴，陳俊瑤，等.乙型肝炎病毒前S＿1抗原檢測(cè)的臨床意義［J］.衛(wèi)生職業(yè)教育，2008，16（2）：135－136.

［7］閔福援，王健.前S1抗原在診斷乙肝病毒復(fù)制時(shí)的臨床價(jià)值［J］.中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2005，28（6）：584－586.

［8］Petit MA，Buffello－Le Guillou D，Roche B，et al.Residual hepatitis B virus particles in liver transplant recipients receiving lamivudine：PCR quantitation of HBV DNA and ELISA of preS1antigen［J］.J Med Virol，2001，65（3）：493－504.

［9］張冬霞，徐傳和，李琳.乙型肝炎病毒前S1抗原檢測(cè)的臨床意義［J］.中國(guó)實(shí)驗(yàn)診斷學(xué)，2007，11（5）：641－644.

10.3969/j.issn.1673－4130.2015.03.048

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2014－09－18）