王姜琳(嘉定區(qū)中心醫(yī)院檢驗科,上海 201800)
·個案與短篇·
血小板假性減低
王姜琳(嘉定區(qū)中心醫(yī)院檢驗科,上海 201800)
目前血細胞分析儀已逐步取代手工法成為它最主要的檢測方法,雖具有快速,簡便,重復性好等優(yōu)點,但由于其原理(電阻抗原理)的限制,在實際檢驗工作中常常會出現(xiàn)血小板的假性減低。近年來有不少關于研究血小板假性減低的文獻,在此對這些文獻作了以下一些總結。
在日常臨床檢驗工作中,當檢測出血小板結果偏低時,首先需要判斷其是否是假性減低,判斷方法大致有以下幾種。
1.1 重復檢測標本 在不同種機器下重復檢測血小板偏低的標本,看其結果是否具有可比性。若檢測重復性差,需推片鏡檢,在細胞分布均勻處根據(jù)血小板與紅細胞的比例估算血小板個數(shù),與機器檢測結果比較看是否相符合。
1.2 觀察直方圖 由于RBC與PLT的檢測在同一通道,小RBC和細胞碎片及血小板自身的聚集對血小板計數(shù)及平均血小板體積的影響很大,血小板直方圖能反映這些變化。正常血小板直方圖呈左偏態(tài)分布,主要集中在2~20fL內,一般25~30fL的某一點與橫坐標接近。根據(jù)黃祥麗[1]研究,若有小紅細胞(小紅細胞體積在25fL內影響較大,而在25fL外影響不明顯)干擾,直方圖顯示峰的右側離橫坐標較高,呈拖尾狀,MCV為低平正常,血涂片可見較多小紅細胞。若有血小板聚集,直方圖顯示峰的左側起點較高,離橫坐標有0.6cm,右側在20fL處,離橫坐標0.4cm,與正常血小板直方圖有明顯差異,同時MPV增高,MCV和RDW正常,可排除小紅細胞干擾。若血小板體積過大(>25fL),曲線峰右側右移,在35fL處才接近橫坐標,MPV值顯著增高。
1.3 根據(jù)MCV和MPV判斷 根據(jù)鄒喬云等[2]研究顯示,當MCV>80fL,MPV<13fL時,儀器的檢測結果與手工法相比無顯著不同;當MCV<80fL時,儀器法計數(shù)結果高于手工計數(shù)結果,這是因為小紅細胞或其他顆粒信號可能被誤視為血小板而導致儀器法計數(shù)血小板假性增高;當MPV<8fL或MPV>13fL時,儀器法計數(shù)結果明顯低于手工計數(shù)法,原因是當血小板體積小于2fL或大于20fL時,儀器會自動將其排除在外,所以儀器法的計數(shù)結果低于手工計數(shù)法。
2.1 操作因素引起的血小板假性減低
2.1.1 固有誤差 血細胞分析儀與其試劑,方法應當配套,檢驗工作者需于每日檢測前做好室內質控,并參加室間質控,以確保檢驗結果的準確性和可溯源性,從而避免血小板計數(shù)的假性減低。
2.1.2 采血不順 當采血不暢用力擠壓時會使過多的組織液進入血液中,而使得血液被稀釋;此外采血速度慢,還會引起血液形成肉眼可見或不可見的凝集,從而造成血小板計數(shù)的假性減低。
2.1.3 采血量 采血量與抗凝劑的比例是否恰當將影響血小板計數(shù)的準確性,一般抗凝劑與血液比例正常為1∶9,采血量最好為1.5mL,不應超過2mL[3],否則血液量過多而抗凝劑相對不足,會使血小板發(fā)生聚集,從而導致血小板計數(shù)假性減低。
2.1.4 標本放置時間 根據(jù)潘健華等[4]研究顯示,不同放置時間對血小板計數(shù)是存在影響的。研究認為標本采集后5min內血小板測定值明顯減低,30min及90min測定結果與對照值接近,2h后隨著放置時間的延長,血小板計數(shù)值有下降趨勢。血標本在采血30min內可形成血小板可逆聚集體,而使血小板計數(shù)下降;血標本于室溫下放置超過2h后,血小板計數(shù)顯著減低,因為血小板體積小并且具有易于黏附,聚集和破壞,室溫下離體時間過長,可發(fā)生變形、自溶、體積縮小,且放置時間越長破壞越多。因此血小板檢測應于30min至2h內完成。
2.2 血小板聚集性增高引起的血小板計數(shù)假性減低
2.2.1 EDTA依賴造成的血小板假性減低 根據(jù)國際血液學標準委員會(ICSH)認定,EDTA-K2作為血細胞分析的抗凝劑已在臨床檢驗工作中被廣泛應用。EDTA-K2抗凝血可造成血小板的假性減低,它在臨床的發(fā)生率為0.09%~0.21%。EDTA-K2抗凝血引起血小板假性減低的機制是因為它誘導血小板膜表面隱蔽抗原暴露或對抗原進行修飾,導致血漿中預存的循環(huán)自身抗血小板抗體與之發(fā)生反應從而引起血小板相互凝集造成血小板假性減低。此類患者血小板檢測重復性差,顯微鏡鏡檢可見血小板成堆或呈衛(wèi)星現(xiàn)象,并換用肝素及枸櫞酸鈉等抗凝劑復檢時的計數(shù)結果與EDTA鹽作為抗凝劑時的檢測結果有明顯差異。因此當EDTA-K2抗凝血導致血小板假性減低時,必要時可換用肝素及枸櫞酸鈉等抗凝劑對其進行甄別,以判斷血小板為真性減低還是假性減低,若為假性減低再利用手工法進行重新計數(shù)。
2.2.2 某些藥物引起的血小板假性減低 (1)高濃度的Mg離子。臨床上常用MgSO4來預防控制妊高癥子癇的發(fā)作及用于治療先兆子癇。高濃度的Mg2+有類似Ca2+的生理作用,通過改變血小板胞內cAMP水平而引起血小板聚集,造成血小板計數(shù)假性降低。(2)利奈唑胺抗菌藥。利奈唑胺(第1個用于臨床的惡唑烷酮類抗菌藥)聯(lián)用方案治療80歲以上感染患者時血小板減少的發(fā)生率為67.9%,目前它引起血小板減低的機制還不是很明確,一般認為是骨髓抑制,有人認為可能與免疫介導有關,服用某些抗菌藥物后也會引起血小板假性減低。研究還表明這種減低是可逆的,當停藥后可逐漸回升。
2.2.3 某些疾病 參閱多篇文獻,某些疾病如高血壓、高血脂、自身免疫性疾病,肺內感染等均會使血小板聚集性增高而引起血小板計數(shù)假性減低。
2.3 血小板體積因素引起的血小板假性減低 由于目前血細胞分析儀原理(電阻抗原理)的限制,它只能檢測出正常體積(2~20fL)范圍內的血小板,當血小板體積小于2fL時會被當作噪音不進行計數(shù),而當血小板體積大于20fL時會被當作紅細胞而不計入血小板總數(shù)中,它經(jīng)常發(fā)生于ITP,巨大血小板綜合征及敗血癥等疾病中。因此當血小板體積過小或過大時均會引起血小板假性減低。
綜上所述,血小板假性減低的原因復雜多樣,在日常檢驗工作中,應該謹慎地對待。首先應該規(guī)范操作,避免因人為原因導致血小板假性減低,其次對于發(fā)現(xiàn)血小板減低的標本,應先于同種機器下重復檢測并詢問病史,有必要需聯(lián)合多種方法如重新采樣,更換抗凝劑,手工計數(shù)等復檢,以保證檢驗結果的可靠性,從而為臨床提供有價值的診療依據(jù)。
[1] 黃祥麗.血小板直方圖對血小板結果的參考作用[J].檢驗醫(yī)學與臨床,2011,8(11):105-107.
[2]鄒喬云,郭慧.儀器法計數(shù)血小板時MCV、MPV對結果的影響[J].中外健康文摘,2011,8(40):23-24.
[3] 孔英蘭,包文芳.血液分析儀計數(shù)血小板假性減低的影響因素[J].實用醫(yī)技雜志,2013,20(7):102-103.
[4]潘健華,蔣翡翊,韓永.EDTA-K2抗凝劑標本不同放置時間對血小板計數(shù)的影響[J].海南醫(yī)學,2010,21(18):90-91.
10.3969/j.issn.1673-4130.2015.03.070
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1673-4130(2015)03-0430-02
2014-10-25)